连续提取免疫球蛋白法（immunoglobulin）
（一）试剂及配制1．饱和硫酸铵液2．各种磷酸盐缓冲液⑴ 0.2mol/L原液⑶ 0.005Mol/L pH8.0 PB 液取0.10Mol/L pH8.0 PB液100ml，加H2O至2 000ml⑷0.025 Mol/L pH8.0 PB 液取0.10Mol/L pH8.0 PB液500ml，加水至2 000ml。⑸ 0.035 Mol/L pH8.0 PB液取0.10.1 Mol/L pH8.0 PB液700ml，加水至2 000ml。⑹ 0.10Mol/L pH5.8PB液A： 920mlB： 80mlH2O 加至 2 000ml⑺ 0.40Mol/L pH5.2pB液a液.0.40Mol/L NaH2PO4液NaH2PO4·2H2O 62.40gH2O 加至 1 000mlB液.0.40Mol/L Na2HPO4液Na2HPO4·12H2O 143.4gH2O 加至 1 000ml取a 液 960mlb 液 40ml混合......阅读全文
连续提取免疫球蛋白法－（immunoglobulin）
（一）试剂及配制1．饱和硫酸铵液2．各种磷酸盐缓冲液⑴ 0.2mol/L原液⑶ 0.005Mol/L pH8.0 PB 液取0.10Mol/L pH8.0 PB液100ml，加H2O至2 000ml⑷0.025 Mol/L pH8.0 PB 液取0.10Mol/L pH8.0 PB液500ml，加水
免疫球蛋白提取技术(Immunoglobulin－isolation－technique)
免疫球蛋白（Immunoglobulin Ig）的含量代表着机体体液免疫的水平，并进一步代表着B细胞的功能，因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。 随着免疫学的发展和需要，免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多，有单一法，但大多
免疫球蛋白提取技术(Immunoglobulin－isolation－technique)2
九、蛋白定量技术 （一）双缩脲测定法 1．原理 蛋白质中的肽键有双缩脲反应，在碱性溶液中与二价铜离子形成蓝紫色的络合物，在一定的范围内，颜色的深浅与蛋白质的含量成正比。此法特异性强，游离的氨基酸、小肽和核酸均不产生这种反应，但此法不够敏感，仅能测出毫克水平。 2．试剂配制 硫酸铜（CuSO4·
血清免疫球蛋白（Immunoglobulin，IgG）的分离制备—盐析法
（一）原理IgG是免疫球蛋白（Immunoglobulin，简称IgG）的主要成分之一，分子量约为15万~16万，沉降生活费数约为7s。IgG是动物和人体血浆的重要成分之一。血浆蛋白质的成分多达70余种，要从血浆中分离出IgG，首先要进行尽可能除去其他蛋白质成分的粗分离程序，使IgG在样品中比例大为
免疫球蛋白提取技术
实验材料 动物血清初乳胆汁试剂、试剂盒 硫酸铵NH4OHPBSNaH2PO4NaH2PO42H2OBaCl2HgIKIHClNaOHPBDEAE52葡聚糖凝胶G200无水硫酸钠硼酸盐缓冲液仪器、耗材 离心机透析袋低温冰箱电泳槽电泳仪
免疫球蛋白提取技术
免疫球蛋白提取技术可应用于：（1）推知机体的体液免疫功能；（2）诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。实验方法原理随着免疫学的发展和需要，免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多，有单一法，但大多数采用二步法以上相结合的方法，特别是以硫酸铵提纯为基础，再经过层析柱的方法来提高免
免疫球蛋白提取技术
免疫球蛋白提取技术 实验方法原理 随着免疫学的发展和需要，免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多，有单一法，但大多数采用二步法以上相
免疫球蛋白提取技术（一）
免疫球蛋白（Immunoglobulin Ig）的含量代表着机体体液免疫的水平，并进一步代表着B细胞的功能，因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。随着免疫学的发展和需要，免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多，有单一法，但大多数
免疫球蛋白提取技术（一）
免疫球蛋白（Immunoglobulin Ig）的含量代表着机体体液免疫的水平，并进一步代表着B细胞的功能，因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。随着免疫学的发展和需要，免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多，有单一法，但大多数
