二氢硫辛酰胺乙酰基转移酶实验——Stopped实验
实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HClCoA乙酰磷酸磷酸转乙酰酶DL-二氢硫辛酰胺HCl羟胺FeCl3 试剂实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品30 ℃ 培养 15 min，加入 0.1 ml 1 mol/L HCl 停止，沸水浴 5 min。而后 0.4 ml 的测定用量溶于 0.2 ml 2 mol/L 羟胺，并且室温下持续 10 min 后加入0.6 ml FeCl3 试剂。离心 5 min后测量 546 nm 吸收值。展开 注意事项其他试剂：0.1 mol/L Tris-HCl，pH 7.60.01 mol/L CoA（游离酸，Mr＝767.5，CoA·Li3，Mr＝785.4；23 mg 溶于 3 ml 水中）1 mol/L 乙酰磷酸（LiK 盐，Mr＝184.1；1.84 mg 溶于 10 ml 水中）磷酸转乙酰酶（乙酰-CoA：正磷酸转乙酰酶，4000......阅读全文
硫辛酰胺的结构及作用
硫辛酰胺是硫辛酸的一种衍生物，分子式是C8H15NOS2。硫辛酰胺可以与丙酮酸作用，丙酮酸在脱羧后可以得到硫辛酰胺开环的乙酰化产物，在生物体内可起到转移乙酰基的作用。
核磁共振氢谱实验（二）
点击： （or 键入指令 ↙）观察采样通道和氘锁通道，出现下图 2.3：图 2.3 观察采样通道和氘锁通道④：锁场点击： （or 键入指令 LOCK↙）锁定磁场，出现下图 2.4：图 2.4 溶剂选取对话框。选取 CDCL3（氘代氯仿）点击 OK。仪谱进行自动匀场。⑤： 探头调谐 注意事项
丙酮酸脱氢酶（硫辛酰胺）测定实验_氰铁酸为电子受体
实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HClMgCl2丙酮酸二磷酸硫胺K3［Fe（CN）6］仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品30 ℃ 时吸收值于 436 nm 处下降，吸收系数 ε436＝755 l/（mol·cm）。展开 注意
氯霉素乙酰基转移酶（CAT）测定
试剂、试剂盒 Tris-缓冲液 Tris 三硝基甲苯（Triton） CAT 稀释缓冲液CAT 酶标准物闪烁液 聚丙烯闪烁杯仪器、耗材 微量离心管微量离心机实验步骤 一、材料灭菌物品1. D-PBSA2. 多孔培养板：6 孔，35 mm非消毒物品1. Tris-缓冲液：Tris-HCl，0.1mol
丙酮酸脱氢酶（硫辛酰胺）的测定
实验方法原理 实验材料 酶样品试剂、试剂盒 Tris-HClMgCl2丙酮酸二磷酸硫胺K3［Fe（CN）6］仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品30 ℃ 时吸收值于 436 nm 处下降，吸收系数 ε436＝755 l/（mo
什么是有机辅助因子？
有机辅助因子是指双成分酶中相对分子质量较小的有机化合物。它们在酶催化过程中起着传递电子、原子或基团的作用。（1）烟酰胺核苷酸（NAD+和NADP+） 烟酰胺是B族维生素的一员，烟酰胺核苷酸是许多脱氢酶的辅助因子，如乳酸脱氢酶、醇脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶等。起辅助因子作用的烟酰胺核苷酸主要
DLAT基因的结构特点及主要作用
该基因编码多酶丙酮酸脱氢酶复合物（PDC）的组分E2PDC位于线粒体内膜，催化丙酮酸转化为乙酰辅酶A。该基因的蛋白质产物，二氢脂酰胺乙酰转移酶接受丙酮酸氧化脱羧基形成的乙酰基并将其转移到辅酶A。二氢硫酰胺乙酰转移酶是抗线粒体抗体的抗原。这些自身抗体存在于近95%的自身免疫性肝病原发性胆汁性肝硬化（P
蛋白质与二甲基辛二亚酰胺的交联实验
这种方法在各种交联反应中具有代表性，是最古老和最实用的方法之一。它可以使蛋白质间形成分子间桥梁，也可以令不同蛋白质相连。它更是研究蛋白亚基间作用的有效工具。交联程度取决于反应基团间距离和反应速度。通过控制交联反应时间可研究蛋白质聚合步骤，获得空间结构信息，还可获得许多链长不同的同源结合体，用于研究蛋
