免疫沉淀的培养细胞的裂解实验_单层培养的细胞的裂解
实验方法原理培养的动物细胞一般使用温和去垢剂来裂解。如果低浓度的去垢剂就能引起细胞的充分裂解（如1%NP-40或1%TritonX-100)，那么这对目标蛋白的影响可能比匀浆方法更温和。去垢剂的选择必须根据免疫沉淀所用的抗体的识别表位的性质来决定。实验材料单层细胞或悬浮细胞试剂、试剂盒裂解缓冲液PBS仪器、耗材离心机实验步骤①去掉培养基，并用冷PBS洗细胞2次。②把培养瓶置于冰上。③100mm的培养瓶（预冷至4℃)中加入10ml裂解缓冲液，裂解缓冲液的体积应根据培养瓶的大小来调整。④冰上孵育细胞10〜30min(取决于所孵育的细胞系），并不时地摇动瓶子。⑤在冰上倾斜瓶子，使缓冲液流向一边，用吸管将裂解液转移到一个微量离心管或其他合适的离心管中。其他培养瓶均如此操作。有些研究者喜欢把细胞从培养瓶中刮下来，但这可能产生细胞张力，只在特殊情况下使用。⑥4℃条件下20000g离心裂解液10min。⑦小心地把上清移到另一个试管中，应确保不......阅读全文
Transwell实验
定义： 一类有通透性的杯状装置，可认为是一种膜滤器（Membrane filters），或者是一种通透性的支架（permeable supports）。组成： 杯子底层是一张有通透性的膜，杯子其余部分的材料与普通的孔板是一样。这层膜带有微孔，孔径大小有0.1－12.0µm，根据不同需要可用不同材料，
ELISA实验
酶联免疫吸附实验（ELISA）可以用于：（1）检测大分子抗原和特异性抗体等；（2）具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。实验方法原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。
萃取实验
实验方法原理萃取：是利用物质在两种互不相溶（或微容）溶剂中溶解度或分配比的不同来达到分离提纯或纯化的一种操作。分配定律：若被萃取溶液的体积为V，被萃取溶液中溶质的总质量为W0，每次萃取所用溶剂B的体积均为S，经过n次萃取后溶质在溶剂A中的剩余量为Wn，则：因为 KV∕KV+S恒小于1所以
ELISA实验
实验材料 抗原血清试剂、试剂盒 碳酸盐包被缓冲液PBSTBSA仪器、耗材 96孔酶标板4℃冰箱恒温培养箱分光光度计实验步骤 一、包被抗原 1. 用50mM 的碳酸盐包被缓冲液（pH 9.6）溶解抗原，使抗原浓度为10-20 μg/ml，加100 μl/孔到96 孔酶标板，4℃放置过夜。2. 第二天弃
实验守则
实验步骤一. 上实验课必须带工作服（白大衣），教科书，实验指导，实验报告及绘图用具（文具）。二. 应做好实验前的预习，明确实验指导中所提出的目的要求。三. 要爱护显微镜，实验用具和教学标本，应按规定进行实验操作。四. 要坚持严格科学态度，耐心，细致，认真进行实验和思考。五. 损坏实验用具和
YAC实验
1. 尽管当插入片段大于100 kb 时，YAC克隆是可供选择的基因组DNA大片段克隆方法之一，但该系统的一些特性使之很难被迅速采纳为常规克隆手段。2. 在复杂的酿酒酵母菌的基因组中，通常所用的YAC只是一个单拷贝。3. 因此在YAC文库中鉴定一个克隆，其信噪比较之在λ噬菌体载体或粘粒载体文库
VP实验
实验方法原理 些菌属能使丙酮酸脱羧，生成中性的乙酰甲基甲醇，通过 KOH 和空气的作用，使乙酰甲基甲醇（3-羟基丙酮）转变成双乙酰，双乙酰在α-奈酚和肌酸的催化下，生成红色化合物，为 VP 试验阳性。实验步骤 将待检菌接种于葡萄糖蛋白胨水培养基，，经 37℃ 培养 48 h 后，按每毫升培养液加 0
YAC实验
YAC文库构建 YAC文库筛选 实验步骤 1. 尽管当插入片段大于100 kb 时，YAC克隆是
乙烷实验
仪器、耗材圆底烧瓶锥形瓶空心塞实验步骤仪器：有机合成制备仪器100 mL圆底烧瓶2个；150 mL锥形瓶2个；空心塞1个；500 mL烧杯1个；真空接液管1个；75℃弯头；蒸馏头；直形冷凝管；温度计100 ℃ 1个；温度计套管；分液漏斗2个；量筒10 mL ；加热套250 mL，滴管。药品：95 %
