钙调蛋白的溴化氰裂解实验
试剂、试剂盒甲酸纯的钙调蛋白溴化氰乙腈实验步骤材料甲酸（市售最髙级（如AldrichChemicalCo.，Inc.)纯的钙调蛋白（干粉；无盐（0.1~1 mg)溴化氰（CNBr)(晶体）（如AldrichChemicalCo.，Inc.)乙腈（如Burdick&Jackson或J,T.Baker)操作程序本操作程序是根据Gross和Witkop(1962)的文献修改而成的。1)用水稀释甲酸至终浓度为70%(w/v)。对于>99％ 的甲酸，用 2.1 ml 甲酸和 0.9 ml 水。对于 88% 的甲酸, 用 2.lml 甲酸和 0.54 ml 水。2) 将钙调蛋白溶于 70% 甲酸溶液，终浓度1mg/ml, 置冰上。3) 称重 1.5-ml 具盖聚丙烯离心管。戴手套，于通风橱中，打开 CNBr 瓶，将一小粒晶体移至预称重的离心管中。盖好离心管和 CNBr 瓶。称重装有 CNBr 的离心管，减去离心管重，算出 CN......阅读全文
钙调蛋白的－DEAE－SEPHADEX－A50－阴离子交换层析实验
纯化钙调蛋白的下一步操作是用 DEAE 树脂进行阴离子交换层析。这步操作利用了以下事实，即钙调蛋内是一种强酸性蛋白因而在中性或微碱性 pH 条件下带有大量的净负电荷。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。试剂、试剂盒DEAE Sephadex* A-50(干粉）浓 NaOH透析存留物缓
钙调蛋白的－DEAE－SEPHADEX－A50－阴离子交换层析实验
试剂、试剂盒 DEAE Sephadex* A-50(干粉）浓 NaOH透析存留物缓冲液 B仪器、耗材 超速离心机玻璃层析柱蠕动泵、紫外（UV) 检测器、分部收集器和砌硅玻璃管实验步骤 材料和设备DEAE Sephadex* A-50(干粉）（Pharmacia Biotech,Inc.)浓 NaO
人钙调蛋白（CaM）酶联免疫分析
人钙调蛋白（CaM）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中钙调蛋白（CaM）的含量。实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人钙调蛋白（CaM）水平。用纯化的人钙调蛋白（CaM）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的
人钙调蛋白(Calponin)ELISA试剂盒
人钙调蛋白(Calponin)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 Calponin 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 Calponin与单抗结合，加入生物素化的抗人Calponin，形成免疫复合物连接在板上
大鼠钙调蛋白(Calmodulin)ELISA试剂盒说明
原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Calmodulin 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 Calmodulin与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠Calmodulin，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色
揭示钙调蛋白调节RyR2受体机制
心肌收缩是由钙离子流入细胞质触发的，最初是由Cav1.2介导的细胞外环境中的钙离子流入触发的，随后是由兰尼碱受体2（ryanodine receptor 2, RyR2）介导的肌浆网钙库中的钙离子流入触发的。兰尼碱受体是已知最大的离子通道，由分子量大于2兆道尔顿（MDa）的同源四聚体组成。80％
蛋白质与溴化氰活化的琼脂糖结合实验
实验材料蛋白质试剂、试剂盒琼脂糖 4BNaOH溴化氰NaHCO3氨基乙酸乙酸钠-乙酸磷酸二氢钾仪器、耗材天平烧瓶螺旋搅拌器布氏漏斗实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」1. 制备 CNBr-活化的琼脂糖 4B以下步骤必须在通风橱中小心进行。用 3 mol/L NaOH 将琼脂糖 4B 悬液调整为 p
