三氯乙酸沉淀实验

三氯乙酸沉淀实验主要用于(1)蛋白质的沉淀纯化;(2)试样化合物的提取。实验方法原理1. 三氯乙酸为酸性化合物,是阴离子型沉淀剂,在低于蛋白质等电点的PH值时,酸根与带正点荷的蛋白质形成不溶性盐而沉淀;2. 作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团, 使之聚集沉淀。3. 随着蛋白质分子量的增大,其结构复杂性与致密性越大,TCA 可能渗入分子内部而使之较难被完全除去,在电泳前样品加热处理时可能使蛋白质结构发生酸水解而形成碎片,而且随时间的延长这一作用愈加明显。实验材料蛋白样品试剂、试剂盒丙酮分子量标准TCA+DOC加与不加2-巯基乙醇的样品缓冲液仪器、耗材聚丙烯微量离心管实验步骤材料与设备丙酮(Aldrich Chemical Co.Inc.)注:保存于室温。不能放入冰箱。聚丙烯微量离心管 (1.5-ml)注:1. 用前将离心管洗干净。2. 分析极少量蛋白质(<100ng)时,也许必需按下述方法将离心管硅......阅读全文

三氯乙酸沉淀实验

            实验方法原理 1. 三氯乙酸为酸性化合物,是阴离子型沉淀剂,在低于蛋白质等电点的PH值时,酸根与带正点荷的蛋白质形成不溶性盐而沉淀;2. 作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团, 使之聚集沉淀。3. 随着蛋白质分子量的增

三氯乙酸沉淀实验

试剂、试剂盒 丙酮分子量标准TCA+DOC加与不加2-巯基乙醇的样品缓冲液仪器、耗材 聚丙烯微量离心管实验步骤 材料与设备丙酮(Aldrich Chemical Co.Inc.)注:保存于室温。不能放入冰箱。聚丙烯微量离心管 (1.5-ml)注:1. 用前将离心管洗干净。2. 分析极少量蛋白质(

三氯乙酸沉淀实验

三氯乙酸沉淀实验主要用于(1)蛋白质的沉淀纯化;(2)试样化合物的提取。实验方法原理1. 三氯乙酸为酸性化合物,是阴离子型沉淀剂,在低于蛋白质等电点的PH值时,酸根与带正点荷的蛋白质形成不溶性盐而沉淀;2. 作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团, 使之聚集沉淀。3. 随着蛋白

蛋白中放射性物质掺入率测定实验_三氯乙酸沉淀法

实验材料样品试剂、试剂盒预冷三氯乙酸乙醇乙醚仪器、耗材Whatman GF-C玻璃纤维膜多功能真空仪(Fisher)20 ml 闪烁瓶闪烁计数器实验步骤1. 加入 20 μl 预冷的 10% TCA 停止反应,充分混匀,冰浴 10 min 以沉淀蛋白质。2. 将样品点在真空仪中的 Whatman G

有用三氯乙酸沉淀分离蛋白的吗?需要多大的浓度?

简单的就是用纯化水或去离子水多洗涤几次,会影响蛋白的收率也可以使用膜渗透的办法,使用选择性膜将小分子的三氯乙酸与大分子蛋白质分离,不过此方法使用后需要物理浓缩过程,会增加能耗,而且如果蛋白质对热敏感不太适合使用

三氯乙酸丙酮法提取植物全蛋白实验

实验材料植物                                                          试剂、试剂盒三氯乙酸                                                                  β-巯基乙醇    

三氯乙酸丙酮法提取植物全蛋白实验

实验材料 植物试剂、试剂盒 三氯乙酸β-巯基乙醇丙酮R2D2 蛋白质溶解缓冲液UKS 蛋白质溶解缓冲液IPG 胶条水化液仪器、耗材 研钵和研槌实验步骤 1. 蛋白质沉淀与变性( 1 ) 用研钵和研槌在液氮中将植物材料研磨成细小的粉末( 见注释 4) 。( 2 ) 将约 200 μl 粉末转移到 2

三氯乙酸丙酮法提取植物全蛋白实验

实验材料植物试剂、试剂盒三氯乙酸β-巯基乙醇丙酮R2D2 蛋白质溶解缓冲液UKS 蛋白质溶解缓冲液IPG 胶条水化液仪器、耗材研钵和研槌实验步骤1. 蛋白质沉淀与变性( 1 ) 用研钵和研槌在液氮中将植物材料研磨成细小的粉末( 见注释 4) 。( 2 ) 将约 200 μl 粉末转移到 2 ml 的

