血糖测定实验——酶法

实验方法原理血糖中β-D葡萄糖在葡萄糖氧化酶催化下,氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶催化下,氧化氧的受体——邻联甲苯胺产生有色化合物。在有足够的葡萄糖氧化酶和过氧化物酶存在下,形成有色化合物的量和葡萄糖的量成正比,并在625 nm处有最大吸收。实验材料葡萄糖试剂、试剂盒邻联甲苯胺 醋酸 葡萄糖氧化酶 辣根过氧化酶仪器、耗材试管 试管架 吸量管 722S分光光度计实验步骤溶液配制:1. 1%邻联甲苯胺溶液:1 g邻联甲苯胺溶于100 ml无水乙醇,于棕色瓶保存。 2.醋酸缓冲液(pH 5):300 ml 0.15 mol/L醋酸(8.7 ml冰乙酸定容至1 L),700 ml 0.15 mol/L醋酸钠混合后调pH 至5(用氢氧化钠或盐酸)。 3.葡萄糖氧化酶,辣根过氧化酶:10 mg溶于10 ml水中,放于4 ℃保存。 4.含邻联甲苯胺试剂:150 mlpH5醋酸盐缓冲液,1 m......阅读全文

血糖测定实验——酶法

实验方法原理血糖中β-D葡萄糖在葡萄糖氧化酶催化下,氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶催化下,氧化氧的受体——邻联甲苯胺产生有色化合物。在有足够的葡萄糖氧化酶和过氧化物酶存在下,形成有色化合物的量和葡萄糖的量成正比,并在625 nm处有最大吸收。实验材料葡萄糖试剂、试剂盒邻联甲苯胺

血糖测定实验

实验方法原理 血糖中β-D葡萄糖在葡萄糖氧化酶催化下,氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶催化下,氧化氧的受体——邻联甲苯胺产生有色化合物。在有足够的葡萄糖氧化酶和过氧化物酶存在下,形成有色化合物的量和葡萄糖的量成正比,并在625 nm处有最大吸收。实验材料 葡萄糖试剂、试剂盒 邻联

血糖测定实验

酶法             实验方法原理 血糖中β-D葡萄糖在葡萄糖氧化酶催化下,氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶催化下,氧化氧的受体——邻联甲苯胺产生有色化合

血糖的测定(OTB法和葡萄糖氧化酶法)(1)

一、改良的邻甲苯胺硼酸法(O-TB法)要 求1.了解血糖微量测定的基本原量。2.掌握血糖正常水平及其测定的临床意义。3.复习血糖的来源、去路及其调节的有关理论知识。原 理葡萄糖为一含醛基的己糖,在酸性条件下加热,可脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛,后者与邻甲苯胺缩合成一绿青色的化合物,其颜色的深浅与

血糖的测定(OTB法和葡萄糖氧化酶法)(2)

三、激素对血糖浓度的影响实验目的通过观察家兔在注射胰岛素和肾上腺素前后血糖浓度的变化,了解血糖微量测定的基本原理,掌握血糖正常水平及其测定的临床意义,以及复习血糖的来源、去路及其调节的有关理论知识。实验原理对两只家兔,分别在注射激素(胰岛素、肾上腺素)前后静脉取血,采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度,以

葡萄糖氧化酶法测定血糖实验报告怎么写

葡萄糖氧化酶法1、原理:葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化反应中释放过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶催化下与色原性氧受体缩合为红色化合物,此物质在505mm处有最大吸收峰,其吸光度值和葡萄糖量成正比。2、将血清和酶酚混合试剂混匀,置于适宜环境中保温保存,反应完毕后用调零过的分光光度计测定产物于505mm处吸光

脂肪酶的测定实验——荧光分析法

实验方法原理此实验同样适用于胰凝乳蛋白、胆碱酯酶和酰基转移酶。可以用作底物的并非只是联丁酰荧光素,乙酰胆碱酯酶荧光素亦可。联丁酰荧光素 → 荧光素(无荧光性) (有荧光性)实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HCl联丁酰荧光素仪器、耗材荧光光度计实验步骤0.1 mol/L Tris-HCl,pH 8

