方案2反相微型层析柱的制备实验

方案2－反相微型层析柱的制备实验

实验材料用于质谱分析的蛋白质或多肽样品试剂、试剂盒乙腈（HPLC级）甲醇基质溶液三氟乙酸仪器、耗材平头镊子GELoader 移液吸头MALDI-MS板移液吸头Poros R1、Poros R2 或 Oligo R3 层析树脂注射器实验步骤1.将 GELoader 移液吸头的尖端压扁。图 8.32 所

方案3－固定化酶微型层析柱的制备

实验材料用于质谱分析的蛋白质或多肽样品试剂、试剂盒NH4HCO3(50mmol LpH7.8测序级）乙腈仪器、耗材镊子GELoader 移液吸头移液吸头固定化胰酶层析树脂注射器实验步骤1.GELoader 移液吸头的尖端压扁。具体方法参见方案 2(图 8.32)。2.将 100ul 50 mmol/

质谱在蛋白质组学中的应用实验

方案1 蛋白质和多肽 MALDI-MS 分析的一般方法 方案2 反相微型层析柱的制备实验 方案3 固定化酶微型层析柱的制备 方案4 用于蛋白质组分析的微毛细管 HPLC 色谱及 ESI —体化装置的制备和使用 方案5 利用 Nano-LC

方案5－利用－NanoLC－耦联－MS/MS－分析复杂蛋白质混合物实验

实验材料蛋白分部收集物试剂、试剂盒乙腈（HPLC级）乙 腈（5%) 5%甲酸HPLC 溶液甲醇（HPLC级）仪器、耗材酒精灯二元泵或四元泵C18反相层析填料C18固相抽提移液吸头陶瓷划片熔融石英毛细管金线有刻度的玻璃毛细管带压力计的氦气罐高效液相色谱系统激光拉针器Nano-LC 离子源PEEK 微型

酵母实验操作方案（2)

附录一 培养基 LB： Tryptone 10g 1% Yeast Extract 5g 0.5% NaCl 5g 0.5% 【Agar】 15g 1.5%（固体培养基另加） dH2O稀释至1L，高压灭菌 YPD： Yeast Extract 10g 1%

方案15标准条件下肽段的反相－HPLC实验

实验材料通过蛋白质消化得到的肽段混合物试剂、试剂盒乙腈去离子水蛋白质标准品三氟乙酸（TFAHPLC级）仪器、耗材HPLC 层析系统带帽的聚丙烯试管反相层析柱实验步骤展开

抗肽抗体的制备实验2

实验材料抗体试剂、试剂盒磷酸钠缓冲液MBS二甲基酰胺EDTAPBS仪器、耗材分光光度计离心机实验步骤1.  将10 mg 的血蓝蛋白溶于2 ml pH10的硼酸缓冲液中，置于15 ml 的玻璃试管中，温和振摇。2.  加10 μmol 的合成肽。3.  缓慢加入1 ml 的0.3%戊二醛溶液，于室温

酵母菌DNA制备实验2

实验材料酵母试剂、试剂盒TERNA酶乙酸铵无水乙醇仪器、耗材离心机培养箱玻璃培养管实验步骤1.  在18 mm×150 mm 无菌玻璃培养管或17 mm×100 mm 无菌聚丙烯酰胺管中用10 ml YPD培养基过夜培养酵母菌至静止期。2.  培养物室温下在台式离心机上1 200 g 离心5 min

反相高效液相色谱2

方案2 填充 RP-HPLC 毛细管微柱试剂、试剂盒甲醇n-丙醇反相硅胶TFA 乙腈溶剂体系仪器、耗材水浴超声波仪色谱加样器层析柱玻璃料末端接口环氧树脂流动池正向光学扫描检测器加热枪加样器液相色谱柱填充泵微柱聚丙烯离心管聚硅酸盐管蓝宝石切刀信号数据收集装置硅胶隔膜Teflon接头UV检测器实验步骤一

