银染实验
试剂、试剂盒甲醇（50% 和5%v v)二硫苏糖醇AgNO3柠檬酸（固态)显影液实验步骤试剂甲醇（50% 和5%v/v)10umol/L二硫苏糖醇（DTT)AgNO3(0.1%w/v)柠檬酸（固态)显影液操作程序此操作程序是根据Merril(1987)的方法修改而成。室温下，凝胶在旋转平台上缓慢摇动，并进行下列步骤。1)在50% 甲醇溶液中浸泡2次，每次15 min。2)在5% 甲醇溶液中浸泡10 min。3)用H2O迅速洗3次。4)在10umol/L DTT溶液中浸泡20 min。5)在0.1%AgNO3溶液中浸泡20min。6)先用H20快速洗1次，然后用显影液洗2次，每次不超过15s。7)在显影液中浸泡数分钟，直至显现蛋白质带。8)加入固体柠檬酸（双水合物）（每200 ml显影液加约10 g柠檬酸)，停止显影。9)用铝箔盖住凝胶（使避光)，继续浸泡10 min。10)用H2O彻底清洗。凝胶在铝箔下（在暗处）H2O中浸泡10......阅读全文
低背景的蛋白质银染(silver－staining)方法
我们做蛋白质电泳的人都知道，银染色很灵敏，有很强的说服力，但通常胶背景较深，不易扫描。在这里介绍一下低背景的蛋白质银染方法。Step Reagent Time/minFix 50%EtOH, 12%HAC, 0.1%HCHO, 38%H2O 60Rinse 50% EtOH 5 min, 3 tim
关于DNA测序技术的测序凝胶的银染介绍
染色过程要求凝胶浸在塑料盘中。因而至少使用两个盘子，大小与玻璃板类似。在盘中加入新鲜溶液之前须用高质量的水洗涤盘子。 1.电泳完毕后用一个塑料片子小心地分开两板，凝胶应该牢固地附着在短玻璃板上。 2. 固定凝胶：将凝胶(连玻璃板)放入塑料盘，用固定/停止溶液浸没,充分振荡20分钟或直至样品中
银染后的胶打质谱蛋白很少的原因
你指的蛋白很少是指分析出来的蛋白个数少，还是蛋白量低啊？银染灵敏度高，如果切单条带，蛋白含量本来就低，所以后续处理再损失一部分，打谱出来后，有些蛋白因为量实在太低了，低于检测下限，就没法检测出来了。建议先增加蛋白用量，另外也要查询打谱后的数据，看酶切处理是不是完全，有没有可能是不完全酶切，导致大片段
PAGE凝胶快速银染试剂盒操作手册
PAGE凝胶快速银染试剂盒货号: G7210规格: 1L保存: 室温(15℃-25℃) 干燥保存，复检期12个月。试剂盒内容： G7210硝酸银 2g染色液A 100ml显色液B 100ml显色液C 100ml终止液D 100ml注：1L 规格指可配制的硝酸银染色液的体积，实际使用次数根据PAGE
基于PCR的基因分型实验—用银染的方法无放射性的分析SSLP
实验材料PCR 扩增 SSLP 的变性聚丙烯酰胺凝胶试剂、试剂盒乙醇硝酸硝酸银染色溶液显色液乙酸仪器、耗材Whatman 滤纸染色仪器80℃真空电炉实验步骤1.电泳后，小心的打开仪器，分开玻璃板。将有胶的那块板子放于染色一起的底部，仔细地将上面的架子和垫圈放置于胶边缘的上面，拧紧闩子。胶里如果有小空
银染核仁形成区的光镜和电镜标本制备及观察
实验原理 在细胞分裂中期核型中，人的端着丝粒染色体短臂区和在间期细胞核的核仁中有与银离子特异亲合物质，通过银染可以显示它们的致量，因此一直被人们所关注。近年来发现，虽然人的端着丝粒染色体短臂是 28S、18S、和 5.8S rRNA 基因存在部位，称核仁形成区(Nucleolar organizer
脂染介导的－DNA－转染实验
实验材料 指数生长的哺乳动物细胞培养物 试剂、试剂盒 脂染试剂 NaCl 枸橼酸钠
脂染介导的－DNA－转染实验
下述方法是 Mark Evans 所研究的一种方法的改进（Alexion Pharmaceuticals,New Haven,Connecticut)。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W.拉塞尔。实验材料指数生长的哺乳动物细胞培养物试剂、试剂盒脂染试剂N
免疫组化双染实验protocol
第一抗体的染色： 1、 将切片浸在3％H2O2甲醇溶液（新鲜配制）中10分钟，PBS冲洗2分钟×3次 2、 加100ul（2滴）血清封闭溶液（试剂1）到切片上，室温孵育10分钟，倒掉（不能冲洗） 3、 加入一抗（按照说明推荐浓度和孵育条件） 4、 使用含有0.05％吐温20的PBS( TPB
