由NAD+还原反应测定的PDHC总活性实验

实验材料PDHC试剂、试剂盒磷酸钾NAD+二磷酸硫胺MgCl2丙酮酸二硫代苏糖醇辅酶 A仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品37℃ 时,在 340 nm 处吸收值发生变化。NADPH 的吸收系数 ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。展开 注意事项其他试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.60.1 mol/L NAD+(Mr=663.4,游离酸;663 mg 溶于 10 ml 水中)0.01 mol/L 二磷酸硫胺(ThDP,脱竣辅酶,Mr=460.8;46.1 mg 溶于 10 ml 水中)0.1 mol/L MgCl2(MgCl2·6H2O,Mr=203.3;203 mg 溶于 10 ml 水)0.1 mol/L 丙酮酸(丙酮酸钠,Mr=110.0;110 mg 溶于 10 ml 水中)0.1 mol/L 二硫代苏糖醇(......阅读全文

硝酸还原酶活性的测定实验

实验方法原理硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键酶,与作物吸收和利用硝态氮的能力相关。它催化NO3-还原为NO2-的反应:NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O反应产生的NO2-可从组织内渗透到外界溶液中,定时测定一定的反应溶液中NO2-含量的变化情况则可了解此酶的活性大小。NO2-的

维生素B1的生理功能

临床上所用的维生素B1都是化学合成的产品。在细胞内,维生素B1的生物活性形式为硫胺素焦磷酯(thiamine pyrophosphate,TPP),TPP是丙酮酸脱氢酶复合体(pyruvate dehydrogenase complex,PDHC)、α- 酮戊二酸脱氢酶复合体(α-ketogluta

维生素B1的生理功能介绍

  临床上所用的维生素B1都是化学合成的产品。在细胞内,维生素B1的生物活性形式为硫胺素焦磷酯(thiamine pyrophosphate,TPP),TPP是丙酮酸脱氢酶复合体 (pyruvate dehydrogenase complex, PDHC)、α -酮戊二酸脱氢酶复合体 (α-keto

植物总DNA的快速少量抽提实验

CTAB法             实验方法原理 CTAB法:该方法简便、快速,DNA产量高(纯度稍次,适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂,植物材料在CTAB的

双缩脲法血清总蛋白测定实验

实验方法原理 凡分子中含有两个甲酰胺基(-CONH2-)的化合物都能与碱性铜溶液作用,形成紫红色化合物这一反应称双缩脲反应蛋白质分子中有许多肽健(-CONH2-)都能起此反应,而且各种血浆蛋白显色程度基本相同.实验步骤 一、实验操作:按表进行混匀,置25℃30min。(37℃10min)在波长540

植物组织总含水量的测定实验

实验步骤一、烘干称重法1. 取称量瓶3个,依次编号,分别称取空瓶重。2. 取上述相同的植物材料,用打孔器钻取圆片。立即放入称量瓶中(每瓶随机取样放50片),加盖,准确称出被测样品鲜重(如果被测植物是块茎,切成约1㎜ 厚度圆片,准确称取1 g样品测定)。3. 把3瓶称重后的样品放入烘箱100-105℃

COD-氨氮-总磷实验空白的作用

样品空白,作用大了去了,为确保COD氨氮总磷的测定结果准确,空白的作用起到了至关重要的作用。 作用:1、样品空白可以抵消加入测试试剂前由于样品自身存在的色度或浊度而引起的正误差。2、在使用样品空白对测试仪器进行调零后,只有样品与测试试剂发生反应而产生的色度被测定了。由于样品的背景色度和浊度往往各不相

植物组织总含水量的测定实验

实验步骤                                                         一、烘干称重法1. 取称量瓶3个,依次编号,分别称取空瓶重。2. 取上述相同的植物材料,用打孔器钻取圆片。立即放入称量瓶中(每瓶随机取样放50片),加盖,准确称出被测样

双缩脲法血清总蛋白测定实验

实验方法原理凡分子中含有两个甲酰胺基(-CONH2-)的化合物都能与碱性铜溶液作用,形成紫红色化合物这一反应称双缩脲反应蛋白质分子中有许多肽健(-CONH2-)都能起此反应,而且各种血浆蛋白显色程度基本相同.实验步骤一、实验操作:按表进行混匀,置25℃30min。(37℃10min)在波长540nm