抗体蛋白A或蛋白G微珠层析柱的制备

蛋白A或蛋白G微珠-抗体层析柱是免疫亲和层析技术中最常用的微珠基质之一。此类层析柱容易制备，由于抗体分子是通过Fc段与微珠基质结合，抗原结合片段（Fab）可与抗原最大限度地发生作用。以下介绍的方法可用于蛋白质抗原的纯化，但类似的方案也适用于任何其他抗原。 抗体可直接与蛋白A或蛋白G结合。根据抗

肝素Sepharose－CL2B－的制备实验

试剂、试剂盒SepharoseCL-2B乙腈溴化氰甘氨酸NaOH肝素Na2CO3NaHCO3盐酸乙醇胺NaAcNaCl尿素NaCl3Tris-HClEDTA叠氮钠实验步骤材料SepharoseCL-2B(PharmaciaBiotech,Inc.)乙腈溴化氰（CNBr)(AldrichChemica

单克隆抗体上清的制备实验2

实验材料抗体试剂、试剂盒PBS仪器、耗材离心机离心管实验步骤1.  同备择方案1中大规模制备MAb上清的步骤1~4，但等细胞长到合适的密度时就应收获细胞，或者是在细胞生长的平台期收获。 2.  将细胞倒入无菌的250 ml 锥形离心管中，于4℃ 250 g 离心15 min，弃上清。 3.  置细胞

肝素Sepharose－CL2B－的制备实验

试剂、试剂盒 SepharoseCL-2B乙腈溴化氰甘氨酸NaOH肝素Na2CO3NaHCO3盐酸乙醇胺NaAcNaCl 尿素NaCl3Tris-HClEDTA叠氮钠实验步骤 材料SepharoseCL-2B(PharmaciaBiotech,Inc.)乙腈溴化氰（CNBr)(AldrichChem

肝素Sepharose－CL2B－的制备实验

肝素-Sepharose CL-2B 的制备实验             试剂、试剂盒 SepharoseCL-2B 乙腈

用于表达分析的－mRNA－的制备实验——备择方案

cDNA 和体外转录产物的固相可逆固定（SPRI）纯化实验方法原理用基于磁珠方法纯化 cDNA 和体外转录产物避免了纯化过程有机溶剂的使用和离心步骤。这个方案与基本方案中的纯化方法相当（步骤 10～14 或者步骤 17～22）。实验材料待纯化样品：cDNA或体外转录的 RNA试剂、试剂盒羧基端包埋的

用于表达分析的－mRNA－的制备实验——基本方案

同时检测包含成百上千种基因的 RNA 水平，从而构建一个详细的基因表达谱是分子生物学新的一项激动人心的本领。这是通过将 mRNA 定量扩增并用生物素标记再与 DNA 芯片杂交实现的，芯片上预先固定有与目的 mRNA 互补的寡核苷酸序列。来源：《精编分子生物学实验指南 第五版 第二十一章》用于表达监测

染色体CBG标本制备实验——基本方案

实验方法原理异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的，因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近，或在染色体臂上呈现“团块”，这些染色质主要由C显带技术呈现，故称为C带。CBG即C带、Ba（OH）2、Giemsa的简写。C带的根本特征是选择性地从染色体臂抽取DNA，但在C带区有很强抗性，仍保留大部分

蛋白质组实验全套流程方案2

聚丙烯酰胺凝胶的配制表1 配制Tris-甘氨酸SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液溶液成分不同体积（ml）凝胶液中各成分所需体积（ml）5101520253040506%   水2.65.37.910.613.215.921.226.5   30%丙烯酰胺溶液123456810   1.

