免疫球蛋白纯化技术——盐析法纯化免疫球蛋白
在大多数情况下，免疫血清、杂交瘤细胞培养上清以及腹水中的抗体需经纯化后再用于各种免疫学检测中去。免疫球蛋白常用的纯化方法有盐析法、凝胶过滤、离子交换层析、亲和层析以及高效液相色谱等方法。（来源：医学基础免疫学实验指导，主编金伯泉李恩善，第1 版，北京：世界图书出版社，1990）实验方法原理蛋白质在水溶液中的溶解度是由蛋白质周围亲水基团与水形成水化膜的程度，以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。当用中性盐加入蛋白质溶液，中性盐对水分子的亲和力大于蛋白质，于是蛋白质分子周围的水化膜层减弱乃至消失。同时，中性盐加入蛋白质溶液后，由于离子强度发生改变，蛋白质表面电荷大量被中和，更加导致蛋白溶解度降低，使蛋白质分子之间聚集而沉淀。实验材料血清试剂、试剂盒生理盐水硫酸铵溶液萘氏试剂磷酸盐缓冲盐液磺基水杨酸仪器、耗材冰箱离心机搅拌器紫外分光光度计扭力天平粗天平透析袋尼龙绳竹棒、PH试纸镊子剪刀烧杯量筒吸管滴管灭菌小瓶试管实验步骤1. ......阅读全文
吸附法纯化病毒实验
实验方法原理 实验材料 待纯化的病毒试剂、试剂盒 凝胶材料仪器、耗材 烧杯实验步骤 磷酸钙凝胶：这是病毒凝胶吸附法中较为常用的凝胶，由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4 溶液混合制备凝胶状沉淀物，用 0. 001mol/L 磷酸盐缓冲液悬浮，置千 4℃ 4~5
DNA纯化实验——DNA凝胶回收试剂盒纯化法
DNA纯化可用于：（1）获得高纯度的DNA；（2）浓缩DNA；（3）测序、遗传信息分析等分子生物学应用。实验方法原理本试剂盒适合从各种琼脂糖凝胶中提取多至 8 μg DNA（70 bp-10 Kb），回收率为 60-85%。琼脂糖凝胶在温和的缓冲液(DE-A 溶液)中溶解，其中的保护剂能防止线状 D
细胞分离纯化技术
实验方法原理 常用来分离人外周血单个核细胞（PBMC）的分层液比重是 1.077±0.001 的 聚 蔗糖（Ficoll）-泛影葡胺（Urografin）（F/H）分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体，呈中性，水性高，平均分子量为400000，当密度为1.2 g/ml仍未超出正常生理性
细胞分离纯化技术
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞 实验方法原理 常用来分离人外周血单个
细胞分离纯化技术
Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞实验方法原理Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低（
MinElute－DNA纯化技术
作分子生物学实验，核酸纯化、酶切、克隆算是最基本的步骤了。因为要做定向克隆，通常要作双酶切。为了省时省事儿，我们常常想方设法把两个酶放在一起切。可是事情并非总那么称心如意——两个酶经常在一起闹别扭，不是反应温度不同啦，就是Buffer不同，有时候两个酶切位点连在一起，必须先切一个再切另一个，否
细胞分离纯化技术
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞 实验方法原理 常用来分离人外周血单个
从抗血清、腹水或杂交瘤上清液中纯化免疫球蛋白G组分
实验方法原理 虽然亲和层析法是进行特异性抗体纯化的首选，然而有时这种纯化方式却非必需，或者无法实施进行（如有时抗原量不充足）。实验材料 抗血清、腹水或杂交瘤上清液试剂、试剂盒 饱和硫酸铵溶液（SAS)仪器、耗材 透析膜（MWCO 12 000〜14 000）、涡旋混合器实验步骤 1)于 4℃ 不断搅
免疫球蛋白G(IgG)的纯化—蛋白G交联琼脂糖凝胶亲和层析
实验步骤 蛋 白 G 和蛋白A 在 不 同PH 下结合抗体的能力不同：蛋 白 G 在 低 pH 下与抗体结合力强，在 高 pH下与抗体结合力弱。但 一 些 抗 体（小 鼠 IgG1 和兔、人抗体）在 高 pH(8〜 1 0 ) 下仍与蛋白G 结合 。 一 般 推 荐 最 好 在 pH5 时结合抗体，