核酶实验
实验方法原理 锤头型核酶是最简单的一类核酶，而且其靶序列也比较简单。锤头型核酶发现于几种植物病毒的卫星 RNA、一种类病毒 RNA 和蝾螈核卫星 DNA 的转录产物中。它催化一些类病毒 RNA 和一些与类病毒 RNA 相似的只复制产物的不可逆自我剪切„实验材料 ATPT4多核苷酸激酶RNasinDT
萃取实验
实验方法原理 萃取：是利用物质在两种互不相溶（或微容）溶剂中溶解度或分配比的不同来达到分离提纯或纯化的一种操作。分配定律：若被萃取溶液的体积为V，被萃取溶液中溶质的总质量为W0，每次萃取所用溶剂B的体积均为S，经过n次萃取后溶质在溶剂A中的剩余量为Wn，则：因为 KV∕KV+S恒小于1所以
实验电炉
实验电炉主要用于实验，多用作定量分析烧结、灰化试验用，是间歇式电阻炉的一种。当今应用于大专院校、工矿企业等实验和小批量生产之用。
萃取实验
现用CCl4从溶有碘的氯化钠溶液中萃取碘并用分液漏斗分离两种溶液。其实验操作可分解为如下几步:A.把盛有溶液的分液漏斗放在铁架台的铁圈中;B.把50 mL混合溶液和15 mL CCl4加入分液漏斗中，并盖好玻璃塞;C.检查分液漏斗活塞和上口的玻璃塞是否漏夜;D.倒转漏斗用力振荡，并不时旋开活塞放气，
实验守则
一. 上实验课必须带工作服（白大衣），教科书，实验指导，实验报告及绘图用具（文具）。二. 应做好实验前的预习，明确实验指导中所提出的目的要求。三. 要爱护显微镜，实验用具和教学标本，应按规定进行实验操作。四. 要坚持严格科学态度，耐心，细致，认真进行实验和思考。五. 损坏实验用具和教学标本
溶血实验
溶血试验是对人体内的红细胞进行红细胞破裂溶解检测。主要用于溶血性贫血的病因诊断。溶血是指红细胞破裂溶解现象。很多理化因素都可以引起溶血。
LCM－实验
试剂、试剂盒 RNaseAway仪器、耗材 胶带LCM 棺子去湿器分液器镊子LCM 系统 Pix Cell Ⅱ无 RNA 酶的管子实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂RNaseAway(7000，MolecularBioProducts，SanDiego，CA)2. 特殊设备.胶带LCM 棺子
细胞融合实验的实验原理简介
根据Burnet的抗体选择学说，一个B淋巴细胞只能产生一种针对它能够识别的特异性抗原决定簇的抗体。从一个祖先B细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系称为克隆。来自克隆系的细胞基因是完全相同的，产生的抗体也完全相同。这种从一株克隆系产生的性质相同的均一抗体称为单克隆抗体。但这种具有分泌功能的B淋巴细胞难以在
实验室经验实战总结——实验细节
1.实验前的准备工作很重要，试验前要准备充分，拿到任务应当进行简单的思考，将试验需要的各种试剂、试液、仪器以及试验的流程、注意事项、以前试验当中遇到的问题等想清楚，准备好，免得到时少东少西，自乱阵脚。第一次新实验的话最好请教一下做过类似实验的人,对于不常做的实验最好做一份详尽的试验流程图做时贴在试验
实验室经验实战总结——实验安全
1.进入实验室要穿好工作服，不要存侥幸心里，如果，一不小心碰到酸，心爱的衣服烧个洞是小事，烧伤皮肤就麻烦了。不要嫌麻烦，一定要戴手套才做对身体有危害的实验，要对自己的身体负责。2.实验前后清洁洗手，如果，实验中途去休息喝水的时候，也要洗手，不要以为刚才的实验药品没什么毒性，生命很重要，小心为妙，另外
动物实验技术：转基因小鼠制备实验
1、 选取7~8周龄雌性小鼠，阴道口封闭，作为供体，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。2、 47~48小时后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并与正常公鼠合笼；另取数只适龄母鼠（2月龄以上）作为受体，阴道口潮红，与结扎公鼠合笼。3、第二天上午9:00前观察供体、受体，
