溶解受体的凝集素亲和层析实验
本实验介绍关于溶解受体的凝集素亲和层析过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒麦胚凝集素(WGA)-琼脂糖溶解的胰岛素受体牛血清白蛋白[125I] 胰岛素(受体级)猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 D溶液 E结合缓冲液仪器、耗材一次性小型塑料柱实验步骤材料与设备麦胚凝集素(WGA)-琼脂糖(~2.5 ml 沉积的微球)(Vector Laboratories,Inc.ALI023 或 EY Laboratories,Inc.A2101)溶解的胰岛素受体(得自实验 2)一次性小型塑料柱(Bio-Rad Laboratories)牛血清白蛋白(BSA,1%)[125I] 胰岛素(受体级)(DuPont NEN NEX 196)猪胰岛素〔17.5umol/L(0.1 mg/ml),于 0.001mol/L HCl 中〕(Sigma Chemical Co.I3505)牛γ-球蛋白(0.4%, 于......阅读全文
溶解受体的凝集素亲和层析实验
试剂、试剂盒 麦胚凝集素(WGA)-琼脂糖溶解的胰岛素受体牛血清白蛋白[125I] 胰岛素(受体级)猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 D溶液 E结合缓冲液仪器、耗材 一次性小型塑料柱实验步骤 材料与设备麦胚凝集素(WGA)-琼脂糖(~2.5 ml 沉积的微球)(Vector Laborat
溶解受体的凝集素亲和层析实验
本实验介绍关于溶解受体的凝集素亲和层析过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒麦胚凝集素(WGA)-琼脂糖溶解的胰岛素受体牛血清白蛋白[125I] 胰岛素(受体级)猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 D溶液 E结合缓冲液仪器、耗材一次性小型塑料柱实验步骤材料与设
溶解受体的凝集素亲和层析实验
溶解受体的凝集素亲和层析实验 试剂、试剂盒 麦胚凝集素(WGA)-琼脂糖 溶解的胰岛素受体
凝集素亲和层析的应用
免疫亲和层析(Immunoaffinity Chromatography,IAC),或免疫亲和色谱,是利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法。 亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。
凝集素亲和层析的原理
简单来说,亲和层析利用流动相和固定相内不同生物分子之间相互作用强度的差异来分离物质。通常,在开始亲和层析前需要预先进行全细胞提取物的粗制,例如细胞裂解液,生长培养基或血清。首先将固定相装入带有流动相的色谱柱中,其中含有某类特定的生物大分子(从DNA到蛋白质,取决于实验需求)。等待一段时间使两相充分混
凝集素亲和层析法纯化蛋白质实验
凝集素是能可逆性结合碳水化合物的蛋白质。因为绝大多数凝集素至少每个分子有两个碳水化合物结合部位,所以它们可以沉淀糖蛋白和凝集细胞。凝集素也就可以用作糖蛋白的亲和配基,具有单糖的糖蛋白可用温和的蛋白质冼脱条件分离。虽然凝集素亲和层折没有很高的选择性,但是无疑它已成为蛋白质纯化的一种常用方法。它通常作为
凝集素亲和层析法纯化蛋白质实验
刀豆素 A 亲和柱纯化蛋白质 实验方法原理 用于亲和层析的凝集素应根据它们结合的特异性和紧密度加以选择。例如,刀豆素 A(Con A)与糖蛋白含有的葡萄糖
凝集素亲和层析法纯化蛋白质实验
实验方法原理 用于亲和层析的凝集素应根据它们结合的特异性和紧密度加以选择。例如,刀豆素 A(Con A)与糖蛋白含有的葡萄糖或甘露糖结合,而麦芽凝集素只与具 N-乙酰葡糖胺的蛋白质结合。胞膜糖蛋白常与麦芽凝集素结合,而可溶性糖蛋白却通常用 Con A 或扁豆凝集素亲和柱纯化。由于在许多情
凝集素亲和层析的原理和应用
中文名称凝集素亲和层析英文名称lectin affinity chromatography定 义将凝集素以共价形式与不溶性载体相连接作为亲和吸附剂的层析技术。可用于从混合物中分离或分析糖类及糖复合物,如多糖、糖蛋白、细胞膜碎片、酶、抗体复合物等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术
细胞膜受体的凝集素受体的介绍
凝集素是从各种植物或低等动物组织中分离而得到的一类特殊蛋白质,能与动植物细胞表面的受体发生特异性结合产生一系列的生理效应。它们通过与细胞表面寡糖结构决定簇的交互作用导致细胞发生凝集,因而又称凝集素。最早发现它们能诱导红细胞发生凝集而用于临床血型分类,故又有植物血凝素之称。已报道的凝集素多达500
蛋白质糖基化的检测实验——植物凝集素亲和层析
试剂、试剂盒TBS仪器、耗材植物凝集素柱实验步骤1. 在含有 Ca2+、Mg2+ 的 TBS 中平衡植物凝集素亲和介质,用至少 20 个柱体积清洗。2. 在 5 ml —次性塑料吸管或注射器中制备 1 ml 植物凝集素柱。3. 以缓慢流速(小于 0.25 ml/min)将蛋白样本上柱,回收所有过柱子
胰岛素受体的溶解及活性测定实验
试剂、试剂盒纯化的鼠肝质膜牛血清白蛋白[125I] 胰岛素猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 B溶液 C结合缓冲液仪器、耗材Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管实验步骤材料与设备纯化的鼠肝质膜(得自实验 1)Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管牛血清白蛋白(BSA,1%)[125I] 胰岛素
胰岛素受体的溶解及活性测定实验
试剂、试剂盒 纯化的鼠肝质膜牛血清白蛋白 [125I] 胰岛素猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 B 溶液 C 结合缓冲液仪器、耗材 Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管实验步骤 材料与设备纯化的鼠肝质膜(得自实验 1)Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管牛血清白蛋白(BSA,1%)[125