从抗血清、腹水或杂交瘤上清液中纯化免疫球蛋白G组分
DEAE-Affi-Gel Blue层析法分级分离IgG实验材料抗血清、腹水或杂交瘤上清液试剂、试剂盒DEAE-Affi-Gel Blue、加样缓冲液、洗脱缓冲液、晶体形式的NaN3仪器、耗材移液枪、烧杯实验步骤1）根据制造商的说明准备DEAE-Aff1-Gel Blue柱子。于4℃用5倍柱床体积的
免疫球蛋白提取技术
实验材料 动物血清初乳胆汁试剂、试剂盒 硫酸铵NH4OHPBSNaH2PO4NaH2PO42H2OBaCl2HgIKIHClNaOHPBDEAE52葡聚糖凝胶G200无水硫酸钠硼酸盐缓冲液仪器、耗材 离心机透析袋低温冰箱电泳槽电泳仪
免疫球蛋白提取技术
免疫球蛋白提取技术可应用于：（1）推知机体的体液免疫功能；（2）诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。实验方法原理随着免疫学的发展和需要，免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多，有单一法，但大多数采用二步法以上相结合的方法，特别是以硫酸铵提纯为基础，再经过层析柱的方法来提高免
免疫球蛋白提取技术
免疫球蛋白提取技术 实验方法原理 随着免疫学的发展和需要，免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多，有单一法，但大多数采用二步法以上相
抗血清的纯化与保存
（1）采血：加强免疫的动物2—3次后，可通过耳静脉或眼球（小鼠）采血，进行抗血清效价测定。当效价达到理想的高度后，可以采血。采血方式可以从心脏直接取血，也可通过动脉放血。待血液凝固后用针筒或吸管吸取血清。 （2）抗血清的纯化与保存：除抗体外血清中含有多种其他蛋白成分。为了避免这些蛋白质干扰抗体
关于抗原抗体反应的抗血清的纯化与保存
（1）采血：加强免疫的动物2—3次后，可通过耳静脉或眼球（小鼠）采血，进行抗血清效价测定。当效价达到理想的高度后，可以采血。采血方式可以从心脏直接取血，也可通过动脉放血。待血液凝固后用针筒或吸管吸取血清。 （2）抗血清的纯化与保存：除抗体外血清中含有多种其他蛋白成分。为了避免这些蛋白质干扰抗体
免疫球蛋白提取技术：IgG的分离与提纯1
免疫球蛋白（Immunoglobulin Ig）的含量代表着机体体液免疫的水平，并进一步代表着B细胞的功能，因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。随着免疫学的发展和需要，免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多，有单一法，但大多数
微量柱法纯化DNA片段
实验概要目的DNA片段的回收技术是重组DNA中的关键技术，回收是指从电泳介质中纯化出目的片断。目前待回收的片断主要有酶切片断和各种PCR片断；回收的介质主要有琼脂糖和PAGE；回收的方法主要有树脂回收、微量柱回收、玻璃奶回收、液氮冻冻融回收及透析袋大量回收等，下面分别介绍树脂、微量柱及液氮冻冻融回收
纯水技术——水质纯化方法
离子交换法 离子交换法是以圆球形树脂(离子交换树脂)过滤原水，水中的离子会与固定在树脂上的离子交换。常见的两种离子交换方法分别是硬水软化和去离子法。硬水软化主要是用在反渗透(RO)处理之前，先将水质硬度降低的一种前处理程序。软化机里面的球状树脂，以两个钠离子交换一个钙离子或镁离子的方式来软化水
DNA提取纯化技术概述
质粒DNA的提取与纯化质粒是一类双链、闭环的DNA，大小范围从1 kb至200 kb以上不等。通常情况下，质粒可持续稳定地处于染色体外的游离状态，具有自主复制功能；但在一定条件下也会可逆地整合到宿主染色体上，随着染色体的复制而复制，并通过细胞分裂传递到后代。 质粒已成为核酸克隆和测序最常用的载体。质
核酸纯化仪技术原理
西安天隆科技有限公司的NP968产品是适于分离DNA/RNA、蛋白和细胞的全自动提取纯化系统，为解决客户现在和未来的提取纯化问题而设计。通过特制的磁棒吸附、转移和释放磁珠，从而实现磁珠/样品的转移，实现自动提取纯化操作。