实验室检验检测设备层析柱

层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外, 直径加大,洗脱液体体积增大

抗原的制备2

　2．核酸的分离纯化　　从细胞中提取核酸后，仍混杂着蛋白质、多糖和各种大小分子核酸同类物。除去这些“杂质”的过程，也就是核酸提纯过程。在核酸的分离纯化时，为防止核酸大分子的变性降解，必须在0～4℃的低温条件下操作。核酸酶的水解作用，是过去制备具有活性核酸大分子的严重障碍，现普遍采用加入去污剂或加入E

chrispand:高压反相制备工艺旋光浩儿

微型水质多参数在线监测应用方案

一．产品概述云传物联微型水质多参数在线监测站采用岸基方式，以小型无线水质监测终端为核心元素，布置在河流、水库、湖泊、饮用水源的岸边。监测站采用移动通讯为传输媒介，以大屏幕显示器和服务器为数据处理和监控中心，组成一个综合性的水环境自动监测网络系统，达到实时在线监测水质多参数的目的。监测站由检测传感器组

用SepPak－C18柱层析法纯化放射性标记的寡核苷酸实验

本方案介绍的是利用寡核苷酸对于硅胶反相亲和的特性，将放射性标记的寡核苷酸与未掺入的放射性标记物分离的方法，本方案的方法只可用于纯化 5'端放射性标记或非标记的含磷酸基团的寡核苷酸，而方案 1 所介绍的方法多用于 5'末端为游离羟基的寡核苷酸。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）上册

方案3－蛋白质还原和S羧甲基化：微量方法

实验材料纯化的蛋白质样品试剂、试剂盒乙腈碘乙酸正丙醇还原缓冲液储存液仪器、耗材台式离心机HPLC 系统冷冻干燥离心机聚丙烯小管水浴或温箱实验步骤一、样品还原1.利用冷冻干燥离心机蒸发纯化的蛋白质样品溶液（含 0.01%~0.02% Tween-20)，直到少于 10ul。2.加入 150ul 储存液

白细胞介素2的制备及鉴定实验

实验概要本实验制备了白细胞介素2(IL2)，并进行了鉴定实验。IL2是Th细胞受有丝分裂原或特异性抗原刺激后，并在白细胞介素1的辅助下，产生的一种可溶性糖蛋白。IL2是体内重要的广谱免疫增强因子，临床上常用于治疗免疫缺陷病及肿瘤等。实验步骤1. 制备粗制IL2无菌采血，肝素抗凝，用RPMI1640按

细胞和亚细胞提取物的制备实验2

方案2 用于免疫沉淀的培养细胞的裂解实验实验方法原理培养的动物细胞一般使用温和去垢剂来裂解。如果低浓度的去垢剂就能引起细胞的充分裂解（如 l%NP-40 或 l%Triton X-100)，那么这对目标蛋白的影响可能比方案 1 中所讨论的匀浆方法更温和。去垢剂的选择必须根据免疫沉淀所用的抗体的识别表

溶菌酶（lysozyme）的制备及其性质实验原理和操作(2)

2.鸡蛋清粗分离 按过滤好的蛋清量边缓慢搅拌边加入等体积的去离子水，均匀后在不断搅拌下用1mol/L HCl调pH值至7左右，用脱脂棉过滤收滤液。 3.D152大孔弱酸性阳离子交换树脂层析 ⑴ D152树脂处理：将D152树脂先用蒸馏水洗去杂物，滤出，用1mol/L NaOH搅拌浸泡并搅拌4～8小时

反相高效液相层析实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 TFA乙腈盐酸胍仪器、耗材 层析柱HPLC进样器实验步骤 1.  用经脱气的HPLC级水洗去反相柱的有机溶剂，梯度从100%有机溶剂到100%水，流速1 ml/min，持续15 min 以上。 2.  以100%的TFA/乙腈缓冲液平衡柱子至柱压和光吸收值达到恒定。用1

反相高效液相层析实验

多肽和蛋白质的分离             实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒

水稻叶片和根蛋白质的纳升级二维液相色谱串联...（一）

水稻叶片和根蛋白质的纳升级二维液相色谱串联质谱实验实验材料 反相装填材料试剂、试剂盒 缓冲液HPLC 级乙腈HPLC 级甲醇氯化钙溶液碳酸氢铵溶液仪器、耗材 离子讲串联质谱仪实验步骤 3.1 叶片和根组织的取材以及蛋白质沉淀( 1 ) 从植物的中部切取未衰老的绿色叶片，立即放入自封塑料袋中冷冻。如果