实验室实验动物设施的分类
按照设施的使用功能,分为实验动物生产设施、实验动物实验设施和实验动物特殊实验设施。(1)实验动物生产设施指用于实验动物生产的建筑物和设备的总称。包括动物生产区、辅助生产区和辅助区。(2)实验动物实验设施指以研究、试验、教学、生物制品、药品及相关产品生产、质控等为目的而进行实验动物实验的建筑物和设备的
沉淀反应实验：火箭电泳(rocket－electrophoresis)实验
火箭电泳实际是一种定量免疫电泳。其原理为：在电场作用下，抗原在含定量抗体的琼脂介质中泳动，二者比例在合适时在较短时间内形成状似火箭或锥形的沉淀线，而此沉淀线的高度常与抗原量成正比关系，因此本法可以测定样品中抗原的含量。1、材料（1）诊断血清（抗体）：抗人IgG或IgA免疫血清（2）待检血清（抗原）：
实验室间比对实验工作程序
1．1前言 能力验证的主要作用是评估实验室胜任检验工作的能力，识别与实验室相关的问题，如人员的技术素质，设备的状态，所用耗材质量，环境的控制等诸多影响测试结果的因素。 通过实验室之间的比对可以鉴别实验室间的差异及水平，作为实验室本身而言，可以示其为一次外部审核，可以促进、完善和提高自身的内部质量控制
ELISA实验新手应了解的实验过程
1．从已平衡至室温的密封袋中取出实验所需板条，未用的板条和干燥剂请放回铝箔袋内压 实自封条，密封口袋，放回4℃。2．空白孔加规范品和标本稀释液，其他相应孔中加标本或不同浓度规范品(100ul/孔)，用封板胶纸封住反响孔，36℃孵箱孵育90分钟。 3．提早20分钟预备生物素化抗体工作液。 4．洗板5次
细胞融合实验的实验步骤介绍
1. DMEM或1640基础培养基、PEG溶液置于37℃水浴中预温； 2. 将Balb/c小鼠摘眼球处死后，浸入75%洒精； 3. 无菌取免疫小鼠的脾脏； 4. 脾脏用PBS洗涤后，放入无菌过滤的网筛，再把网筛放在盛有完全培养基的玻璃平皿中用研磨棒（或注射器针管）轻轻研磨或挤压，使其通过网
凝胶迁移实验（EMSA）之三：实验步骤
实验材料：DNA样品试剂、试剂盒： [γ-32P]ATP、T4多聚核苷酸激酶、Nuclease-Free Water、T4多聚核苷酸激酶缓冲液、醋酸铵、TE、无水乙醇、TBE buffer、重蒸水、甲叉双、丙烯酰胺、丙烯酰胺、甘油、过硫酸铵、TEMED（四甲基乙二胺）、EMSA Gel
动物实验跑台实验方法介绍
ZH-PT型动物实验跑台(平板跑步机)主要用于白鼠类小动物作跑步运动训练，可取代传统的游泳训练，使训练强度指标更加准确。是体能、耐力、运动损伤、营养、药物、生理和病理等实验的必要的手段之一。二、技术指标1、跑道数： 8通道9、跑台倾角±35°均可调2、大鼠跑道单道规格：1000× 96× 120 m
开场实验/敞箱实验（Open－field－test）
研究发现，动物在敞箱中，由于对于新异环境的恐惧，主要在敞箱内的周边部活动，而在中央区活动较少，但是动物的探究本性有必然促使它试图在敞箱的中央区活动（包括活动、饮水或进食），从而产生冲突行为。抗焦虑药物在不改变动物一般运动的情况下可以增加实验动物进入敞箱中中央区的次数和中央区停留时间，或者增加实验动物
细胞转染实验的实验步骤细胞转染
1）转染试剂的准备A.将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。B.震荡后将试剂放在－20摄氏度保存，使用前还需震荡。2）选择合适的混合比例（1：1－1：2/脂质体体积：DNA质量）来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA，震荡
甲基化干扰实验的实验步骤
用DMS处理靶DNA使之局部甲基化（平均每条DNA只发生一个G碱基甲基化作用）同细胞蛋白质提取物一起进行温育，促进使DNA与蛋白质的结合进行凝胶电泳形成两种靶DNA条带：a、 其一没有同蛋白质结合的DNA正常电泳条带b、其二同特异蛋白质结合而呈现滞后的DNA电泳条带将这两种DNA电泳条带分别从凝胶中