什么叫分离纯化技术
将混合物质通过各种分离方式进行提取。当然分离后的浓缩也是一个纯化的步骤。纯化方式有很多种，溶剂萃取，树脂，膜分离等等。
从抗血清、腹水或杂交瘤上清液中纯化免疫球蛋白G组分1
饱和硫酸铵沉淀IgG实验方法原理虽然亲和层析法是进行特异性抗体纯化的首选，然而有时这种纯化方式却非必需，或者无法实施进行（如有时抗原量不充足）。实验材料抗血清、腹水或杂交瘤上清液试剂、试剂盒饱和硫酸铵溶液（SAS)仪器、耗材透析膜（MWCO 12 000〜14 000）、涡旋混合器实验步骤1)于 4
免疫球蛋白提取技术（一）
免疫球蛋白（Immunoglobulin Ig）的含量代表着机体体液免疫的水平，并进一步代表着B细胞的功能，因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。随着免疫学的发展和需要，免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多，有单一法，但大多数
核酸分离与纯化的原则、步骤、磁珠法纯化DNA原理
磁珠提核酸磁珠法纯化DNA主要是利用利息交换吸附材料吸附核酸，从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分离。本文主要概述了核酸分离与纯化的原则、核酸分离与纯化的步骤、磁珠法纯化DNA原理。核酸分离与纯化的原则核酸在细胞中总是与各种蛋白质结合在一起的。核酸的分离主要是指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分
吸附法纯化病毒实验_凝胶吸附法
实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒凝胶材料仪器、耗材烧杯实验步骤磷酸钙凝胶：这是病毒凝胶吸附法中较为常用的凝胶，由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4 溶液混合制备凝胶状沉淀物，用 0. 001mol/L 磷酸盐缓冲液悬浮，置千 4℃ 4~5小时使之充分沉淀后应用
免疫球蛋白的分离提纯
免疫球蛋白的分离提纯： Δ 目的 有利标记；减少非特异反应；有利Ig定量 Δ 分离提纯方法（原理）：一般选用2~3种，或同一方法反复进行2~3次 盐析法：在不同浓度的中性盐中蛋白质会脱水，降低带电电势，亲水性变为疏水性，分子间相互凝聚而沉淀（盐析作用）。不同蛋白质盐析所需中性盐的浓度不同
免疫球蛋白的分离提纯
免疫球蛋白的分离提纯： Δ 目的 有利标记；减少非特异反应；有利Ig定量 Δ 分离提纯方法（原理）：一般选用2~3种，或同一方法反复进行2~3次 盐析法：在不同浓度的中性盐中蛋白质会脱水，降低带电电势，亲水性变为疏水性，分子间相互凝聚而沉淀（盐析作用）。不同蛋白质盐析所需中性盐的浓度不同
连续提取免疫球蛋白法－（immunoglobulin）
（一）试剂及配制1．饱和硫酸铵液2．各种磷酸盐缓冲液⑴ 0.2mol/L原液⑶ 0.005Mol/L pH8.0 PB 液取0.10Mol/L pH8.0 PB液100ml，加H2O至2 000ml⑷0.025 Mol/L pH8.0 PB 液取0.10Mol/L pH8.0 PB液500ml，加水
病毒免疫荧光实验_荧光抗体的制备
实验材料荧光色素试剂、试剂盒抗体实验步骤荧光色素的选择 可以产生明亮荧光的染料物质，称荧光色素 (fluorochrome) 。目前常用的荧光色素有以下几种：(1) 异硫氰酸荧光素 (Fluorescein isothiocyanate, FITC): 在碱性条件下， FITC 的异硫氰酸基在水溶液
人用单克隆抗体质量控制技术指导原则2
3、特异性 测定单抗对靶抗原的特异性；对多株单抗识别的抗原决定簇进行相关性分析。 4、交叉反应 按附录要求。 免疫组织化学法测定单抗与人体组织交叉反应，用冰冻及石蜡包埋的各种正常脏器组织测定。来源于肿瘤相关抗原的单抗应进行与各种肿瘤组织的交叉反应试验。 5、效价测定 用适宜方法测定。（三）其他原材料