酶法测定血糖原理及其临床意义

原理葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化为葡萄糖酸,同时释放过氧化氢。过氧化氢酶催化过氧化氢氧化色素原,并使色素原氧化成红色醌类化合物,即Trinder反应。红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。临床意义1.生理性高血糖可见摄入高糖食物后,或情绪紧张肾上腺分泌增加时。2.病理性高血糖a.糖尿病:病理性高血糖

NK细胞活性测定实验——乳酸脱氢酶释放法

实验方法原理乳酸脱氢酶(LDH)存在于细胞内,正常情况下,不能透过细胞膜。当细胞受到损伤时,由于细胞膜通透性改变,LDH可从细胞内释放至培养液中。释放出来的LDH再催化乳酸的过程中,使氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)变成还原型辅酶(NADH2),后者再通过递氢体-吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化氮唑

胆碱酯酶的测定实验_pH-稳定计法

实验材料胆碱酯酶试剂、试剂盒Tris-HCl氯化乙酰胆碱氯化镁NaOH仪器、耗材自动滴定器实验步骤空白对照:保持 pH 7.4,持续记录几分钟每次 0.01 mol/L 氢氧化钠的用量。样品:加入酶溶液(例如 0.1~1 ml),保持 pH 7.4,并记录 5 min 每次 0.01 mol/L 氢

酶活性测定实验

实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.

酶活性测定实验

实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.

葡萄糖氧化酶法测血糖的干扰因素

葡萄糖氧化酶法 测定血浆葡萄糖非常特异,从原理反应式中可知第一步是特异反应,第二步特异性较差。误差往往发生在反应的第二步。一些还原性物质 如尿酸、维生素 C 、胆红素和谷胱甘***等,可与色原性物质竞争过氧化氢,从而消耗反应过程中所产生的过氧化氢,产生竞争性抑制,使测定结果偏低。然 而,

血糖含量的测定——邻甲苯胺法(Otoluidine-boric,TB法)

实验原理血液中所含的葡萄糖,称为血糖。它是糖在体内的运输形式。目前国内医院多采用葡萄糖氧化酶法和邻甲苯胺法测定血糖。前者特异性强、价廉、方法简单,其正常值:空腹全血为3.6~5.3毫摩尔/升(65~95毫克/分升),血浆为 3.9~6.1毫摩尔/升。后者由于血中绝大部分非糖物质及抗凝剂中的氧化物

异构酶的测定实验_葡萄糖异构酶的测定实验

实验方法原理D-葡萄糖 ⇌ D-木果糖实验材料酶溶液试剂、试剂盒TES NaOHD-葡萄糖CoCl2半胱氨酸·HCl咔唑溶液硫酸仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」实验步骤与木糖异构酶基本相同,唯一不同的是在酶反应以及加完半胱氨酸后,咔唑和硫酸混合物可以放置 30 min 进行

血浆凝固酶实验——玻片法

实验材料金黄色葡萄球菌及白色葡萄球菌 24 h 的斜面培养物试剂、试剂盒兔血浆生理盐水仪器、耗材载玻片接种环滴管实验步骤1. 取干净载玻片一块,用滴管取生理盐水于玻片两端各放一小滴。2. 用接种环取金黄色葡萄球菌菌苔少许轻轻搅匀于玻片左侧的盐水中,同法取白色葡萄球菌榭匀于玻片右侧的盐水中。制成均匀浓

酶测定法实验

酶测定法实验             试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶 纯σ32 标准品 纯化的 σ32 样品

酶测定法实验

试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液DEAE-纤维素(DE81) 纸片P04 清洗缓冲液乙醇反应液仪器、耗材 水浴锅实验步骤 材料与设备核心 RNA 聚合酶 (2.3 mg/ml)纯σ32 标准品 (

