钙调蛋白的DEAESEPHADEXA50阴离子交换层析实验
试剂、试剂盒 DEAE Sephadex* A-50(干粉)浓 NaOH透析存留物缓冲液 B仪器、耗材 超速离心机玻璃层析柱蠕动泵、紫外(UV) 检测器、分部收集器和砌硅玻璃管实验步骤 材料和设备DEAE Sephadex* A-50(干粉)(Pharmacia Biotech,Inc.)浓 NaOH(10mol/L)透析存留物,得自实验 3超速离心机玻璃层析柱(直径 5 cm)层析装置:蠕动泵、紫外(UV) 检测器、分部收集器和砌硅玻璃管(16X150 mm)试剂缓冲液 B(10x(临用前配制 4000 mlx 缓冲液 B,加 2-疏基乙醇至 1 mmol/L)(配方,见“试剂的配制”,PP.82—83)操作程序1) 用 1x 缓冲液 B 溶胀 DEAE Sephadex A-50 树脂,4°C 过夜或沸水浴 1 小时 (h)。pH8.0 下,树脂溶胀至约 30 ml/g(见文献 Ion Exchange Chroma......阅读全文
钙调蛋白的-DEAE-SEPHADEX-A50-阴离子交换层析实验
试剂、试剂盒 DEAE Sephadex* A-50(干粉)浓 NaOH透析存留物缓冲液 B仪器、耗材 超速离心机玻璃层析柱蠕动泵、紫外(UV) 检测器、分部收集器和砌硅玻璃管实验步骤 材料和设备DEAE Sephadex* A-50(干粉)(Pharmacia Biotech,Inc.)浓 NaO
钙调蛋白的-DEAE-SEPHADEX-A50-阴离子交换层析实验
纯化钙调蛋白的下一步操作是用 DEAE 树脂进行阴离子交换层析。这步操作利用了以下事实,即钙调蛋内是一种强酸性蛋白因而在中性或微碱性 pH 条件下带有大量的净负电荷。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒DEAE Sephadex* A-50(干粉)浓 NaOH透析存留物缓
钙调蛋白的-DEAE-SEPHADEX-A50-阴离子交换
钙调蛋白的 DEAE SEPHADEX A-50 阴离子交换层析实验 试剂、试剂盒 DEAE Sephadex* A-50(干粉
DEAESephadex-A50柱层析纯化免疫球蛋白
(一) 原理DEAE-SephadexA-50(二乙基氨基乙基-葡聚糖A-50)为弱碱性阴离子交换剂。用NaOH将CL-型转变为OH-型后,可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白(等电点为PH6.85~7.5),其余均属酸性蛋白。在PH7.2~7.4的环境中,酸性蛋白均被DEAE-Sephad
抗体纯化:deaesephadex-a50-柱层析法
一、原理 deae-sephadex a-50(二乙氨基—乙基-葡萄糖凝胶a-50)为弱碱性阳离子交换剂。用NaOH将Cl-型转变为OH-型后,可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白(等电点为pH6.85~7.5),其余均属酸性蛋白。pH7.2~7.4的环境中,酸性蛋白均被deae-
抗体纯化:deaesephadex-a50-柱层析法
一、原理deae-sephadex a-50(二乙氨基—乙基-葡萄糖凝胶a-50)为弱碱性阳离子交换剂。用NaOH将Cl-型转变为OH-型后,可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白(等电点为pH6.85~7.5),其余均属酸性蛋白。pH7.2~7
DEAESephadex-A50提取法纯化多克隆抗体
DEAE-Sephadex A-50(简称A-50)为弱碱性阴离子交换剂,经过NaOH处理将Cl-型转为OH-型后,可吸附酸性蛋白。γ1球蛋白属中性蛋白,等电点为pH6.85~7.5,其余均属酸性蛋白。在溶液为pH8.0时,酸性蛋白均被A-50 吸附。从而可分离纯化IgG。 1. 批
