方案27.8原位杂交中的放射自显影技术

实验方法原理将同位素标记探针与固定于显微镜载玻片上的细胞进行杂交,然后通过放射自显影将杂交位点显影。实验材料糖原琼脂糖二硫苏糖醇二硫苏糖醇试剂、试剂盒焦碳酸二乙酯DEPC-水酚-氯仿-异戊醇乙酸钠无水乙醇层析柱流动相缓冲液苯酚氯仿-界戊醇闪烁液组织洗涤液NaCl-DEPCEDTA蛋白酶K缓冲液蛋白酶K储存液甲醛三乙醇胺冰乙酸DTT杂交液明胶RNaseA储存液RNase缓冲液β-巯基乙醇50%甲醛SSC仪器、耗材微量离心管微量离心机RNA标记试剂盒G50葡聚糖凝胶层析柱实验步骤RNA 的制备制备探针的所有溶液以及杂交后的洗脱液都必须无 RNA 酶。溶液需经 DEPC 处理,于 121°C 高压灭菌 20 min。虽然这一过程可以清除绝大部分 RNA 酶,但由于天然 RNA 酶存在广泛,即使小心操作,也不能保证玻璃器皿和吸头上残留的 RNA 酶被彻底清除。因此进行 RNA 操作时,需要单独使用一套吸头,用前以 DEPC 水常规过夜浸......阅读全文

方案27.8-原位杂交中的放射自显影技术

            实验方法原理 将同位素标记探针与固定于显微镜载玻片上的细胞进行杂交,然后通过放射自显影将杂交位点显影。 实验材料 糖原 琼脂糖

方案27.8-原位杂交中的放射自显影技术

实验方法原理将同位素标记探针与固定于显微镜载玻片上的细胞进行杂交,然后通过放射自显影将杂交位点显影。实验材料糖原琼脂糖二硫苏糖醇二硫苏糖醇试剂、试剂盒焦碳酸二乙酯DEPC-水酚-氯仿-异戊醇乙酸钠无水乙醇层析柱流动相缓冲液苯酚氯仿-界戊醇闪烁液组织洗涤液NaCl-DEPCEDTA蛋白酶K缓冲液蛋白酶

原位杂交中的放射自显影技术

            实验方法原理 将同位素标记探针与固定于显微镜载玻片上的细胞进行杂交,然后通过放射自显影将杂交位点显影。 实验材料 糖原 琼脂糖

方案27.2-放射自显影术

方案27.2 放射自显影术             实验材料 DPX 试剂、试剂盒

放射自显影原位杂交玻片的复染和压片固定实验

实验方法原理 实验材料 水化并显影的原位杂交玻片试剂、试剂盒 吉姆萨染色液(Fisher)710 mmol L磷酸钠缓冲液pH 6.8 (500 mmol L原液按1:50稀释)50%、70%、95% 和100% 乙醇、二甲苯封片介质为Permount (Fisher)或 Gelvatol

放射自显影原位杂交玻片的复染和压片固定实验

姆萨 (Giemsa) 染色 苏木精/伊红染色 甲苯胺蓝染色             实验方法原理 实验材料

放射自显影技术的概述

  放射自显影技术是利用放射性同位素的电离辐射对乳胶(含AgBr或AgCl)的感光作用,对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究的一种细胞化学技术。放射自显影技术(radioautography;autoradiography)用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更

放射自显影原位杂交玻片的压片固定实验_姆萨-染色

实验材料水化并显影的原位杂交玻片试剂、试剂盒吉姆萨染色液(Fisher)710 mmol L磷酸钠缓冲液pH 6.8 (500 mmol L原液按1:50稀释)50%、70%、95% 和100% 乙醇、二甲苯封片介质为Permount (Fisher)或 Gelvatol (现称 Airvol来自A

放射自显影原位杂交玻片的压片固定_苏木精/伊红染色

实验材料水化并显影的原位杂交玻片试剂、试剂盒苏木精染料(用乙酸处理的Harris改进苏木精 无汞)0. 1%氢氧化铵伊红染料仪器、耗材玻璃染色盘实验步骤1) 将显影过的载玻片(在玻片架中)放入盛有水的染色盘中。2) 在染色盘中准备以下各组液体:1个盘: 苏木精染液2个盘: 水1个盘: 0.1%氢氧化

