钙调蛋白的DEAESEPHADEXA50阴离子交换层析实验
纯化钙调蛋白的下一步操作是用 DEAE 树脂进行阴离子交换层析。这步操作利用了以下事实，即钙调蛋内是一种强酸性蛋白因而在中性或微碱性 pH 条件下带有大量的净负电荷。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。试剂、试剂盒DEAE Sephadex* A-50(干粉）浓 NaOH透析存留物缓冲液 B仪器、耗材超速离心机玻璃层析柱蠕动泵、紫外（UV) 检测器、分部收集器和砌硅玻璃管实验步骤材料和设备DEAE Sephadex* A-50(干粉）（Pharmacia Biotech,Inc.)浓 NaOH(10mol/L)透析存留物，得自实验 3超速离心机玻璃层析柱（直径 5 cm)层析装置：蠕动泵、紫外（UV) 检测器、分部收集器和砌硅玻璃管（16X150 mm)试剂缓冲液 B(10x（临用前配制 4000 mlx 缓冲液 B，加 2-疏基乙醇至 1 mmol/L)(配方，见“试剂的配制”，PP.82—83)操作程序1) ......阅读全文
钙调蛋白的－DEAE－SEPHADEX－A50－阴离子交换
钙调蛋白的 DEAE SEPHADEX A-50 阴离子交换层析实验 试剂、试剂盒 DEAE Sephadex* A-50(干粉
钙调蛋白的－DEAE－SEPHADEX－A50－阴离子交换层析实验
试剂、试剂盒 DEAE Sephadex* A-50(干粉）浓 NaOH透析存留物缓冲液 B仪器、耗材 超速离心机玻璃层析柱蠕动泵、紫外（UV) 检测器、分部收集器和砌硅玻璃管实验步骤 材料和设备DEAE Sephadex* A-50(干粉）（Pharmacia Biotech,Inc.)浓 NaO
钙调蛋白的－DEAE－SEPHADEX－A50－阴离子交换层析实验
纯化钙调蛋白的下一步操作是用 DEAE 树脂进行阴离子交换层析。这步操作利用了以下事实，即钙调蛋内是一种强酸性蛋白因而在中性或微碱性 pH 条件下带有大量的净负电荷。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。试剂、试剂盒DEAE Sephadex* A-50(干粉）浓 NaOH透析存留物缓
DEAESephadex－A50柱层析纯化免疫球蛋白
(一) 原理DEAE-SephadexA-50(二乙基氨基乙基-葡聚糖A-50)为弱碱性阴离子交换剂。用NaOH将CL-型转变为OH-型后，可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白(等电点为PH6.85～7.5)，其余均属酸性蛋白。在PH7.2～7.4的环境中，酸性蛋白均被DEAE-Sephad
抗体纯化：deaesephadex－a50－柱层析法
一、原理 deae-sephadex a-50（二乙氨基—乙基-葡萄糖凝胶a-50）为弱碱性阳离子交换剂。用NaOH将Cl-型转变为OH-型后，可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白（等电点为pH6.85～7.5），其余均属酸性蛋白。pH7.2～7.4的环境中，酸性蛋白均被deae-
抗体纯化：deaesephadex－a50－柱层析法
一、原理deae-sephadex a-50（二乙氨基—乙基-葡萄糖凝胶a-50）为弱碱性阳离子交换剂。用NaOH将Cl-型转变为OH-型后，可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白（等电点为pH6.85～7.5），其余均属酸性蛋白。pH7.2～7
DEAESephadex－A50提取法纯化多克隆抗体
DEAE-Sephadex A-50（简称A-50）为弱碱性阴离子交换剂，经过NaOH处理将Cl-型转为OH-型后，可吸附酸性蛋白。γ1球蛋白属中性蛋白，等电点为pH6.85～7.5，其余均属酸性蛋白。在溶液为pH8.0时，酸性蛋白均被A-50 吸附。从而可分离纯化IgG。 1. 批