层析技术(Layeranalise-technique)(2)
离子交换纤维素的优点为:①离子交换纤维素为开放性长链,具有较大的表面积,吸附容量最大;②离子基团少,排列稀疏,与蛋白质结合不太牢固,易于洗脱;③具有良好的稳定性,洗脱剂的选择范围广。 2.离子交换交联葡聚糖 离子交换交联葡聚糖也是广泛使用的离子交换剂,它与离子交换纤维素不同点是载体不同,常用交联葡聚
免疫球蛋白纯化技术—DEAESephadexA50柱层析纯化免疫球蛋白
实验方法原理DEAE-SephadexA-50(二乙基氨基乙基-葡聚糖A-50)为弱碱性阴离子交换剂。用NaOH将CL-型转变为OH-型后,可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白(等电点为PH6.85~7.5),其余均属酸性蛋白。在PH7.2~7.4的环境中,酸性蛋白均被DEAE-Sephad
钙调蛋白的苯基Sepharose-层析实验
钙调蛋白的苯基-Sepharose 层析实验 试剂、试剂盒 含钙调蛋白的组分 CaCl2(固体)
钙调蛋白的苯基Sepharose-层析实验
试剂、试剂盒 含钙调蛋白的组分CaCl2(固体)碳酸氢铵缓冲液 E缓冲液 F仪器、耗材 透析袋苯基-Sepharose*4B 填料玻璃层析柱 蠕动泵紫外线检测器、分部收集器和硼硅玻璃试管冻干机 冷冻干燥器实验步骤 材料与设备含钙调蛋白的组分,从 DEAE 柱收集后合并所得(见实验 4)透析袋(标称截
钙调蛋白的苯基Sepharose-层析实验
试剂、试剂盒含钙调蛋白的组分CaCl2(固体)碳酸氢铵缓冲液 E缓冲液 F仪器、耗材透析袋苯基-Sepharose*4B 填料玻璃层析柱蠕动泵紫外线检测器、分部收集器和硼硅玻璃试管冻干机 冷冻干燥器实验步骤材料与设备含钙调蛋白的组分,从 DEAE 柱收集后合并所得(见实验 4)透析袋(标称截留分子量
DEAE纤维素柱层析纯化酶蛋白实验——离子交换层析法
本实验目的是以柱层析的方法进一步纯化蔗糖酶蛋白,利用DEAE 纤维素树脂作为离子交换剂进行柱层析分级分离。实验方法原理利用DEAE纤维素树脂作为离子交换剂进行柱层析分级分离。实验材料酶蛋白试剂、试剂盒DEAE纤维素NaOHHCLTris-HCl缓冲液NaCl仪器、耗材层析柱收集器磁力搅拌器搅拌子烧杯
层析技术(Layeranalise-technique)
离子交换层析技术是以离子交换纤维素或以离子交换葡聚糖凝胶为固定相,以蛋白质等样品为移动相,分离和提纯蛋白质、核酸、酶、激素和多糖等的一项技术。(一)原理在纤维素与葡聚糖分子上结合有一定的离子基团,当结合阳离子基团时,可换出阴离子,则称为阴离子交换剂。如二乙氨乙基(Dicthylaminoethyl,
层析法常用数据表及性质(4)
(五)离子交换层析介质的技术数据 离子交换介质名称 最高载量 颗粒
阴离子交换层析介绍
中文名称阴离子交换层析英文名称anion exchange chromatography定 义一种含阴离子交换剂的层析系统,根据样品混合物中各成分所含负电荷数量的不同,从而对阴离子交换剂结合的强度不同而得以分离。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
离子交换高效液相层析实验_阴离子交换HPLC
实验材料蛋白质试剂、试剂盒Tris·ClNaCl磷酸钠缓冲液仪器、耗材交换柱实验步骤1. 在使用IEX柱前,依次以序列溶液洗柱去除柱上吸附的蛋白质:10倍柱床的已脱气水和10倍柱床的高盐缓冲液,对聚合体IEX柱,洗柱液在8 ~10,对硅胶类柱,洗柱液pH在7~8。2. 在室温平衡IEX柱,对4
钙调蛋白的溴化氰裂解实验
试剂、试剂盒甲酸纯的钙调蛋白溴化氰乙腈实验步骤材料甲酸(市售最髙级(如AldrichChemicalCo.,Inc.)纯的钙调蛋白(干粉;无盐(0.1~1 mg)溴化氰(CNBr)(晶体)(如AldrichChemicalCo.,Inc.)乙腈(如Burdick&Jackson或J,T.Baker)