蛋白质与二甲基辛二亚酰胺的交联实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 蛋白质 二甲亚胺
蛋白质与二甲基辛二亚酰胺的交联实验
这种方法在各种交联反应中具有代表性，是最古老和最实用的方法之一。它可以使蛋白质间形成分子间桥梁，也可以令不同蛋白质相连。它更是研究蛋白亚基间作用的有效工具。交联程度取决于反应基团间距离和反应速度。通过控制交联反应时间可研究蛋白质聚合步骤，获得空间结构信息，还可获得许多链长不同的同源结合体，用于研究蛋
蛋白质与二甲基辛二亚酰胺的交联实验
实验方法原理 实验材料 蛋白质二甲亚胺试剂、试剂盒 三乙醇胺盐酸盐中性缓冲液实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」混合二甲亚胺溶液，终浓度为 1～12 mg/ml，蛋白质溶于 0.2 mol/L pH 8.5 的三乙醇胺盐酸盐中，浓度为 0.4～5 mg/ml，室温放置 3 h。用中性缓冲液透析。
DLAT基因突变与药物因子介绍
该基因编码多酶丙酮酸脱氢酶复合物（PDC）的组分E2PDC位于线粒体内膜，催化丙酮酸转化为乙酰辅酶A。该基因的蛋白质产物，二氢脂酰胺乙酰转移酶接受丙酮酸氧化脱羧基形成的乙酰基并将其转移到辅酶A。二氢硫酰胺乙酰转移酶是抗线粒体抗体的抗原。这些自身抗体存在于近95%的自身免疫性肝病原发性胆汁性肝硬化（P
DLAT基因编码功能及结构描述
该基因编码多酶丙酮酸脱氢酶复合物（PDC）的组分E2PDC位于线粒体内膜，催化丙酮酸转化为乙酰辅酶A。该基因的蛋白质产物，二氢脂酰胺乙酰转移酶接受丙酮酸氧化脱羧基形成的乙酰基并将其转移到辅酶A。二氢硫酰胺乙酰转移酶是抗线粒体抗体的抗原。这些自身抗体存在于近95%的自身免疫性肝病原发性胆汁性肝硬化（P
柠檬酸循环过程第二次脱氢的相关介绍
在α-酮戊二酸脱氢酶系作用下,α-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰-CoA、NADH·H+和CO₂,反应过程完全类似于丙酮酸脱氢酶系催化的氧化脱羧,属于α-氧化脱羧,氧化产生的能量中一部分储存于琥珀酰coa的高能硫酯键中。α-酮戊二酸脱氢酶系也由三个酶(α-酮戊二酸脱羧酶、硫辛酸琥珀酰基转移酶、二氢硫
核磁共振氢谱实验
实验方法原理1、核磁共振的概念具有磁性的原子核，处在某个外加静磁场中，受到特定频率的电磁波的作用，在它的磁能级之间发生的共振跃迁现象，叫核磁共振现象。2、核磁共振的共振条件①：具有磁性的原子核。（γ：某种核的磁旋比）②：外加静磁场（H0）中）。③：一定频率（υ）的射频脉冲。④：公式： 3、 化学位移
血清丙氨酸转移酶（ALT）测定实验
实验方法原理经30min反应后， 加入2、4-二硝基苯肼终止反应，并与反应液中的二种a-酮酸生成相应的2、4 二硝基苯腙、在碱性条件，两种苯腙的吸收光谱曲线有差别，在500－520nm处差异最大， 以等摩尔浓度计算，丙酮酸苯腙的显色温度约为a-酮戊二酸苯腙的3倍. 据此计算出丙酮酸的生成量．实验步骤
血清丙氨酸转移酶（ALT）测定实验
实验方法原理经30min反应后， 加入2、4-二硝基苯肼终止反应，并与反应液中的二种a-酮酸生成相应的2、4 二硝基苯腙、在碱性条件，两种苯腙的吸收光谱曲线有差别，在500－520nm处差异最大， 以等摩尔浓度计算，丙酮酸苯腙的显色温度约为a-酮戊二酸苯腙的3倍. 据此计算出丙酮酸的生成
糖分解代谢异常是什么？
糖分解代谢途径先天代谢异常可有：1.丙酮酸激酶（PK）缺乏病成熟红细胞中不含线粒体，完全依赖糖酵解供能。在糖酵解过程中，丙酮酸激酶催化磷酸烯醇式丙酮酸医学。育网收集整理生成烯醇式丙酮酸，同时产生ATP，用于维持红细胞内外的离子梯度，特别是通过Na+-K+ATP酶维持细胞内外Na+-K+浓度梯度，以维
关于原发性乳酸酸中毒的病因分析
引起儿童原发性乳酸性酸中毒的原因： （一） 丙酮酸脱氢酶复合体缺乏症： 1．E1（丙酮酸脱羧酶）缺陷； 2．E2（二氢硫辛酰乙酰转移酶）缺陷； 3．E3（硫辛酰胺脱氢酶）缺陷； 4．丙酮酸脱羧酶磷酸酶缺陷。 （二）糖异生途径异常： 1．丙酮酸羧化酶缺陷； 2．单纯的丙酮酸羧化酶缺
