细胞周期测定实验——BrdU渗入法
实验方法原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。 单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法，但它不能代表细胞群体的周期，故现多采用其他方法测群体周期。 BrdU（5-溴脱氧尿嘧啶核苷）加入培养基后，可做为细胞DNA复制的原料，经过两个细胞周期后，细胞中两条单链均含BrdU的DNA将占l/2，反映在染色体上应表现为一条单体浅染。如经历了三个周期，则染色体中约一半为两条单体均浅染，另一半为一深一浅。细胞如果仅经历了一个周期，则两条单体均深染。计分裂相中各期比例，就可算出细胞周期的值。实验材料细胞试剂、试剂盒BrdU甲醇冰醋酸Giemsa染液秋水仙素SSC柠檬酸三钠NaCl仪器、耗材冰箱玻片水浴锅锅盖紫外灯光学显微镜实验步骤一、试剂配制1. BrdU配制BrdU 10 mg加双蒸水10 ml ，4℃下避光保存。2. 2x......阅读全文
Brdu免疫组织化学染色分析－BrdU－incorporation－assay
Enzyme Immunostaining for BrdU:Wash frozen sections with PBS 2x.Put them in 0.1% Pepsin in 0.1N HCL (in PBS) at 37�C for 50min.Then in 0.3% hydrogen p
血糖测定实验——酶法
实验方法原理血糖中β－Ｄ葡萄糖在葡萄糖氧化酶催化下，氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶催化下，氧化氧的受体——邻联甲苯胺产生有色化合物。在有足够的葡萄糖氧化酶和过氧化物酶存在下，形成有色化合物的量和葡萄糖的量成正比，并在625 nm处有最大吸收。实验材料葡萄糖试剂、试剂盒邻联甲苯胺
如何测定细胞周期？其实验方法又是怎样的？
如何测定细胞周期？其实验方法又是怎样的？这两个问题可以算做一个问题来回答，要解析这个问题一共要操作五个步骤：1、消化细胞 ，将细胞 悬液接至内含盖玻片的培养皿中。2、CO2培养箱中培养48小时，使细胞长在盖片上。3、取出盖片，按下列顺序操作：PBS漂洗3分钟→甲醇：冰醋酸=3：1固定液中固定30分钟
流式检测－T－细胞增殖的技巧有哪些？
集中于 T 细胞的许多基础和临床免疫研究包括增殖测定，都是为了确定 T 细胞是否能够在不同的体外或体内条件下增殖。流式细胞仪术是测量 T 细胞增殖的理想方法，现在有一套染色产品，可以在现有的流式细胞仪染色板中加入增殖染料。与所有流式细胞术染色步骤一样，一定要做一个预实验确定染色试剂的用量和确定采
细胞增殖检测：3H同位素渗入法实例
树突状细胞(DC) 是一组分布广泛的、由骨髓来源的、具有迁移能力的免疫细胞，是目前发现的功能最强大的抗原递呈细胞(APC)。 DC 是机体适应性 T 细胞免疫应答的始动者，主要在（1）肿瘤免疫反应（2）在疫苗生产过程中分别起着至关重要的作用。实验方法原理树突状细胞(DC) 是一组分布广泛的、由骨髓来
细胞周期检测方法（PI法）
可用于细胞周期检测的荧光染料有碘化丙啶（Propidium，简称PI）、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole，简称DAPI)、Hochest、7氨基放线菌素（7-Amino-ActinomycinD，简称7AAD）等。细胞周期PI
真空渗入法研究环境因子对光合作用的影响
一、原理 真空渗入法可使叶肉细胞间隙充满水分而下沉。在光合作用过程中，植物吸收CO2而放出氧气，由于氧在水中的溶解度很小，所以光合作用的结果，会使得下沉的叶片随其下表面气体逐渐增加而上浮，根据上浮所需的时间的长短，即能推测光合作用的强弱。 二、材料、仪器设备及试剂 1. 小白菜、莴苣叶片；
细胞增殖检测：3HTdR渗入法原理和操作步骤
一、原理 T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体，在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖。植物血凝素（PHA）、刀豆蛋白A（ConA），抗CD2、抗CD3McAb作为多克隆刺激剂可选择性地刺激T细胞增殖；而抗IgM、含葡萄球菌A蛋白的菌体（SAC）、脂多糖（LPS，对小鼠有
