蛋白酶的测定实验——偶氮酪蛋白测定法

实验方法原理酪蛋白的敏感性鉴定可以通过这个实验得到很大程度的改善。含氮的基团与酪蛋白的共价键被蛋白水解时切断,用 TCA 上清液测定它们的颜色变化。实验材料蛋白酶溶液试剂、试剂盒磷酸钾偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)三氯乙酸仪器、耗材分光光度计实验步骤0.5 ml 偶氮酪蛋白溶液0.2 ml 蛋白酶溶液25℃ 时培养 30 min 后,加 0.2 ml 10% 三氯乙酸停止反应,离心 5 min。于 340 nm 处测上清液的吸收值,1U 是指 1 h 内,能使吸收值变化 1 的酶量。注意事项其他试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 8.00.2% 偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)溶于 0.1 mol/L 磷酸钾溶液,pH 8.010% 三氯乙酸(TCA,质量浓度)展......阅读全文

浊度测定法的定义

比浊法又称浊度测定法。为测量透过悬浮质点介质的光强度来确定悬浮物质浓度的方法,这是一种光散射测量技术。

口蹄疫疫苗的测定法

  取1瓶疫苗恢复至室温,在3个1.5ml离心管中分别精确加入100μl疫苗和900μl丙酮,充分混匀,室温放置10分钟,在4℃条件下,以15000g离心15分钟。吸弃液相,沉淀物用400μl丙酮洗涤2次,室温干燥约15分钟,加50μl去离子水复溶后,按附注进行检验。每毫升疫苗总蛋白含量应不高于50

水分测定法的分类

  水分测定方法—般可分为两大类,即物理分析这和化学分析法。目前市场上主要有露点水分仪、红外水分仪、库仑水分仪、卡尔·费休水分测定仪、微波水分仪,以及一些水分仪。这些仪器测定方法操作简便、灵敏度高、再现性好,并能连续测定,自动显示数据。     露点水分测定仪操作简便,仪器不复杂,所测结果一般令人满

浊度测定法的原理

是利用透射光强度(I)与入射光强度(Io)的比值I/Io,或用 散射光强度(Is)与入射光强度(Io)的比值 Is/Io,测定悬浊物质含量的方法。

涂料粘度的测定法

  涂料的粘度又叫涂料的稠度,是指流体本身存在粘着力而产生流体内部阻碍其相对流动的一种特性。  这项指标主要控制涂料的稠度,合乎使用要求,其直接影响施工性能、漆膜的流平性、流挂性。通过测定粘度,可以观察涂料贮存一段时间后的聚合度,按照不同施工要求,用适合的稀释剂调整粘度,以达到刷涂、有气、无气喷涂所

实验室水分活度值的测定法其它测定水分方法

1、化学干燥法化学干燥法就是将某种对于水蒸汽具有强烈吸附作用的化学药品与含水样品同装入一个干燥器(玻璃或真空干燥器),通过等温扩散及吸附作用而使样品达到干燥恒重,然后根据干燥前后样品的失重即可计算出其水分含量,此法在室温下干燥,需要较长时间,几天、几十天甚至几个月。干燥剂有五氧化二磷、氧化钡、高氯酸

实验室水分测定方法卡尔费休测定法的操作步骤

步骤对于固体样,如糖果必须预先粉碎,称0.30~0.50g样于称样瓶中取50ml甲醇→于反应器中,所加甲醇要能淹没电极,用KF试剂滴定50ml甲醇中痕量水→滴至指针与标定时相当并且保持1min不变时→打开加料口→将称好的试样立即加入→塞上皮塞→搅拌→用KF试剂滴至终点保持1min不变→记录计算:水分

生化检测项目唾液富酪蛋白介绍

唾液富酪蛋白介绍:  富酪蛋白是唾液中一族富含酪氨酸和脯氨酸的磷酸蛋白,其分子量为5.38kD,等电点为pH4.22。唾液富酪蛋白正常值:  2-6μmol/L。唾液富酪蛋白临床意义:  富酪蛋白能够维持唾液为一种过饱和的钙和磷酸盐溶液,这种唾液可防止釉质脱矿,刺激脱矿的牙釉质再矿化,使新萌出的牙齿

简述酪蛋白膦酸肽应用范围

  酪蛋白膦酸肽不仅可促进钙的吸收,对铁、锌的吸收利用也有良好的促进效果。因此开发添加CPP的营养食品和保健品,能真正达到有效补充人体缺乏的矿物质的目的,满足人们的营养需求,必能产生巨大的经济效益和社会效益。  酪蛋白磷酸肽(Casein Phosphopeptides,简称CPP),来源于天然优质