天冬酰胺酶的测定实验
实验方法原理L-天冬氨酸酰胺水解酶。L-天冬酰胺＋H2O → L-天冬氨酸＋NH3酶的测定是通过确定 Nessler's 试剂释放的氨气来实现的。一个单位的定义：在 37℃、pH 8.6 时，释放每分钟 1 umol NH3 的酶量。实验材料L-天冬氨酸酰胺水解酶试剂、试剂盒Tris-HCl
β内酰胺酶检测的实验原理
酸测量法：青霉素被β-内酶胺酶水解后成青霉素酸，pH值下降到6.8以下，用酚红指示剂，由红(紫)色 (原液：枸橼酸缓冲液pH8.5) →黄色(pH6.8以下)；淀粉-碘测定法：β内酰胺酶破坏β内酰胺环，碘与被打开β内酰胺环结合，使蓝色的淀粉-碘复合物转变成无色。β-内酰胺酶是多种不同类型以β-内
天冬酰胺酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 L-天冬氨酸酰胺水解酶。L-天冬酰胺＋H2O → L-天冬氨酸＋NH3酶的测定是通过确定 Nessler's 试剂释
冰冻切片NADH心肌黄酶活性染色试剂盒使用说明
主要用途冰冻切片NADH心肌黄酶活性染色试剂是一种旨在使用人工电子受体染料二甲基噻唑二苯基四唑嗅蓝（MTT），受到NADH心肌黄酶催化还原，产生不溶性蓝黑色色素沉淀，来分析冰冻组织样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。主要适用于动物组织细胞的心肌黄酶活性定性
维生素与酶的辅助因子的关系
从酶的组成来看，有些酶仅由蛋白质或核糖核酸组成，这种酶称为单成分酶。而有些酶除了蛋白质或核糖核酸以外，还需要有其他非生物大分子成分，这种酶称为双成分酶。蛋白类酶中的纯蛋白质部分称为酶蛋白。核酸类酶中的核糖核酸部分称为酶RNA。其他非生物大分子部分称为酶的辅助因子。双成分酶需要有辅助因子存在才具有催化
酶的辅助因子介绍
从酶的组成来看，有些酶仅由蛋白质或核糖核酸组成，这种酶称为单成分酶。而有些酶除了蛋白质或核糖核酸以外，还需要有其他非生物大分子成分，这种酶称为双成分酶。蛋白类酶中的纯蛋白质部分称为酶蛋白。核酸类酶中的核糖核酸部分称为酶RNA。其他非生物大分子部分称为酶的辅助因子。双成分酶需要有辅助因子存在才具有催化
冰冻切片NADH心肌黄酶活性染色试剂盒使用说明
冰冻切片NADH心肌黄酶活性染色试剂盒产品说明书（中文版） 主要用途 冰冻切片NADH心肌黄酶活性染色试剂是一种旨在使用人工电子受体染料二甲基噻唑二苯基四唑嗅蓝（MTT），受到NADH心肌黄酶催化还原，产生不溶性蓝黑色色素沉淀，来分析冰冻组织样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术
核磁共振氢谱实验（一）
实验方法原理 1、核磁共振的概念具有磁性的原子核，处在某个外加静磁场中，受到特定频率的电磁波的作用，在它的磁能级之间发生的共振跃迁现象，叫核磁共振现象。2、核磁共振的共振条件①：具有磁性的原子核。（γ：某种核的磁旋比）②：外加静磁场（H0）中）。③：一定频率（υ）的射频脉冲。④：公式： 3、 化学位
三羧酸循环的循环过程
乙酰-CoA进入由一连串反应构成的循环体系，被氧化生成H₂O和CO₂。由于这个循环反应开始于乙酰CoA与草酰乙酸(oxaloaceticacid)缩合生成的含有三个羧基的柠檬酸，因此称之为三羧酸循环或柠檬酸循环(citratecycle)。在三羧酸循环中，柠檬酸合成酶催化的反应是关键步骤，草酰乙酸的
柠檬酸循环的循环过程
乙酰-CoA进入由一连串反应构成的循环体系，被氧化生成H₂O和CO₂。由于这个循环反应开始于乙酰CoA与草酰乙酸(oxaloaceticacid)缩合生成的含有三个羧基的柠檬酸，因此称之为三羧酸循环或柠檬酸循环(citratecycle)。在三羧酸循环中，柠檬酸合成酶催化的反应是关键步骤，草酰乙酸的
关于三羧酸循环的循环过程
乙酰-CoA进入由一连串反应构成的循环体系，被氧化生成H₂O和CO₂。由于这个循环反应开始于乙酰CoA与草酰乙酸(oxaloaceticacid)缩合生成的含有三个羧基的柠檬酸，因此称之为三羧酸循环或柠檬酸循环(citratecycle)。在三羧酸循环中，柠檬酸合成酶催化的反应是关键步骤，草酰乙