放射自显影[术]的技术特点

中文名称放射自显影[术]英文名称autoradiography;radioautography定  义利用放射性同位素所产生的电离辐射对感光乳胶的氯化银晶体而产生潜影,再经过显影定影处理,把感光的氯化银还原成黑色的银颗粒,即可根据这些银颗粒的部位和数量分析出标本中放射性示踪物的分布,以进行定位和定量

放射自显影技术的工作原理

  其原理是将放射性同位素(如14C和3H)标记的化合物导入生物体内,经过一段时间后,将标本制成切片或涂片,涂上卤化银乳胶,经一定时间的放射性曝光,组织中的放射性即可使乳胶感光。然后经过显影、定影处理显示还原的黑色银颗粒,即可得知标本中标记物的准确位置和数量,放射自显影的切片还可再用染料染色,这样便

放射自显影原位杂交玻片的压片固定实验_甲苯胺蓝染色

实验材料水化并显影的原位杂交玻片试剂、试剂盒甲苯胺蓝染液仪器、耗材染色盘实验步骤1) 用水稀释甲苯胺蓝染液。按所期望染色程度,凭经验决定稀释度,由1:100稀释 起始。2) 玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡,然后在水中浸泡数次。按需求进行压片固定。

原位杂交技术

导语我们常说,科学家也是艺术家,在明确真理探索科学的道路上,往往会创造出很多极具美感的艺术作品。所以今天小编为大家介绍的就是能做出美美图的新技能。先欣赏一下美美的实验结果图~---Olson, B. D. and Downes, G. B. ---in situ Hybridization of w

荧光原位杂交实验——基本方案

实验材料样品试剂、试剂盒DNA探针非同位素甲酰胺杂交混合液甲酰胺Triton X-100SSC仪器、耗材相差显微镜盖玻片水浴锅加湿盒滤光片荧光显微镜实验步骤1a.  石蜡切片或细胞的杂交:按石蜡切片或细胞的原位杂交实验的基本方案步骤1~7,对载玻片进行脱蜡、水化、 封闭和脱水处理。将标本晾干(或在干

放射自显影的技术方法的研究方法

放射自显影已有100多年的历史,但就应用广度和解决问题的深度来说,近20年来发展尤为迅速。放射自显影可以分为整体水平、组织水平、细胞水平和分子水平4个不同层次。放射自显影突出的优点是:结果直观,记录逼真,避免在解释时带有个人的偏见;放射自显影可把形态、机能和代谢统一起来,以研究生物体内的动态变化过程

原位杂交的技术应用

①细胞特异性mRNA转录的定位,可用于基因图谱,基因表达和基因组进化的研究;②感染组织中病毒DNA/RNA的检测和定位,如EB病毒mRNA、人类乳头状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测;③癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测;④基因在染色体上的定位;⑤检测染色体的变化,如染色体数

原位杂交的技术应用

①细胞特异性mRNA转录的定位,可用于基因图谱,基因表达和基因组进化的研究;②感染组织中病毒DNA/RNA的检测和定位,如EB病毒mRNA、人类乳头状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测;③癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测;④基因在染色体上的定位;⑤检测染色体的变化,如染色体数

荧光原位杂交实验——荧光原位杂交技术

荧光原位杂交可应用于:(1)动植物基因组结构研究;(2)染色体精细结构变异分析;(3)病毒感染分析;(4)肿瘤遗传学和基因组进化研究。实验方法原理用已知的标记单链核酸为探针,按照碱基互补的原则,与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸。由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵

荧光原位杂交技术的技术原理

荧光原位杂交技术技术原理是将荧光素直接或间接标记的核酸探针[或生物素、地高辛、dinit rophenyl(I)NP)、aminoacetylAAFfluorine(AAF)等标记的核酸探针与待测样本中的核酸序列按照碱基互补配对的原则进行杂交,经洗涤后直接在荧光显微镜下观察。 荧光原位杂交技术是一种