蛋白酶的按蛋白酶水解蛋白质的方式分类

按蛋白酶水解蛋白质的方式可分为以下几种。(1)切开蛋白质分子内部肽键,生成相对分子质量较小的多肽类,这类酶一般叫内肽酶;(2)切开蛋白质或多肽分子氨基或羧基末端的肽键,而游离出氨基酸,这类酶叫外肽酶。作用于氨基末端的称为氨肽酶,作用于羧基末端的称为羧肽酶;(3)水解蛋白质或多肽的脂键;(4)水解蛋白

生物酶在食品行业应用蛋白酶的活力测定

  蛋白酶的种类繁多,不同的蛋白酶的性质和催化反应条件各不相同,无法规定一个统一的测定方法,目前使用最多的有福林—酚法、紫外分光光度法、甲醛滴定法、DHT-酪蛋白法。  1、福林酚法  蛋白酶催化蛋白质水解成氨基酸,其中含酚基的氨基酸(色氨酸、酪氨酸)与福林试剂反应,生成蓝色复合物,蓝色深浅与含酚基

蛋白酶的应用

蛋白酶是最重要的一种工业酶制剂,能催化蛋白质和多肽水解,广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。在干酪生产、肉类嫩化和植物蛋白改性中都大量的使用蛋白酶。此外,胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶和氨肽酶都是人体消化道中的蛋白酶,在它们的作用下,人体摄入的蛋白质被水解成小分子肽和氨基酸。目前在焙烤工业

蛋白酶的分布

蛋白酶广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。微生物蛋白酶,主要由霉菌、细菌,其次由酵母、放线菌生产。

蛋白酶的用途

1 用于食品发酵工业酱油的酿造就是利用米曲霉分泌的蛋白酶分解原料中的蛋白质,使其降解为胨、多肽、氨基酸,生成色、香、味于一体的产品。也有直接用蛋白酶制剂酿造酱油,但风味欠佳。啤酒酿造中,当麦芽糖用量减少辅料增加时,常需要补充蛋白酶,使蛋白质充分降解,霉菌和细菌蛋白酶适合这一用途。微生物酸性蛋白酶还是

蛋白酶的用途

1 用于食品发酵工业酱油的酿造就是利用米曲霉分泌的蛋白酶分解原料中的蛋白质,使其降解为胨、多肽、氨基酸,生成色、香、味于一体的产品。也有直接用蛋白酶制剂酿造酱油,但风味欠佳。啤酒酿造中,当麦芽糖用量减少辅料增加时,常需要补充蛋白酶,使蛋白质充分降解,霉菌和细菌蛋白酶适合这一用途。微生物酸性蛋白酶还是

蛋白酶的来源

蛋白酶广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。微生物蛋白酶,主要由霉菌、细菌,其次由酵母、放线菌生产。

蛋白酶的分类

蛋白酶(Protecses)粗分;可分为溶胶化酶(Peptldesos)和蛋白质水解酶(Protcinases),它们都能将肽键分解成酸与胺两部分,但往往表现出不同的与表面活性剂的适应性,后者(蛋白酶)只与阴离子型中直链苯磺酸盐相容,其活性不受影响。前者(溶胶化酶),对阴离子与非离子的LAS,LES

蛋白酶的分类

按蛋白酶水解蛋白质的方式可分为以下几种。(1)切开蛋白质分子内部肽键,生成相对分子质量较小的多肽类,这类酶一般叫内肽酶;(2)切开蛋白质或多肽分子氨基或羧基末端的肽键,而游离出氨基酸,这类酶叫外肽酶。作用于氨基末端的称为氨肽酶,作用于羧基末端的称为羧肽酶;(3)水解蛋白质或多肽的脂键;(4)水解蛋白

氰化高铁血红蛋白测定法操作步骤

  器具和试剂:  采血工具,分光光度计,HiCN转化液。  步骤:  准备:打开分光光度计预热(预热时间由仪器类型决定),取5ml HiCN转化液与试管中;  采血:一般为采用皮肤采血法,采血20μl后立即溶于含有转化液的试管中,充分震荡混匀,静置5分钟;  测定:使用分光光度计测定混合液的吸光度

氰化高铁血红蛋白测定法操作步骤

  器具和试剂:  采血工具,分光光度计,HiCN转化液。  步骤:  准备:打开分光光度计预热(预热时间由仪器类型决定),取5ml HiCN转化液与试管中;  采血:一般为采用皮肤采血法,采血20μl后立即溶于含有转化液的试管中,充分震荡混匀,静置5分钟;  测定:使用分光光度计测定混合液的吸光度