蛋白质与溴化氰活化的琼脂糖结合实验
实验方法原理 实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 琼脂糖 4BNaOH溴化氰NaHCO3氨基乙酸乙酸钠-乙酸磷酸二氢钾仪器、耗材 天平烧瓶螺旋搅拌器布氏漏斗实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」1. 制备 CNBr-活化的琼脂糖 4B以下步骤必须在通风橱中小心进行。用 3 mol/L NaOH 将琼
蛋白质与溴化氰活化的琼脂糖结合实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 蛋白质
依赖Ca2+/钙调蛋白的蛋白激酶的基本信息
中文名称依赖Ca2+/钙调蛋白的蛋白激酶英文名称Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase定 义催化蛋白质磷酸化的一类蛋白激酶，该酶依赖Ca2+/钙调蛋白，介导细胞内Ca2+的升高。包括钙调蛋白激酶Ⅰ、钙调蛋白激酶Ⅱ、钙调蛋白激酶Ⅲ和钙调蛋白激酶Ⅳ。应用学科生
依赖Ca2+/钙调蛋白的蛋白激酶的基本信息
中文名称依赖Ca2+/钙调蛋白的蛋白激酶英文名称Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase定 义催化蛋白质磷酸化的一类蛋白激酶，该酶依赖Ca2+/钙调蛋白，介导细胞内Ca2+的升高。包括钙调蛋白激酶Ⅰ、钙调蛋白激酶Ⅱ、钙调蛋白激酶Ⅲ和钙调蛋白激酶Ⅳ。应用学科生
钙调蛋白的－DEAE－SEPHADEX－A50－阴离子交换
钙调蛋白的 DEAE SEPHADEX A-50 阴离子交换层析实验 试剂、试剂盒 DEAE Sephadex* A-50(干粉
钙调结合蛋白elisa试剂盒使用方法
钙调结合蛋白elisa试剂盒使用方法：1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准
钙调蛋白调控细胞增殖及细胞周期的功能简介
真核生物的细胞增殖远比原核生物复杂的多。在细胞增殖和细胞周期的过程中，钙调蛋白具有重要的调节作用。钙调蛋白在细胞中的分布会随着细胞周期的进行而迁移。在 G1 期，钙调蛋白主要分布在细胞质中，可与含肌动蛋白的微丝束组装结合；当细胞分裂进入 S 期时，发现钙调蛋白开始向细胞核中迁移；当分裂到 G2
人钙调蛋白(Calponin)ELISA试剂盒使用说明
原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 Calponin 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 Calponin与单抗结合，加入生物素化的抗人Calponin，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，最后加终止液硫
钙调蛋白多特异性识别的分子机制研究获进展
中国科学院长春应用化学研究所电分析化学国家重点实验室汪劲研究员和吉林大学物理学院博士研究生刘飞，通过分子动力学模拟的方法，提出了钙调蛋白与其靶标在生物分子识别过程中混合的能量地貌景观和机制，并揭示了这种混合机制和钙调蛋白与多种靶标多特异性结合的重要联系。该成果在美国科学院院报Proceeding
方案6－用溴化氰切割－MetX－键实验
实验材料冻干的蛋白质试剂、试剂盒溴化氢甲酸β-巯基乙醇NH4HCO3次氯酸钠溶液仪器、耗材通风厨浓缩器小离心管氮气实验步骤一、还原1.将蛋白质溶解在 0.2mol/L 碳酸氢铵中，终浓度为 10~20mg/mL。2.加人β-巯基乙醇，其浓度在 1%~5% 之间（体积分数）。3.在溶液上方吹扫氮气以置
新一代SPR－技术在钙调蛋白与NOS研究中的应用（二）
蛋白结合分析：将NOS固定OpenSPR的纳米金芯片表面，并对CaM做浓度梯度检测，结果导入TraceDrawer分析。（图4 ）OpenSPR实时检测，梯度稀释后不同浓度检测出野生型CaM对nNOS（红线）和eNOS 肽（紫红线）的结合情况，观察结合、解离及再生的整个过程，结果显示实验曲线稳定及信