简述三氯乙酸的应急处理

  1、泄漏应急处理  隔离泄漏污染区,周围设警告标志,建议应急处理人员戴好防毒面具,穿化学防护服。不要直接接触泄漏物,将地面洒上苏打灰,然后用大量水冲洗,经稀释的洗水放入废水系统。如大量泄漏,收集回收或无害处理后废弃。  2、防护措施  呼吸系统防护:空气中浓度超标时,应该佩带防毒口罩。必要时佩带

关于三氯乙酸的基本介绍

  三氯乙酸,又名三氯醋酸,是一种有机化合物,化学式为C2HCl3O2,有刺激性气味,易潮解,溶于水、乙醇、乙醚 。主要用于有机合成和制备医药、也可用作化学试剂、杀虫剂。  2017年10月27日,世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考,三氯乙酸在2B类致癌物清单中。  化学式:C

100%三氯乙酸(TCA)配制方法

在装有500gTCA的试剂瓶中加入100ml水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。(稀释液应在临用前配制)

关于三氯乙酸钠的基本介绍

  三氯乙酸钠是一种化学物质,分子式是C2HCl3O2。是生产某种农药的主要原料; 在乙烯砜型活性染料印花工艺中作抗酸剂,是生产某种农药的主要原料 ,产生二氯卡宾,醛的三氯甲基化。  中文名称:三氯乙酸钠  英文名称:Trichloroacetic acid, sodium salt  英文别名:S

简述三氯乙酸的理化性质

  密度:1.62g/cm3  熔点:54-58℃  沸点:196℃  折射率:1.62(20℃)  临界压力:4.81MPa  外观:无色晶体  溶解性:溶于水、乙醇、乙醚,微溶于四氯化碳

简述三氯乙酸的生化性质

  TCA与蛋白质之间主要有以下几个方面的作用:  1、在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐。  2、作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团,使之聚集沉淀。  3、随着蛋白质分子量的增大,其结构复杂性与致密性越大,TCA可能渗入分子内部而使之较难被完全除去,在电泳前样品加热处理时可

三氯乙酸的毒理学数据

  1、急性毒性  LD50:3300mg/kg(大鼠经口)  2、刺激性  家兔经皮:210μg,轻度刺激。  家兔经眼:3500μg(5s),重度刺激。  3、致敏性  有致敏作用。  4、致突变性  微生物致突变:鼠伤寒沙门菌250μg/皿。  微核试验:小鼠腹腔内给药300mg/kg(24h

关于三氯乙酸钠的生产方法介绍

  1、将三氯乙醛和浓硝酸加入反应釜中,加热共溶得三氯乙酸,然后加氢氧化钠水溶液中和,浓缩,结晶,过滤,干燥得产品。  2、3.2克氢氧化钠溶于12毫升水,冷却后,慢慢倾入含12.8克三氯乙酸的冷却的有侧管的三角瓶中,仅留约工八。的碱备用。·加1滴0.04%溴甲酚绿溶液,借毛细吸管进一步加碱至终点。

关于三氯乙酸钠的生产方法介绍

  1、将三氯乙醛和浓硝酸加入反应釜中,加热共溶得三氯乙酸,然后加氢氧化钠水溶液中和,浓缩,结晶,过滤,干燥得产品。  2、3.2克氢氧化钠溶于12毫升水,冷却后,慢慢倾入含12.8克三氯乙酸的冷却的有侧管的三角瓶中,仅留约工八。的碱备用。·加1滴0.04%溴甲酚绿溶液,借毛细吸管进一步加碱至终点。

关于三氯乙酸钠的生产方法介绍

  1、将三氯乙醛和浓硝酸加入反应釜中,加热共溶得三氯乙酸,然后加氢氧化钠水溶液中和,浓缩,结晶,过滤,干燥得产品。  2、3.2克氢氧化钠溶于12毫升水,冷却后,慢慢倾入含12.8克三氯乙酸的冷却的有侧管的三角瓶中,仅留约工八。的碱备用。·加1滴0.04%溴甲酚绿溶液,借毛细吸管进一步加碱至终点。