蛋白质含量测定法凯氏定氮法

  本法系依据蛋白质为含氮的有机化合物,当与硫酸和硫酸铜、硫酸钾一同加热消化时使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸液吸收后以硫酸滴定液滴定,根据酸的消耗量算出含氮量,再将含氮量乘以换算系数,即为蛋白质的含量。  本法灵敏度较低,适用于0.2~2.0mg氮的测定。氮

蛋白质定量检测方法——胶体金测定法

  胶体金(colloidal gold)是氯金酸(chloroauric acid)的水溶胶,呈洋红色,具有高电子密度,并能与多种生物大分子结合。  胶体金是一种带负电荷的疏水胶体遇蛋白质转变为蓝色,颜色的改变与蛋白质有定量关系,可用于蛋白质的定量测定。

蛋白质含量测定法福林酚法(Lowry法)

  本法系依据蛋白质分子中含有的肽键在碱性溶液中与Cu2+螯合形成蛋白质-铜复合物,此复合物使酚试剂的磷钼酸还原,产生蓝色化合物,同时在碱性条件下酚试剂易被蛋白质中酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸还原呈蓝色反应。在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比,以蛋白质对照品溶液作标准曲线,采用比色法测定供试品中蛋

融合蛋白酶解实验_-用-Xa-因子

使用基因融合表达系统在大肠杆菌中表达外源基因已越来越受欢迎。其原因在很大程度上归因于融合系统能够产生大量的可溶性的融合蛋白。谷胱甘肽转移酶以及硫氧还蛋白均被证实能非常成功地生产正确折叠、有生物活性的蛋白质。其中每一种都备有方便的纯化方法,可将融合蛋白与细胞污染物分开。所产生的蛋白质适用于进行其生物学

蛋白质胰蛋白酶磷酸肽图谱制定实验

 实验方法原理 实验材料 含 32P 标记的蛋白质的样品试剂、试剂盒 荧光墨水/染料碳酸氢铵2-巯基乙醇SDS载体蛋白(溶于去离子水中)三氯乙酸(TCA)乙醇过氧化氢甲酸TPCK-处理的胰蛋白酶(溶于去离子水/ HCl )电泳缓冲液绿色标记染料层析缓冲液仪器、耗材 单边剃刀刀片/手术刀片闪烁计数器1

蛋白质胰蛋白酶磷酸肽图谱制定实验

基本方案 备择方案  固相蛋白消化 辅助方案 从纤维平板上             实验方法原理实验材料 含 32P 标记的蛋白质的样品 试剂、试剂盒

旋光测定法

动调节旋光测定仪的面市,使测定结果有一定的精确度和再现性,因此常被研究单位和生产厂家用作旋光性产品的含量分析,即用旋光仪测定样品的旋光度α,计算比旋光度[α]D20,再换算成样品光学纯度ee值。旋光测定法需要的样品较多,通常需0.2-2g纯样品,5-25ml待测溶液;与色谱法相比,方法的准确度﹑精密

简述灰分测定法

灰分测定法,测定用的供试品须粉碎,使能通过二号筛,混合均匀后,取供试品2~3g(如须测定酸不溶性灰分,可取供试品3~5g),置炽灼至恒重的坩埚中,称定重量(准确至0.01g),缓缓炽热,注意避免燃烧,至完全炭化时,逐渐升高温度至500~600℃,使完全灰化并至恒重。1.总灰分测定法 测定用的供试品须

谷物灰分测定法

本标准适用于谷物灰分含量的测定。1 方法原理将一定重量粉碎的谷物,装入已知重量的坩埚中,经高温电炉灼烧(550±10℃)至恒重后,减去坩埚重,即为所测谷物灰分含量。2 仪器、设备2.1 分析天平:感量0.1 mg。2.2 粉碎机:实验室用。2.3 筛子:实验室用。2.4 600W电炉:具有调压变压器

旋光测定法

动调节旋光测定仪的面市,使测定结果有一定的度和再现性,因此常被研究单位和生产厂家用作旋光性产品的含量分析,即用旋光仪测定样品的旋光度α,计算比旋光度[α]D20,再换算成样品光学纯度ee值。旋光测定法需要的样品较多,通常需0.2-2g纯样品,5-25ml待测溶液;与色谱法相比,方法的准确度﹑精密度较