免疫组化双染实验流程
一、脱蜡和水化方法同SP法。二、第一抗体的染色1、将切片浸在3%H2O2甲醇溶液（新鲜配制）中10 min，PBS冲洗3 min×3次；2、加100 ul（2滴）血清封闭溶液（试剂1）到切片上，室温孵育10 min，倒掉（不能冲洗）；3、加入一抗（按照说明书推荐浓度和孵育条件）；4、使用含有0.05
异染颗粒染色配制及染色方法实验
实验方法原理 用于白喉棒状杆菌染色，异染颗粒可明显地被显示出来，标本直接涂片或细菌涂片均可用改良阿伯特法染色来观察异染颗粒。实验步骤 实验试剂：甲液：甲苯胺兰：0.15g 孔雀绿：0.2g冰醋酸： lml 95%乙醇：2ml蒸馏水： 100ml将各染料先溶于乙醇，然后加入水与冰醋酸的
异染颗粒染色配制及染色方法实验
异染颗粒染色配制及染色方法实验可以用于：（1）检测白喉杆菌的存在；（2）异染颗粒与菌体对比度好。实验方法原理用于白喉棒状杆菌染色，异染颗粒可明显地被显示出来，标本直接涂片或细菌涂片均可用改良阿伯特法染色来观察异染颗粒。实验材料白喉杆菌试剂、试剂盒甲苯胺兰孔雀绿冰醋酸乙醇仪器、耗材培养基载玻片实验步骤
聚丙烯酰胺凝胶(PAGE胶电泳)电泳的方法与银染方法
PAGE胶电泳（聚丙烯酰胺凝胶电泳 ）主要是以PAGE为介质，根据DNA分子大小和电荷分离DNA分子。PAGE胶电泳采用银染法进行显色。银染的原理：一、银离子（一般是AgNO3 )和DNA结合;二、还原剂甲醛把Ag+ 还原成银颗粒，最终DNA呈现为黑褐色。聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持
DNA测序技术（非同位素银染测序系统操作技术与T7－DNA聚...
3、质粒膜板制备：参照第一章所述的方法。（二）超螺旋质粒DNA 的碱变性：1、取4mg（约2pmol）超螺旋质粒DNA 至一eppendorf管中，加无离子水到终体积18ml。2、加2ml 2mmol/L NaOH/2mmol/L EDTA 溶液，置于室温(25℃下）保温5分钟。3、加2ml 2mo
银染法组织端粒酶活性TRAP电泳分析试剂盒产品使用说明
主要用途YIJI银染法组织端粒酶活性TRAP电泳分析试剂是一种旨在通过端粒酶体外合成端粒重复序列的引物延展方法，继而进行多聚酶联扩增反应，在非变性聚丙烯酰胺电泳上，通过经典的银染技术，呈现六碱基相间的阶梯图像，以分析和评价活细胞端粒酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。广
细胞凋亡检测实验——AnnexinVFITC－单染法
实验方法原理细胞凋亡或称程序性细胞死亡（Programmed Cell Death ,PCD）是细胞的生命现象之一，它在机体的胚胎发育、组织修复及自身反应性T淋巴细胞的清除等方面起着十分重要的作用。细胞凋亡调节的失控可导致临床各种疾病的发生。如老年性痴呆与神经细胞凋亡过度有关，自身免疫性疾病和肿瘤与
C280成像系统在考马斯蓝和银染蛋白胶成像中的应用
Azure Biosystems c系列数字成像系列产品是行业领先产品，用户界面友好、应用灵活。 在本应用中，我们展示了一些可以在c系列家族最新成员Azure Biosystems c280上完成的新应用。 简介 Azure Biosystems c280数字成像仪是数字化学发光成像
DNA测序技术（非同位素银染测序系统操作技术与T7－DNA...4
7. 在超纯水中浸洗凝胶两次，每次2分钟，注意在本操作中戴手套拿着胶板边缘避免在胶上印上指纹。8. 将凝胶置于室温干燥或用抽气加热法干燥。在可见光灯箱或亮白，黄色背景(如纸)上观察凝胶，若需永久保存的记录，则可用EDF胶片保留实验结果。[注意] 测序产物的银染是显现序列信息的一种新方法，本系统的成败
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3、为阻止Taq DNA 聚合酶延伸非特异性退火引物， 热循环仪必须预热至95℃。温度变换应越快越好。下面的循环时间不包括变温时间。如果你无法确定使用何种模式，建议从模式1开始。 模式1：适用于引物
C280成像系统在EtBr、SYBR－Green、考马斯蓝和银染蛋白胶成像...