沉淀反应实验:环状沉淀反应

可溶性抗原与相应的抗体混合,在电解质存在的条件下,两者比例适合,即可有沉淀物出现,叫沉淀反应(Precipitation)。由于沉淀反应抗原多系胶体溶液。沉淀物主要是由抗体蛋白所组成。为了求得抗原与抗体的适宜比例,保证有足够的抗体,而且抗原分子小,具有较大的反应面积,因此操作上通常是稀释抗原,不稀释

蛋白质浓度分析实验——三氯乙醇沉淀

实验材料样品试剂、试剂盒TCA缓冲液丙酮仪器、耗材离心机实验步骤1. 对 500 μl 的样品(至少 5 μg/ml),加 50 μl 的 TCA ( 100% ) 并振荡。2. 把样品置于冰上 30 分钟(或者置于冷藏箱中 15 分钟),然后 10000 g 离心 5 分钟。3. 倾去上清液并仔细

用酸沉淀法浓缩蛋白质实验——三氯醋酸沉淀法

实验材料含蛋白质的样品试剂、试剂盒100%三氯醋酸(TCA)0.1N NaOH(400 mg NaOH 溶于 100 ml 蒸馏水)实验步骤1. 在 1ml 样品中至少要含有 5mg 蛋白质。加 100 ul 100% 的三氯醋酸(TCA),混匀;2. 将蛋白质在冰浴中沉淀 30 min (或在冷冻

沉淀DNA的实验——乙醇沉淀法

沉淀DNA的实验可应用于分离DNA。实验方法原理DNA 溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混 合,其乙醇的最终含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇来替代懈水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比9

环状沉淀反应实验

最简单、古老的一种沉淀试验。即在小口径试管内加入已知抗血清,沿管壁加入待检抗原于血清表面,若抗体与相应抗原发生反应,两层液面交界处出现白色环状沉淀,是为阳性,主要用于抗原的定性实验。实验方法原理当抗原与相应抗体形成一个接触面时,如二者比例适当,接触面上可形成一个乳白色的环状物即为阳性沉淀反应。实验材

免疫沉淀实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 裂解缓冲液稀释缓冲液SDSTrisTSA仪器、耗材 转子离心机实验步骤 1.  表面标记或生物合成标记的细胞在裂解缓冲液中于4℃放置1 h 后,再于4℃3 000 g 离心10 min 除去细胞核,然后将所得上清在10000 g 离心1 min。 2.  一次性对上清进

环状沉淀反应实验

实验方法原理 当抗原与相应抗体形成一个接触面时,如二者比例适当,接触面上可形成一个乳白色的环状物即为阳性沉淀反应。实验材料 免疫血清试剂、试剂盒 抗原生理盐水仪器、耗材 小沉淀管毛细吸管橡皮头实验步骤 1.  取小沉淀管2只,以毛细吸管吸取抗人血清约0.2毫升,加入第一管,加时注意不能有气泡。2.

沉淀DNA的实验

实验材料 DNA试剂、试剂盒 乙酸钠乙醇仪器、耗材 EP管低温离心机移液器-70度冰箱实验步骤 酶切前确定待切样品的浓度, 并选择合适的限制性内切酶和配套Buffer。2. 在离心管中加入如下成分:10×Buffer   1μl待切样品   xμl酶      0.5-1μl————————————

免疫沉淀实验

基本方案 制备抗体Sepharose 偶联物 抗Ig血清免疫沉淀放射性标记抗原 免疫沉淀放射性标记抗原             实验材料

沉淀DNA的实验

乙醇沉淀法             实验方法原理 DNA 溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体

环状沉淀反应实验

环状沉淀反应广泛应用于法医学的血迹鉴别和食物掺假的测定。通常这些可疑材料作为抗原,用标准抗血清加以鉴定。它具有用材少的优点,例如衣服等物品上的血迹用生理盐水洗下就可作为抗原进行检查。实验方法原理可溶性抗原例如细菌的提取物,血清、病毒溶液等与相应抗体反应,在有电解质的情况下,会产生细微的沉淀称为沉淀反

蛋白质沉淀技术(三)

3.策略 C 的基本操作程序(1) 配制 10%(V/V)[5%(m/V)] 的 PEI 储存液。PEI(WV) 常以 50%(m/V) 的黏稠液体状态存在(来自于 MPBiochemicals 的 PEI, 其相对分子质量 Mw=50000?100000, 也可采用其他来源,如 Sigma 和