钙调蛋白的溴化氰裂解实验
试剂、试剂盒 甲酸纯的钙调蛋白 溴化氰乙腈实验步骤 材料甲酸(市售最髙级(如AldrichChemicalCo.,Inc.)纯的钙调蛋白(干粉;无盐(0.1~1 mg)溴化氰(CNBr)(晶体)(如AldrichChemicalCo.,Inc.)乙腈(如Burdick&Jackson或J,T.Bak
钙调蛋白的溴化氰裂解实验
钙调蛋白的溴化氰裂解实验 试剂、试剂盒 甲酸 纯的钙调蛋白 溴化氰
PPO粗酶液的纯化
一、原理1.葡聚糖凝胶Sephadex G-200凝胶柱层析 利用大分子不能进入凝胶颗粒内部 最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。(G-200能分离800-80000D分子量的蛋白质)2.利用离子交换法,选取DEAE-阴离子纤维素
DEAE纤维素柱层析纯化酶蛋白实验
离子交换层析法 实验方法原理 利用DEAE纤维素树脂作为离子交换剂进行柱层析分级分离。 实验材料
DEAE纤维素柱层析纯化酶蛋白实验
实验方法原理 利用DEAE纤维素树脂作为离子交换剂进行柱层析分级分离。实验材料 酶蛋白试剂、试剂盒 DEAE纤维素NaOHHCLTris-HCl缓冲液NaCl仪器、耗材 层析柱收集器磁力搅拌器搅拌子烧杯玻璃砂漏斗水泵抽滤瓶pH试纸pH计三通管止水夹吸耳球紫外比色杯尿糖试纸点滴板电导率仪实验步骤 1.
钙调蛋白样品的测活实验
钙调蛋白样品的测活实验 试剂、试剂盒 MLCK 的底物肽 ATP 钙调蛋白储液
钙调蛋白样品的测活实验
试剂、试剂盒MLCK 的底物肽ATP钙调蛋白储液MLCK 酶磷酸丙酮(任选)MLCK 测活缓冲液仪器、耗材聚丙烯微量离心管Whatman*P81 磷酸纤维素纸(切成条)玻璃烧杯加样器闪烁瓶闪烁计数器吹干机(任选)实验步骤材料与设备聚丙烯微量离心管 (1.5-ml)MLCK 的底物肽(10mmol/L
钙调蛋白样品的测活实验
试剂、试剂盒 MLCK 的底物肽ATP钙调蛋白储液 MLCK 酶磷酸丙酮(任选)MLCK 测活缓冲液仪器、耗材 聚丙烯微量离心管 Whatman*P81 磷酸纤维素纸(切成条)玻璃烧杯加样器闪烁瓶闪烁计数器吹干机(任选)实验步骤 材料与设备聚丙烯微量离心管 (1.5-ml)MLCK 的底物肽(10m
钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验
试剂、试剂盒 消化缓冲液经 TPCK 处理的胰蛋白酶HCl纯的钙调蛋白实验步骤 材料经 TPCK 处理的胰蛋白酶(其干粉可从 WorthingtonBiochemicalCorp. 买到)HCl(1 mmol/L)纯的钙调蛋白(干粉;无盐(0.1~1 mg)试剂消化缓冲液(配方,见"试剂的配制
钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验
试剂、试剂盒消化缓冲液经 TPCK 处理的胰蛋白酶HCl纯的钙调蛋白实验步骤材料经 TPCK 处理的胰蛋白酶(其干粉可从 WorthingtonBiochemicalCorp. 买到)HCl(1 mmol/L)纯的钙调蛋白(干粉;无盐(0.1~1 mg)试剂消化缓冲液(配方,见"试剂的配制'
钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验
钙调蛋白的胰蛋白酶消化实验 试剂、试剂盒 消化缓冲液 经 TPCK 处理的胰蛋白酶
阴离子交换层析的概念和原理
中文名称阴离子交换层析英文名称anion exchange chromatography定 义一种含阴离子交换剂的层析系统,根据样品混合物中各成分所含负电荷数量的不同,从而对阴离子交换剂结合的强度不同而得以分离。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)