放射自显影技术的显影与定影原理

对于由一般的照相过程得到的影象,需要进行显影和定影才能得到固定的影象。显影本质上是一个氧化还原过程。显影从显影中心开始,首先显影剂(还原剂)放出电子,自身氧化。然后,溴化银晶体中的银离子(氧化剂)接受电子,还原为银原子。实际过程大体是,澳化银晶体首先吸附溴离子,形成负电层。在负电层外吸附钾正离子,又

原位杂交技术介绍

原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。另有荧光原位杂交。

原位杂交技术原理

  荧光,又作“萤光”,是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射,吸收光能后进入激发态,并且立即退激发并发出比入射光的的波长长的出射光(通常波长在可见光波段);而且一旦停止入射光,发光现象也随之立即消失。具有这种性质的出射光就被称之为荧光。  在日常

荧光原位杂交技术的技术优势

与其他原位杂交技术相比,荧光原位杂交具有很多优点,主要体现在:①FISH不需要放射性同位素标记,更经济安全。②FISH的实验周期短,探针稳定性高,特异性好,定位准确,能迅速得到结果。③FISH通过多次免疫化学反应,使杂交信号增强,灵敏度提高,其灵敏度与放射性探针相当。④多色FISH通过在同一个核中显

荧光原位杂交的技术优点

与其他原位杂交技术相比,荧光原位杂交具有很多优点,主要体现在:①FISH不需要放射性同位素标记,更经济安全。②FISH的实验周期短,探针稳定性高,特异性好,定位准确,能迅速得到结果。③FISH通过多次免疫化学反应,使杂交信号增强,灵敏度提高,其灵敏度与放射性探针相当。④多色FISH通过在同一个核中显

荧光原位杂交的技术特点

荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是20世纪80年代末在放射性原位杂交技术基础上发展起来的一种非放射性分子生物学和细胞遗传学结合的新技术,是以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。

​-荧光原位杂交的技术原理

荧光原位杂交技术技术原理是将荧光素直接或间接标记的核酸探针[或生物素、地高辛、dinit rophenyl(I)NP)、aminoacetylAAFfluorine(AAF)等标记的核酸探针与待测样本中的核酸序列按照碱基互补配对的原则进行杂交,经洗涤后直接在荧光显微镜下观察。 荧光原位杂交技术是一种

荧光原位杂交技术的问世

  荧光标记技术(FISH)指利用一些能发射荧光的物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上,利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。  上述试题的技术是在原荧光标记技术基础上发展起来的荧光原位杂交技术。  1969年,Gall和Pardue等首次将同位素探针用于原位杂交实验,获得成功。  1

荧光原位杂交的技术应用

(一)基因(或DNA片段)染色体定位和基因图谱绘制目前应用的基因定位的主要方法是FISH。分离到的DNA序列直接通过FISH,同时采用多种颜色荧光素的标记探针,结合中期染色体和间期细胞方面的信息,可快速确定一-系列DNA序列之间的相互次序和距离,完成基因制图。用不同颜色炎光索标记2个不同的DNA链,

荧光原位杂交的技术原理

荧光原位杂交技术技术原理是将荧光素直接或间接标记的核酸探针[或生物素、地高辛、dinit rophenyl(I)NP)、aminoacetylAAFfluorine(AAF)等标记的核酸探针与待测样本中的核酸序列按照碱基互补配对的原则进行杂交,经洗涤后直接在荧光显微镜下观察。荧光原位杂交技术是一种重

荧光原位杂交的技术应用

作为一种可视化特定DNA序列的分子细胞遗传学技术,荧光原位杂交技术目前被广泛应用于染色体畸变。如非整倍体、染色体重组。其基本流程包括探针标记、探针的变性、样本变性、杂交和荧光信号采集。荧光原位杂交技术在基因定性、定量,整合、表达等方面的研究中颇具优势,目前已经被广泛应用于遗传病诊断、病毒感染分析、产