免疫球蛋白提取技术（二）
（12）IgG的纯度鉴定，可采用下列方法之一鉴定。①玻片琼脂或醋酸纤维膜电泳均可加样电泳后，只在γ—球蛋白的迁移部位出现一条带。操作时，同时可用全血清样品，不同浓度（NH4）2SO4盐析样品进行电泳，以资比较。②琼脂双相双扩散鉴定预先准备该IgG免疫异种动物所获的抗IgG血清。将IgG与抗IgG血清
免疫球蛋白提取技术（二）
4、禽血清IgG的分离与提纯（Na2SO4法）（1）试剂①5%葡聚糖硫酸盐②0.02Mol/L MnCl2溶液③无水硫酸钠④pH8.2硼酸盐缓冲液⑤0.06Mol/L pH7.4PB液（2）操作方法①取禽血清10ml加5%葡聚糖硫酸盐液，0.40ml和0.025Mol/L MnCl21.00ml充分
免疫球蛋白提取技术（三）
二、IgM的分离与提纯1、材料（1）血清（2）葡聚糖凝胶G200（3）洗脱液0.01Mol/L pH7.4PBS（0.14Mol/L NaCl或0.1Mol/L pH8.0 Tris－HCl 0.14Mol/L NaCl）2、操作方法选取2.50cm×90cm层析柱，用葡聚糖凝胶G200装柱，平衡后
关于乙型肝炎免疫球蛋白的简介
乙型肝炎免疫球蛋白（Hepatitis B Immunoglobulin,HBIG）是经乙型肝炎免疫健康人后采集的高效价血浆或血清经低温乙醇法分离提取，结合低PH孵化病毒灭活处理的免疫球蛋白制剂。液体制剂为接近无色，可带乳光或淡黄色澄明液体，含硫柳汞防腐剂。丙种球蛋白占总蛋白质90%以上，每瓶含
小型连续发酵实验——连续培养法
在分批培养中，一次加入所有的培养基，不予补充，不再更换。随着微生物的活跃生长，培养基中营养物质逐渐消耗，有害代谢产物不断积累，细菌的对数生长期不可长时间维持。如果在培养器中不断补充新鲜营养物质，并及时不断地以同样速度排出培养物(包括菌体及代谢产物)，理论上讲，对数生长期就可无限延长。实验方法原理在分
免疫球蛋白IgG的提取3
五、蛋白质的盐析法 向蛋白质溶液中加入不同浓度的中性盐，可以把不同的蛋白质分别沉淀出来。这种方法称为蛋白质的盐析。 利用蛋白质的盐析法，可以得到我们所需的不同的免疫球蛋白。最常用的中性盐包括，硅酸铵、硫酸镁、硫酸钠等，其中以硫酸铵最为常用： （一）、优点 1、在水中溶解度大，
免疫球蛋白IgG的提取1
一、目的及要求了解和掌握免疫球蛋白的提取方法。 二、概 念 抗体是在抗原物质刺激下，人或脊椎动物免疫系统的浆细胞产生的，能与抗原发生特异性反应的免疫球蛋白，主要存在于人和动物的血清及其体液中。 三、免疫血清的制备 （一）动物的选择 实验室常用的动物是家兔和羊，有时也用豚鼠或鸡，大
免疫球蛋白IgG的提取2
（五）免疫的具体方法1、直接法免疫血清的制备取体重2～3Kg的雄鸡1只，免疫前采血8～10mL，测其正常抗体。静脉注射新城疫弱毒新鲜尿囊液病毒2mL，同时腹腔注射8mL，2～4d后同法再免疫一次。第二次免疫后七天试血，血清凝集价在1︰320以上为合格即可全采血；如果不合格，可在第二次免疫后10d左右
免疫球蛋白提取分离纯化技术
实验概要免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表着机体体液免疫的水平，并进一步代表着B细胞的功能，因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。本实验对禽血清IgG和IgA进行了分离纯化。实验原理免疫球蛋白包括IgG、IgM、IgA、IgE和I
免疫球蛋白IgG的提取3
五、蛋白质的盐析法向蛋白质溶液中加入不同浓度的中性盐，可以把不同的蛋白质分别沉淀出来。这种方法称为蛋白质的盐析。利用蛋白质的盐析法，可以得到我们所需的不同的免疫球蛋白。最常用的中性盐包括，硅酸铵、硫酸镁、硫酸钠等，其中以硫酸铵最为常用：（一）、优点1、在水中溶解度大，其饱和溶液含有大量盐；2、在水中
总RNA的提取（Trizol法提取）
在收集到生物材料之后，最好能即刻进行RNA制备工作。若需暂时储存，则应以液氮将生物材料急速冷冻后，储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA时，将储存于冷冻柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破细胞，不可以先行解冻，以避免RNase的作用。1. 提取组织RNA时，每50～100mg组织用1ml
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取过程
磁珠法核酸提取过程：1、裂解取抗凝全血到1.5mLEP管中，加入BufferA、BufferB，混合均匀。然后把EP管置于恒温水箱中温育15～20min。2、结合 将EP管从温育设备中取出，离心后取上清，加入振荡混匀的磁珠结合液，颠倒混匀。将EP管置于磁力架上进行磁分离，弃废液（吸净管盖及管