免疫球蛋白纯化技术—DEAESephadexA50柱层析纯化免疫球蛋白
实验方法原理DEAE-SephadexA-50（二乙基氨基乙基-葡聚糖A-50）为弱碱性阴离子交换剂。用NaOH将CL-型转变为OH-型后，可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白（等电点为PH6.85～7.5），其余均属酸性蛋白。在PH7.2～7.4的环境中，酸性蛋白均被DEAE-Sephad
层析技术(Layeranalise－technique)(2)
离子交换纤维素的优点为：①离子交换纤维素为开放性长链，具有较大的表面积，吸附容量最大；②离子基团少，排列稀疏，与蛋白质结合不太牢固，易于洗脱；③具有良好的稳定性，洗脱剂的选择范围广。 2．离子交换交联葡聚糖 离子交换交联葡聚糖也是广泛使用的离子交换剂，它与离子交换纤维素不同点是载体不同，常用交联葡聚
钙调蛋白的定义
钙调蛋白（calmodulin, CaM）又称钙调素，是一种普遍存在于各种真核细胞内，并能与钙离子结合的多功能蛋白质。 钙调蛋白参与细胞内多种信号转导途径，并在Ca2+依赖性信号转导途径中起到关键作用，是动态Ca2+传感器，能够响应广泛的Ca2+浓度，并向下游传递信号。 钙调蛋白分子是由
钙调蛋白基本介绍
Ebashi 等在 1965 年报道了细胞中存在介导钙信号的钙结合蛋白，随后 Cheung 将这一类能结合钙离子的磷酸二酯酶（PDE）激活蛋白命名为“钙调蛋白”（calmodulin，简称 CaM）。 [4] 钙调蛋白是一种广泛存在于真核细胞中，进化上高度保守的一类钙离子受体蛋白。钙调蛋白是由
钙调蛋白的功能特点
钙调蛋白是细胞第二信使系统的重要成分，在Ca信号系统传导中起着关键的作用，调控生理代谢及基因表达，控制细胞正常的生长和发育。钙调蛋白作为第二信使在植物信号转导中的作用一直是植物生理、细胞生物学和发育生物学研究的热点。Ca/CaM是有机体进化过程中最保守的信号转导级联反应系统，这一信号途径广泛存在于真
层析法常用数据表及性质(4)
（五）离子交换层析介质的技术数据 离子交换介质名称 最高载量 颗粒
钙调蛋白的溴化氰裂解实验
试剂、试剂盒甲酸纯的钙调蛋白溴化氰乙腈实验步骤材料甲酸（市售最髙级（如AldrichChemicalCo.，Inc.)纯的钙调蛋白（干粉；无盐（0.1~1 mg)溴化氰（CNBr)(晶体）（如AldrichChemicalCo.，Inc.)乙腈（如Burdick&Jackson或J,T.Baker)
钙调蛋白的溴化氰裂解实验
试剂、试剂盒 甲酸纯的钙调蛋白 溴化氰乙腈实验步骤 材料甲酸（市售最髙级（如AldrichChemicalCo.，Inc.)纯的钙调蛋白（干粉；无盐（0.1~1 mg)溴化氰（CNBr)(晶体）（如AldrichChemicalCo.，Inc.)乙腈（如Burdick&Jackson或J,T.Bak
关于钙调蛋白的结构介绍
钙调蛋白的外形似哑铃，有两个球形的末端，中间被一个长而富有弹性的螺旋结构相连，长度为 6.5nm，每个末端有两个Ca2+结构域，每个结构域可以结合一个Ca2+，这样一个钙调蛋白可以结合4个Ca2+ ，每个位点都是由12个氨基酸残基组成的套环，门冬氨酸和谷氨酸的侧链提供 Ca2+结合基团。其中C端
钙调蛋白的溴化氰裂解实验
钙调蛋白的溴化氰裂解实验 试剂、试剂盒 甲酸 纯的钙调蛋白 溴化氰
钙调蛋白调节微管解聚简介
微管的组装需要微管结合蛋白和 Tau因子的共同作用，由于依赖于钙调蛋白激酶的底物而彻底被磷酸化，导致微管解聚。当体系中存在一定的 Ca2+的时候，钙调蛋白就会与微管 Tau 因子竞争结合，微管的聚合就会被抑制，细胞的生理活动恢复正常。利用显微注射法注入钙调蛋白，可以有效的延长有丝分裂中期持续的时
钙调蛋白样品的测活实验
钙调蛋白样品的测活实验 试剂、试剂盒 MLCK 的底物肽 ATP 钙调蛋白储液
钙调蛋白的苯基Sepharose－层析实验
钙调蛋白的苯基-Sepharose 层析实验 试剂、试剂盒 含钙调蛋白的组分 CaCl2(固体)
钙调蛋白样品的测活实验