酶测定法实验

在本单元中,用一种较简单的方法测定它对核心 RNA 聚合酶自非特异性模板 poly(dAT) 起始转录的刺激作用。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液

异构酶的测定实验

实验方法原理 D-木糖 ⇌ D-木酮糖实验材料 酶溶液试剂、试剂盒 TES NaOHD-木糖MnSO4半胱氨酸·HCl咔唑溶液硫酸仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」20 ul 的实验混合物和 20 ul 酶溶液(各自用 20 ul TES 缓冲液作对照)混合,并在测定

酶活性的测定实验

连续性检测             实验方法原理 1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量

异构酶的测定实验

暂未评分点评实验,有机会获丁当奖励 +收藏异构酶的测定实验标签:D-木糖异构酶 葡萄糖异构酶 酶学实验手册 第三章葡萄糖异构酶是应用最多的酶之一,本质上它是木糖异构酶而非葡萄糖异构酶。它从各种各样的微生物中分离得来,它在微生物体内作为木糖代谢物。半纤维素,像木聚糖或阿拉伯糖,是最丰富的自然营养物质之

酶活性的测定实验

酶活性的测定可应用于:(1)酶动力学的研究;(2)酶抑制的研究。实验方法原理1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量的量度,取决于指定的条件。SI单位是katal,1 katal = 1 mol /s,更实际

酶联免疫法的效果测定

  酶标抗体标记效果测定:测定内容包括酶和抗体活性、结合物中酶含量和IgG含量、酶与IgG摩尔比值以及结合率。

末梢血糖仪测定末梢血糖的体会

目前血糖浓度测定方法主要采用生化仪器自动检测和末梢仪器快速检测的方法,大大提高了临床检验的质量和效率,但迄今为止末梢血糖仪测定末梢血糖在质量控制等方面还不够完善。如果完全依靠末梢检测结果,不加以分析和解释而直接发出报告,将会误导医生,造成误诊或导致不合理的治疗。因此末梢血糖测定只能用于糖尿病患者血糖

葡萄糖氧化酶法测定血糖应注意的问题

1)原理: 葡萄糖氧化酶 (glucose oxidase , GOD) 利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸,并释放过氧化氢。过氧化物酶 (peroxidase , POD) 在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧,并使色原性氧受体 4- 氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物,即

酶法检测磷酸化实验

实验方法原理实验材料 含 100~200 μg 总蛋白的样品试剂、试剂盒  50 mmol L NN'-2-羟丙磺酸哌嗉(PIPES)Sephadex G-25 柱(可选)PIPES 2-ME 或 RPERS DTT 缓冲液马铃薯酸性磷酸酶2 × SDS-PAGE 样品缓冲液100 mmol

酶法检测磷酸化实验

基本方案1 非特异酸性磷酸酶消化磷酸蛋白质 基本方案2 丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶消化磷酸蛋白质             实验方法原理实验材料 含 100~200 μg 总蛋白的样品 试

脂肪酶的测定实验——pH-稳定计(自动滴定器)法

三酰甘油脂肪酶,三酰甘油酰基水解酶。三酰甘油 → 甘油 + 长链脂肪酸游离羧基的释放引起 pH 的降低,而这可以用来鉴定酶的活性。在实验期间,为了保持一个稳定的 pH,建议 pH 稳定计与自动滴管连接,或者用从合成的底物上释放一个具有荧光的残基,根据其荧光光度测定活度。实验材料酶样品试剂、试剂盒氯化

蛋白酶的测定实验

实验方法原理 血红蛋白不是很贵,被用来做这个实验。由于处于天然结构的蛋白质通常可以抵制蛋白酶的攻击,因此首先用尿素使血红蛋白失活。分离非水解蛋白质后,利用 Folin-Ciocaheau 试剂的上清液测量消化产物。这种试剂优先识别色氨酸和酪氨酸,但是也可以识别半胱氨酸和组氨酸。'实验温度