内毒素测定实验——凝胶法
实验方法原理鲎是一种海洋节肢动物，其血液中的有核变形细胞含有凝固酶原和可凝固蛋白。将这些变形细胞冻融裂解后制成鲎变形细胞溶解物（limulus amebocyte lysate，LAL），此溶解物若与待检标本中的内毒素相遇，内毒素激活 LAL 的凝固酶原成为凝固酶，作用于可凝固蛋白，使其凝聚成凝胶状
细胞增殖检测方法
一、胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）渗入法 胸腺嘧啶核苷（TdR）是DNA特有的碱基，也是DNA合成的必需物质。用同位素3H标记TdR即3H-TdR作为DNA合成的前体能掺入DAN合成代谢过程，通过测定细胞的放射性强度，可以反映细胞DAN的代谢及细胞增殖情况。但是具有放射性。 二、MTT检测法 MTT检
Detection－of－BrdU－Incorporation－in－DNA－Synthesizing－Cells
Detection of BrdU Incorporation in DNA Synthesizing Cells NOTE: Bromodeoxyuridine is a known carcinogen. Propidium iodine (PI) is known to be toxic an
BrdU标记法检验细胞增殖
1、细胞以1.5×105 /ml细胞数接种于直径35ml培养皿中（内放置一盖玻片），培养1天，用含0.4％FCS培养液同步化3天，使绝大多数细胞处于G0 期。 2、终止细胞培养前，加入BrdU（终浓度为30μg/L），37℃，孵育40min。 3、弃培养液，玻片用PBS洗涤3次。 4、甲
哪些细胞周期蛋白可以用于细胞周期分析实验？
以下是一些常用于细胞周期分析实验的细胞周期蛋白：Cyclin D：在细胞周期的 G1 期发挥作用，其表达水平与 G1 期进程相关。Cyclin E：同样在 G1 期起作用，促进细胞从 G1 期向 S 期过渡。Cyclin A：在 S 期和 G2 期表达，对 DNA 合成和细胞进入 M 期有重要作用。
姐妹染色单体分化染色法
1. 实验原理 姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation，SCD)是20世纪70年代中期发展起来的染色体处理技术。1973年Latt在培养的细胞中加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-Bromode Oxyurdine，BrdU），用Hoechst 3
姐妹染色单体分化染色实验
实验概要本文介绍了姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation，SCD)的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation，SCD)是20世纪70年代中期发展起来的染色体处
适合实验的细胞周期分析技术的关键因素
最适合实验的细胞周期分析技术，可以考虑以下几个关键因素：实验目的：明确您希望通过细胞周期分析回答的具体问题。例如，是要简单了解细胞周期的大致分布，还是需要精确分析特定细胞亚群的周期状态。样本类型和数量：考虑您拥有的样本是细胞悬液、组织切片还是其他形式，以及样本的数量。对于大量的细胞悬液样本，流式细胞
skov3/ddp耐药细胞增殖检测技术
目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法，通过直接测定进行分裂的细胞数来评价细胞的增殖能力。另一种是间接的方法，即细胞活力（cell viability）检测方法，通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。显然，细胞活力检测法并不能终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在
细胞周期分析实验中如何选择合适的细胞周期蛋白？
在细胞周期分析实验中选择合适的细胞周期蛋白，需要考虑以下几个因素：研究目的：明确您想要探究的细胞周期特定阶段或细胞周期调控的具体方面。例如，如果关注 G1 期到 S 期的转换，Cyclin D 和 Cyclin E 可能更合适；若重点是 G2 期到 M 期的进展，Cyclin B 则是较好的选择。细