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取原理
磁珠法核酸提取原理;依据与硅胶膜离心柱相同的原理，运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后，制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。利用氧化硅纳米微球的超顺磁性，在Chaotropic盐（盐酸胍、异硫氰酸胍等）和外加磁场的作用下，能从血液、
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取原理
磁珠法核酸提取原理;依据与硅胶膜离心柱相同的原理，运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后，制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。利用氧化硅纳米微球的超顺磁性，在Chaotropic盐（盐酸胍、异硫氰酸胍等）和外加磁场的作用下，能从血液、
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取过程
磁珠法核酸提取过程：1、裂解取抗凝全血到1.5mLEP管中，加入BufferA、BufferB，混合均匀。然后把EP管置于恒温水箱中温育15～20min。2、结合 将EP管从温育设备中取出，离心后取上清，加入振荡混匀的磁珠结合液，颠倒混匀。将EP管置于磁力架上进行磁分离，弃废液（吸净管盖及管
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取过程
磁珠法核酸提取过程：1、裂解取抗凝全血到1.5mLEP管中，加入BufferA、BufferB，混合均匀。然后把EP管置于恒温水箱中温育15～20min。2、结合 将EP管从温育设备中取出，离心后取上清，加入振荡混匀的磁珠结合液，颠倒混匀。将EP管置于磁力架上进行磁分离，弃废液（吸净管盖及管
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取过程
磁珠法核酸提取过程：1、裂解取抗凝全血到1.5mLEP管中，加入BufferA、BufferB，混合均匀。然后把EP管置于恒温水箱中温育15～20min。2、结合 将EP管从温育设备中取出，离心后取上清，加入振荡混匀的磁珠结合液，颠倒混匀。将EP管置于磁力架上进行磁分离，弃废液（吸净管盖及管
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取原理
磁珠法核酸提取原理;依据与硅胶膜离心柱相同的原理，运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后，制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。利用氧化硅纳米微球的超顺磁性，在Chaotropic盐（盐酸胍、异硫氰酸胍等）和外加磁场的作用下，能从血液、
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取过程
取10-20mg左右的组织，用液氮研磨为粉末，转入1.5mL 离心管内，加入100 μL 生理盐水，振荡15秒 （或直接在100 μL 生理盐水中将组织匀浆为细胞悬液），加入200 μL 裂解液， 20 μL biog复合消化液，充分混匀，56℃温育12分钟（如组织匀浆不充分，可适当延长消化时间至组
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取过程
取10-20mg左右的组织，用液氮研磨为粉末，转入1.5mL 离心管内，加入100 μL 生理盐水，振荡15秒 （或直接在100 μL 生理盐水中将组织匀浆为细胞悬液），加入200 μL 裂解液， 20 μL biog复合消化液，充分混匀，56℃温育12分钟（如组织匀浆不充分，可适当延长消化时间至组
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取原理
磁珠法核酸提取原理;依据与硅胶膜离心柱相同的原理，运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后，制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。利用氧化硅纳米微球的超顺磁性，在Chaotropic盐（盐酸胍、异硫氰酸胍等）和外加磁场的作用下，能从血液、