植物组织总含水量的测定实验

实验步骤 一、烘干称重法1. 取称量瓶3个,依次编号,分别称取空瓶重。2. 取上述相同的植物材料,用打孔器钻取圆片。立即放入称量瓶中(每瓶随机取样放50片),加盖,准确称出被测样品鲜重(如果被测植物是块茎,切成约1㎜ 厚度圆片,准确称取1 g样品测定)。3. 把3瓶称重后的样品放入烘箱100-105

纯化RNA实验——从组织中纯化总RNA

实验材料组织试剂、试剂盒RNA 抽提缓冲液氯仿实验步骤1. 从动物取下组织,直接进行第 2 步或在液氮中快速冷冻新鲜解剖的组织。冷冻后的组织可以贮存在 -70℃。2. 组织(0.05~0.3 g)在 2.0 ml RNA 抽提缓冲液中匀浆。3. 每管加 200 μl 氯仿,混合均匀,冰浴 15 分钟

实验用水对总氮检测结果的影响

方案优势       总氮检测中不能只以标准曲线、空白值和标准样品测定值作为受控标准,要考虑实验用水中硝酸根离子的影响。               采用标准       相关标准           方法/原理/步骤         实验试剂  过硫酸钾

总RNA提取实验——氯化锂提取法

实验方法原理用高浓度尿素变性蛋白并抑制RNA 酶,用氯化锂选择沉淀RNA ,其特别适合于从大量样品中提取少量组织RNA ,具有快速简洁的长处,但也存在少量DNA的污染及RNA 得率不高,小RNA 片断丢失的缺陷。实验材料微生物动物细胞植物组织试剂、试剂盒氯化锂尿素Tris-HCLEDTASDS仪器、

总磷分析仪测定实验的试剂

  试剂  1、硫酸(H2SO4,A.R)ρ=1.84  2、(1+1)硫酸:取(4.1)硫酸与水等体积混合  3、过硫酸钾,50g/L溶液:将5g过硫酸钾(K2S2O8,A.R)溶于水并稀释至100ml。抗坏血酸,100g/L溶液:溶解10g抗坏血酸(C6H8O6,C.P.)于水中,并稀释至100

植物总DNA的快速少量抽提实验

实验方法原理 CTAB法:该方法简便、快速,DNA产量高(纯度稍次,适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂,植物材料在CTAB的处理下,结合65 °C水浴使细胞裂解、蛋白质变性、DNA被释放出来。CTAB与核酸形成复合物,此复合物在高盐(>0.7 mM)浓度下可溶,并稳

COD-氨氮-总磷实验空白的作用

 样品空白,作用大了去了,为确保COD氨氮总磷的测定结果准确,空白的作用起到了至关重要的作用。 作用:1、样品空白可以抵消加入测试试剂前由于样品自身存在的色度或浊度而引起的正误差。2、在使用样品空白对测试仪器进行调零后,只有样品与测试试剂发生反应而产生的色度被测定了。由于样品的背景色度和浊度往往各不

137个国家重点实验室评估由学会承担

  日前,中国科协所属学会有序承接政府转移职能试点工作总结电视电话会在北京召开。记者在会上了解到,目前中国化学会等全国学会承担了我国137个国家重点实验室评估工作。   据介绍,学会承接政府转移职能首轮试点2014年6月启动,扩大试点2015年5月实施。共有69家全国学会承接了21个政府部门转移委托

137个国家重点实验室评估由学会承担

   科技日报讯 (记者付丽丽)日前,中国科协所属学会有序承接政府转移职能试点工作总结电视电话会在北京召开。记者在会上了解到,目前中国化学会等全国学会承担了我国137个国家重点实验室评估工作。  据介绍,学会承接政府转移职能首轮试点2014年6月启动,扩大试点2015年5月实施。共有69家全国学会承

[实验步骤]-由全血直接分选-CD3+-T-细胞

Fab-TACS® Gravity column 细胞分选重力柱应用实例Fab-TACS 技术简介Fabs-TACS 无痕亲和细胞分选技术(traceless affinity cell selection, Fab-TACS),以 Fab 片段为基础,基于 IBA Lifesciences 独家的

细胞因子生物学活性检测实验-古朵实验√

白细胞介素1是一种重要的细胞因子,主要由单核-巨噬细胞产生,IL-1不仅对多种免疫活性细胞有重要的调节功能,而且与发热、炎症发生以及某些疾病的病理变化有关。目前对IL-1产生水平的检测主要应用生物学活性检测的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺细胞检测IL-1生物学活性 小鼠胸腺细胞在丝裂原刺激下表达IL