消光系数的测定（Scopes－法)－实验
试剂、试剂盒透析缓冲液牛血清白蛋白（BSA) 或σ32 溶液仪器、耗材干净的石英比色皿分光光度计实验步骤材料与设备牛血清白蛋白（BSA) 或σ32 溶液，浓度约为 1mg/ml干净的石英比色皿分光光度计，可在 205nm 和 280nm 读数的试剂透析缓冲液(配方，见"试剂的配制"，PP.184~1
消光系数的测定（Scopes－法)－实验
试剂、试剂盒 透析缓冲液 牛血清白蛋白（BSA) 或σ32 溶液 仪器、耗材 干净的石英比色皿 分
TTC法根系活力的测定实验
实验方法原理 氯化三苯基四氮唑（TTC）是标准氧化还原电位为80毫伏的氧化还原物质。溶于水中为无色溶液，但还原后通过下列反应，生成红色而不溶于水的三苯基甲臢。反应式如下： 生成的甲臜呈稳定的红色，不会被空气中的氧自动氧化。所以TTC被广泛地用作酶试验的受氢体。植物根引起的TTC还原，可因加入琥珀酸、
TTC法根系活力的测定实验
实验方法原理氯化三苯基四氮唑（TTC）是标准氧化还原电位为80毫伏的氧化还原物质。溶于水中为无色溶液，但还原后通过下列反应，生成红色而不溶于水的三苯基甲臢。反应式如下： 生成的甲臜呈稳定的红色，不会被空气中的氧自动氧化。所以TTC被广泛地用作酶试验的受氢体。植物根引起的TTC还原，可因加入琥珀酸、延
消光系数的测定（Scopes－法)－实验
试剂、试剂盒 透析缓冲液牛血清白蛋白（BSA) 或σ32 溶液仪器、耗材 干净的石英比色皿分光光度计实验步骤 材料与设备牛血清白蛋白（BSA) 或σ32 溶液，浓度约为 1mg/ml干净的石英比色皿分光光度计，可在 205nm 和 280nm 读数的试剂透析缓冲液(配方，见"试剂的配制"，PP.18
TTC法根系活力的测定实验
实验方法原理氯化三苯基四氮唑（TTC）是标准氧化还原电位为80毫伏的氧化还原物质。溶于水中为无色溶液，但还原后通过下列反应，生成红色而不溶于水的三苯基甲臢。反应式如下： 生成的甲臜呈稳定的红色，不会被空气中的氧自动氧化。所以TTC被广泛地用作酶试验的受氢体。植物根引起的TTC还原，可因加入琥珀酸、延
生化需氧量测定实验稀释培养法
实验方法原理一、测定方法的选择 1. 直接培养法：此法适用于BOD5 值不超过7mg/l 的水样。 2. 稀释培养法：当耗氧量超过水样中溶解氧时，需用配制的饱和稀释水将水样适当稀释，再测定耗氧量。一般水样BOD5 值在10mg/l 以上的采用此法。 3. 瞬时需氧量：对于含有硫化物、亚硫酸盐、
vc含量测定碘量法实验
维生素c可以直接用碘量法测定的原因是：该反应符合滴定的条件，即能快速直接的反应，有明显的滴定终点（即溶液颜色的变化）。该反应的化学方程式为：C6H8O6+I2=C6H6O6+2HI，I2的水溶液是黄褐色，HI无色，指示剂为淀粉，碘遇淀粉会变蓝色，这是就达到滴定终点，可以根据I2的用量和方程式计算维生
BrdU标记法检测原代细胞增殖
BrdU标记法检测原代细胞增殖1．细胞以1.5×105/ml细胞接于直径35ml培养皿中（内放置盖玻片），培养1天，用含0.4％ FCS培养液同步化3天，使绝数细胞处于G0期2．终止细胞培养，加入BrdU（终浓度30μg/L），37℃，孵育40min。3．弃培养液，玻片用PBS洗涤3次。4．甲醇/醋
细胞增殖检测：H胸腺嘧啶核苷(3HTdR)渗入法材料
一、材料及试剂 1、培养基：RPMI-1640或TC199培养液 2、PHA；同形态学方法 3、小牛血清 4、3H-TdR；选用比活性为2Mci~10Mci/mg分子的制品，将1Mci/ml溶液以生理盐水稀释成100uci/ml，于4℃保存备用。临用时再用培养液稀释成10uci/ml溶液。 5、3%
用真空渗入法测定环境因子对光合作用的影响
绿色植物的叶绿体 是光合作用进行的场所，叶绿体色素是进行光合作用光能吸收、传递与转换的主要物质，与作物光合作用及产量形成关系密切。不同作用作物叶绿素的含量与组成有差异，栽培措施、营养状况等条件的改变都会通过影响叶绿体色素的状况而影响光合。了解叶绿体色素的组成与含量，无论对于深入理解光合作用的本质，
检测细胞增殖需要使用的仪器与试剂清单
细胞增殖可以通过测量诸如新合成的DNA、总核酸含量或细胞分裂等参数来确定（见表1）。 最简单的方法是使用可与胺反应的细胞跟踪指示剂（例如CytoTell 染料）监视细胞分裂，这些可渗透细胞的指示剂与细胞质蛋白共价结合。由于这种共价偶联反应，CytoTell 染料无法转移到相邻细胞中，并且