胰岛素受体的溶解及活性测定实验
胰岛素受体的溶解及活性测定实验 试剂、试剂盒 纯化的鼠肝质膜 牛血清白蛋白 [125I]
凝集素受体的基本信息介绍
凝集素是从各种植物或低等动物组织中分离而得到的一类特殊蛋白质,能与动植物细胞表面的受体发生特异性结合产生一系列的生理效应。它们通过与细胞表面寡糖结构决定簇的交互作用导致细胞发生凝集,因而又称凝集素。最早发现它们能诱导红细胞发生凝集而用于临床血型分类,故又有植物血凝素之称。已报道的凝集素多达500
凝集素亲和层析法在免疫层析测试的应用
一种基于免疫层析测试(ICT)试纸的亲和层析测试。有别于普通临床检测,该试纸提供了快速的诊断手段。使用ICT,技术人员无需使用实验室,即可在患者的床边进行测定。 ICT检测对引起感染的微生物高度特异。
膜蛋白的纯化实验(二)
三、膜蛋白的纯化一 旦 使 用 了 合 适 的 去 污 剂 将 膜 蛋 白 从 细 胞 膜 中 増 溶 出 来 ,就 可 以 分 离 目 标 蛋 白 质 了 。传 统 色 谱 层 析 技 术 ,如 凝 胶 过 滤 、亲 和 、离 子 交 换 和 层 析 聚 焦 (chromatofocusi
亲和层析实验
可溶性抗原或膜结合抗原的分离 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
亲和层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 TrisTSA裂解缓冲液脱氧胆酸钠洗涤缓冲液三乙醇氨缓冲液仪器、耗材 层析柱离心管离心机实验步骤 1. 准备一支活化后被淬灭的Sepharose预柱(5 ml 柱床)和一支Ab-Spharose免疫亲和层析柱,并将它们串联起来。2. 以冰冷TSA溶液重悬50 g 细
亲和层析(affinity-chromatography)的应用
亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。1.抗原和抗体利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为免疫亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上,就可以从血清中分离其对应的抗体。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低,用离
生化实验讲义(理论部分)——层析技术(十一)
3.4.5 亲和层析的应用亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。抗原和抗体利用抗原、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为免疫亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上,就可以从血清中分离其对应的抗体。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白
亲和层析的操作实验
亲和层析的操作实验 试剂、试剂盒 非特异性竞争 DNA 液氮 缓冲液 Z
亲和层析的操作实验
试剂、试剂盒非特异性竞争 DNA液氮缓冲液 Z缓冲液 Ze柱再生缓冲液柱保存缓冲液仪器、耗材EconoCoIumn 柱实验步骤材料与设备EconoCoIumn 柱。(Bio Rad Laboratories731-1550)非特异性竞争 DNA液氮试剂缓冲液 Z缓冲液 Ze柱再生缓冲液柱保存缓冲液(
亲和层析的操作实验
试剂、试剂盒 非特异性竞争 DNA液氮缓冲液 Z缓冲液 Ze 柱再生缓冲液 柱保存缓冲液仪器、耗材 EconoCoIumn 柱实验步骤 材料与设备EconoCoIumn 柱。(Bio Rad Laboratories731-1550)非特异性竞争 DNA液氮试剂缓冲液 Z缓冲液 Ze柱再生缓冲液柱保
关于非经典C-型凝集素受体的简介
与经典的 C 型凝集素受体相比,非经典C 型凝集素受体具有类似的CTLD 结构,但该结构域中缺少与Ca2+ 结合的保守基序,识别配体是Ca2+非依赖的。非经典 C 型凝集素样受体编码基因主要定位于 NK 基因复合物 (natural killer gene complex,NKC),人的定位于
免疫亲和层析实验
试剂、试剂盒 免疫亲和介质 溴化氰(CNBr) 活化的 Sepharose 4B HCl 55% 饱和 AMS 沉淀物 偶联缓冲液
免疫亲和层析实验
试剂、试剂盒免疫亲和介质溴化氰(CNBr)活化的 Sepharose 4BHCl55% 饱和 AMS 沉淀物偶联缓冲液乙醇胺缓冲液 BLAC 洗脱缓冲液二硫苏糖醇硫氰酸钾叠氮钠仪器、耗材Econo-柱SDS-PAGE 电泳装置实验步骤材料与设备免疫亲和介质(带固定化的 MAb NT73; 见下文)溴
免疫亲和层析实验
试剂、试剂盒 免疫亲和介质溴化氰(CNBr) 活化的 Sepharose 4BHCl55% 饱和 AMS 沉淀物偶联缓冲液乙醇胺缓冲液 BLAC 洗脱缓冲液二硫苏糖醇硫氰酸钾叠氮钠仪器、耗材 Econo-柱SDS-PAGE 电泳装置实验步骤 材料与设备免疫亲和介质(带固定化的 MAb NT73; 见
亲和层析实验技术方法
INTRODUCTIONThis protocol describes a method for removing antibodies that react with bacterially encoded proteins by passing a crude preparation of im
亲和层析实验:常规方法
实验步骤一、亲和介质的选择亲和纯化的成功取决于是否选择了合适的固相载体和配基。理想的亲和介质 (如吸附配基的固相载体)应该具备孔隙大、理化性质高度稳定的特征。亲和介质可以选择性的捕获相应耙标,既保证较弱的非特异性吸附,又可以在整个过程中维持良好的流动特征。优选介质应具备便宜、易获取和使用简便的特点。