血清补体检测之总补体溶血活性测定​与血清C3测定

  补体是血清中具有酶活性的一组不耐热的球蛋白,是抗体发挥溶细胞作用的必要补充条件。它由参与补体激活经典途径的9种成分C1(C1q、C1r、C1s)~C9、旁路途径的3种成分及其衍生物、B、D、P和H等因子组成。补体广泛参与机体灭活病原体的免疫反应,也参与破坏自身组织或细胞的免疫损伤。  总补体溶血

溶血、黄疸对酶活性测定的影响实验

实验方法原理L-丙氨酸+α-酮戊二酸ALT丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+→L-乳酸+NAD+实验材料黄疸血清试剂、试剂盒ALT/GPT试剂仪器、耗材半自动生化分析仪试管加样器实验步骤1、稀释试剂.2、开机预温达37度.3、选取测定程序.4、测试:5、结果分析:

免疫学实验B因子溶血活性介绍

  B因子溶血活性介绍:   补体激活的旁路途径(alternative pathway,AP)激活时,补体前段成分(C1,4,2)不活化。参与AP激活的除C3-C9外,尚有P、D、B等因子。   B因子溶血活性正常值:    83%-121%。   B因子溶血活性临床意义:   补体旁路

谷丙转氨酶的活性测定实验_显色法

实验方法原理血清谷丙转氨酶(SGPT)能催化丙氨酸与酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸,丙酮酸在酸性条件下与2,4-二硝基苯肼可缩合成丙酮酸二硝基苯腙,该腙在碱性条件下呈现出橙红色,呈色深浅符合比尔定律,在520 nm处有最大吸收。SGPT 在肝脏中含量最高,由于肝细胞损害,该酶逸出血液,可使 SGPT 含

藻类多糖的结构与生物活性研究实验

实验材料 大型藻类试剂、试剂盒 NaNO;Na2HPO4•12H2O;EDTA仪器、耗材 偏光光度计;高效液相色谱仪实验步骤 (1)多糖的纯化是将离心分离出的1000 ml培养液,用40℃真空浓缩到50 ml,再移入到透析袋内于4 ℃蒸馏水中透析三天。早晚更换一次蒸馏水,将透析袋内液体倒入烧

雷帕霉素生物活性及实验方法

雷帕霉素是一种特异性的mTOR抑制剂,IC50为0.1nMIn Vitro:雷帕霉素抑制HEK293细胞内源性mTOR活性,IC50为0.1 nM,比iRap和AP21967更有效,IC50分别为5 nM和10 nM [1]。 雷帕霉素通过诱导自噬发挥其对恶性神经胶质瘤细胞的抗肿瘤作用,并且

溶血、黄疸对酶活性测定的影响实验

实验方法原理 L-丙氨酸+α-酮戊二酸ALT丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+→L-乳酸+NAD+实验材料 黄疸血清试剂、试剂盒 ALT/GPT试剂仪器、耗材 半自动生化分析仪试管 加样器实验步骤 1、稀释试剂.2、开机预温达37度.3、选取测定程序.4、测试:5、结果分析:

藻类多糖的结构与生物活性研究实验

高效液相层析(HPLC)法             实验材料 大型藻类 试剂、试剂盒

免疫学实验抗凝血活性试验介绍

抗凝血活性试验介绍:  实验室研究证明,已致敏的淋巴细胞再接触特异性抗原所产生的淋巴因子,可刺激巨噬细胞产生组织因子,激发外源性凝血作用,促进局部纤维素沉着,导致凝血活性增高。A组溶血性链球菌特异抗原可通过淋巴细胞作用使外周血和心肌细胞的促凝血活性增高(procoagulant activity,P

免疫学实验自然杀伤细胞活性介绍

  自然杀伤细胞活性介绍:  自然杀伤细胞又称NK细胞,其主要的功能特征是对肿瘤细胞及病毒感染细胞具有非特异性的杀伤力,这种杀伤效应不依赖抗体与补体,体外检测NK细胞活性是诊断NK细胞功能及其与某些疾病关系的一个重要手段。  自然杀伤细胞活性正常值:  自然释放率要求100∶1,自然杀伤率不呈对数增