新一代SPR－技术在钙调蛋白与NOS研究中的应用（一）
EF手性对突变钙调蛋白与一氧化氮合酶结合域肽段相互作用研究一氧化氮合酶(NOS)是一种非常重要的生物小分子NO合成催化酶，一氧化氮合（NOS）包括三个同型酶：神经酶（nNOS）, 和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）以及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）。每种酶产生的NO分别用于神经传递、血管舒张和免疫应答
蛋白的裂解与提取方法
10ml 三去污裂解液配方如下：50 mmol/L Tris-cl (pH 8.0)： 0.07882g 150 mmol/L NaCl： 0.08775g0.2 g/L叠氮钠： 0.002g 1 g/LSDS 0.01g100 mg/L Aprotin 0.001g10 g/L NP-40 0.1
蛋白的裂解与提取步骤
这是偶整理的蛋白裂解和提取的protocol，希望对大家有所帮助。10ml 三去污裂解液配方如下：50 mmol/L Tris-cl (pH 8.0)： 0.07882g 150 mmol/L NaCl： 0.08775g0.2 g/L叠氮钠： 0.002g 1 g/LSDS 0.01g100 mg
什么是蛋白裂解液
RIPA裂解液。RIPA裂解液（英语：Radioimmunoprecipitation assay buffer，全称放射免疫沉淀法缓冲液）是一种用于裂解细胞或组织的裂解缓冲液，常用于放射性免疫沉淀分析（RIPA）。此缓冲液的变性性能比NP-40裂解液或曲拉通X-100裂解缓冲液更强，因为它包含离子
DNA裂解分析实验
琼脂糖凝胶电泳 个体核的PI荧光 乙醇固定后PI染色 JAM分析 实验材料 细胞
DNA裂解分析实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 溶解缓冲液RNA 酶A T1 混合液蛋白酶 KDNA 加样缓冲液仪器、耗材 Eppendorf 管移液管琼脂糖凝胶实验步骤 1. 将 5X105 细胞移入无菌的 1.5 ml Eppendorf 管中，4℃ 2000 r/min 离心 5 分钟，弃上清。2. 加入 20
DNA裂解分析实验
琼脂糖凝胶电泳 个体核的PI荧光 乙醇固定后PI染色 JAM分析 实验材料 细胞
亲和层析(affinity－chromatography)实验方法：溴化氰活化
亲和层析的实验操作和一般柱层析类似，都包括：装柱、上样、洗脱、样品收集、结果处理等步骤。溴化氰活化琼脂糖用于配体固相化是实验室亲和层析最常用的技术之一，该方法简便廉价，并广泛应用于蛋白质、核酸、凝集素等。下面以此为例介绍亲和层析的实验方法：试剂与配制1.Sepharose 4B2.CNBr（剧毒）3
整理的蛋白裂解和提取的protocol
10ml 三去污裂解液配方如下：50 mmol/L Tris-cl (pH 8.0)： 0.07882g 150 mmol/L NaCl： 0.08775g 0.2 g/L叠氮钠： 0.002g 1 g/LSDS 0.01g 100 mg/L Aprotin 0.001g
标记裂解培养细胞实验
基本方案 温和去垢剂裂解法（对贴壁细胞）基本方案 温和去垢剂裂解法（对非贴壁细胞）SDS煮沸法裂解细胞实验方法原理实验材料待标记的培养细胞 试剂、试剂盒37℃标记培养液
军团菌毒素SidJ劫持人钙调蛋白并促进细菌茁壮成长机制
在一项新的研究中，德国哥德大学的Sagar Bhogaraju和Ivan Dikic及其团队发现军团菌（Legionella）中的毒素SidJ对人体蛋白进行了独特的修饰，并帮助军团菌在人体细胞内生长。SidJ利用自身的优势劫持了人体中一种称为钙调蛋白（Calmodulin）的蛋白，这是致病菌利用
钙结合蛋白的简介
钙结合蛋白（calcium-binding protein），多种具有结合钙离子能力的特殊蛋白质的总称，为一些特异性、具高亲和力或高亲和量、能可逆地与钙相结合的蛋白质。如肠道吸收钙与钙结合的蛋白质、肾脏吸收钙与钙结合的蛋白质，肌肉结合钙的蛋白质、调节代谢的钙调蛋白，甚至淀粉酶、嗜热菌蛋白质等。