C280成像系统在EtBr、SYBR Green、考马斯蓝和银染蛋白胶成像中的应用Azure Biosystems c系列数字成像系列产品是行业领先产品，用户界面友好、应用灵活。 在本应用中，我们展示了一些可以在c系列家族最新成员Azure Biosystems c280上完成的新应用。简介Azur
DNA测序技术（非同位素银染测序系统操作技术与T7－DNA...7
在分子生物学研究中，DNA 的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基础。目前用于测序的技术主要有Sanger等（1977）发明的双脱氧链末端终止法和Maxam和 Gilbert（1977）发明的化学降解法。这二种方法在原理上差异很大，但都是根据核苷酸在某一固定的点开始，随机在某一个特定的碱基
DNA测序技术（非同位素银染测序系统操作技术与T7－DNA...3
二、材料待测的DNA 模板，可用双链或单链模板。 三、设备高压电泳仪，测序用电泳槽，照相显影用大号塑料盆，制胶设备，吹风机，放射自显影盒，X-光片。 四、试剂 1、5×T7 DNA 聚合酶缓冲液：200mmol/L Tris・Cl，pH7.5，100mmol/L MgCl2，
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（1）过夜培养的宿主细胞(如NM522或JM101)用3ml TYP肉汁培养基以1:100稀释。在37℃强烈震荡1小时之后，细胞进入对数早期。此时，将一个合适的含有重组M13的噬菌斑(连同琼脂)用滴管转入该细胞培养液中。（2）37℃强烈震荡(300rpm) 培养6小时。（3）把细胞培养液转入两只1.
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（三）电泳：1、预电泳（1）当凝胶聚合完全后，拨出鲨鱼齿梳，将该梳子反过来，把有齿的一头插入凝胶中，形成加样孔。（2）立即将胶板固定在测序凝胶槽中，一般测序凝胶槽的上下槽是分开的，因而只有在固定好凝胶板后，方能加入TBE缓冲液。（3）稀释10×TBE缓冲液至1×TBE，将该缓冲液加入上下二个电泳槽中
浅谈预染蛋白Marker与未预染蛋白Marker
在Western实验中，蛋白Marker可以监控蛋白质在SDS-PAGE中的迁移，监控蛋白的转膜效率，确定蛋白分子量大小。选择正确的蛋白Marker是western blot实验成功的必备条件之一。蛋白Marker分为两种：一种是未预染的Marker，即宽分子量蛋白标准，高分子量蛋白标准及低分子量蛋
异染性染料
中文名称异染性染料英文名称metachromatic dye定 义使细胞或组织染色后显示出颜色差异的染料。如甲苯氨蓝、天青A等，它们可用于显示肥大细胞硫酸黏多糖（肝素）的含量。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生物学技术（二级学科）
鞭毛染色实验——硝酸银染色法
细菌的鞭毛很纤细，其直径通常为 0.01 ~0.02 μm， 所以，除了很少数能形成鞭毛束（由多根鞭毛构成）的细圈可以用相差显微镜直接观察到鞭毛束的存在外，一般细菌的鞭毛均不能用光学显微镜直接观察到，而只能用电子显微镜观察。要用普通光学显微镜观察细菌的鞭毛，必须用鞭毛染色法。鞭毛染色方法很多，本实验
核酸染色实验——核仁组成区嗜银蛋白
实验方法原理核仁组成区是 DNA 的襻，具有核糖体基因（rDNA），在一定条件下可用银反应法进行定位，是通过银的聚合物沉积于胱氨酸和半胱氨酸的双硫键位置上，所以在镜下能够清楚可见颗粒状的核仁组成区嗜银蛋白（AgNOR）。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水明胶粉双蒸水硝酸银仪
进行硝酸银分解反应实验时应如何控制实验条件？
进行硝酸银分解反应实验时，控制实验条件可以从以下几个方面考虑：光照控制：选择稳定且强度可调节的光源，如专用的实验灯或可调节亮度的台灯。保持光源与反应容器的距离固定，以获得相对稳定的光照强度。如果研究不同波长光的影响，可以使用滤光片来获取特定波长的光。温度控制：尽量在恒温环境中进行实验，例如在恒温箱或
如何通过实验测定硝酸银的摩尔质量？
以下是一种通过实验测定硝酸银摩尔质量的可能方法：准确配制一定浓度的硝酸银溶液：使用分析天平精确称取一定质量的硝酸银固体，溶解在容量瓶中配制成准确浓度的溶液。进行沉淀反应：向一定体积的硝酸银溶液中加入过量的已知浓度的氯化钠溶液，发生沉淀反应：AgNO₃ + NaCl → AgCl↓ + NaNO₃ ，