试剂、试剂盒MLCK 的底物肽ATP钙调蛋白储液MLCK 酶磷酸丙酮（任选）MLCK 测活缓冲液仪器、耗材聚丙烯微量离心管Whatman*P81 磷酸纤维素纸（切成条)玻璃烧杯加样器闪烁瓶闪烁计数器吹干机（任选)实验步骤材料与设备聚丙烯微量离心管 (1.5-ml)MLCK 的底物肽（10mmol/L
钙调蛋白的苯基Sepharose－层析实验
试剂、试剂盒 含钙调蛋白的组分CaCl2(固体)碳酸氢铵缓冲液 E缓冲液 F仪器、耗材 透析袋苯基-Sepharose*4B 填料玻璃层析柱 蠕动泵紫外线检测器、分部收集器和硼硅玻璃试管冻干机 冷冻干燥器实验步骤 材料与设备含钙调蛋白的组分，从 DEAE 柱收集后合并所得（见实验 4)透析袋（标称截
钙调蛋白样品的测活实验
试剂、试剂盒 MLCK 的底物肽ATP钙调蛋白储液 MLCK 酶磷酸丙酮（任选）MLCK 测活缓冲液仪器、耗材 聚丙烯微量离心管 Whatman*P81 磷酸纤维素纸（切成条)玻璃烧杯加样器闪烁瓶闪烁计数器吹干机（任选)实验步骤 材料与设备聚丙烯微量离心管 (1.5-ml)MLCK 的底物肽（10m
钙调蛋白的苯基Sepharose－层析实验
试剂、试剂盒含钙调蛋白的组分CaCl2(固体)碳酸氢铵缓冲液 E缓冲液 F仪器、耗材透析袋苯基-Sepharose*4B 填料玻璃层析柱蠕动泵紫外线检测器、分部收集器和硼硅玻璃试管冻干机 冷冻干燥器实验步骤材料与设备含钙调蛋白的组分，从 DEAE 柱收集后合并所得（见实验 4)透析袋（标称截留分子量
关于钙调蛋白的作用机理介绍
钙调蛋白分子本身无酶的活性，在无Ca2+的情况下，也无生物学活性；但在胞内Ca2+结合后，钙调蛋白发生构型上的变化，暴露疏水区，疏水区与依赖于 钙调蛋白的靶酶相互作用而调节酶的活性。 [4] 作为一个多功能的Ca2+传感器，钙调蛋白能够应对不同Ca2+浓度。结合Ca2+后，钙调蛋白会发生构象转变
钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验
试剂、试剂盒 消化缓冲液经 TPCK 处理的胰蛋白酶HCl纯的钙调蛋白实验步骤 材料经 TPCK 处理的胰蛋白酶（其干粉可从 WorthingtonBiochemicalCorp. 买到)HCl(1 mmol/L)纯的钙调蛋白（干粉；无盐（0.1~1 mg)试剂消化缓冲液(配方，见"试剂的配制
钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验
试剂、试剂盒消化缓冲液经 TPCK 处理的胰蛋白酶HCl纯的钙调蛋白实验步骤材料经 TPCK 处理的胰蛋白酶（其干粉可从 WorthingtonBiochemicalCorp. 买到)HCl(1 mmol/L)纯的钙调蛋白（干粉；无盐（0.1~1 mg)试剂消化缓冲液(配方，见"试剂的配制'
钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验
钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验 试剂、试剂盒 消化缓冲液 经 TPCK 处理的胰蛋白酶
大鼠钙调蛋白(Calmodulin)ELISA检测法
大鼠钙调蛋白(Calmodulin)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Calmodulin 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 Calmodulin与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠Calmodulin，形成免
从鸡胗提取钙调蛋白实验
试剂、试剂盒 鸡胗2-巯基乙醇缓冲液 H(10X)仪器、耗材 聚丙烯烧杯匀浆器聚碳酸酯离心管超速离心机带刻度的聚丙烯量筒粗棉布聚丙烯漏斗实验步骤 材料与设备鸡胗（25 个；保存于-20°C)(如，Pel-Freez,Inc.)2-巯基乙醇（2-ME; 分子量 78.13Da; 密度 1.114)聚丙