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细胞电融合

细胞电融合的优势在于(1)融合率高(2)无毒性(3)操作简便(4)融合后的细胞继续培养成活率高等。动物的游离细胞以及植物成微生物去壁后的原生质体,在电刺激下进行细胞融合,是细胞工程手段的又一进展。实验方法原理将制备的游离细胞或原生质体,置于电融合室中,在高频交流电场的作用下,细胞被极化,成为偶极子,造成细胞之间相互连接,如果施加的高频交流电压(即正弦波的p-p值)过高或作用时间过长,则细胞连接成串珠状,应适当控制以上条件,尽量使两细胞处于点接触状态,然后施加方波脉冲予以刺激,由于电脉冲的瞬间作用,可击破两细胞接触点部位的质膜,此时质膜的脂类分子发生重组,同时由于细胞表面的张力作用,使两细胞融合逐步完全。实验材料动物游离细胞植物原生质体试剂、试剂盒甘露醇氧化钠纤罐索醇离析酶蜗牛酶CaCl2MES (2-N-吗啉乙烷磺酸)葡聚糖硫酸钾仪器、耗材JCF-I型细胞电融合仪细胞融合池普通离心机倒置显微镜(或研究用显微镜)刻度吸管不锈钢网(......阅读全文

细胞电融合

            实验方法原理 将制备的游离细胞或原生质体,置于电融合室中,在高频交流电场的作用下,细胞被极化,成为偶极子,造成细胞之间相互连接,如果施加的高频交流电压(即正弦波的p-p值)过高或作用

细胞电融合

            实验方法原理 将制备的游离细胞或原生质体,置于电融合室中,在高频交流电场的作用下,细胞被极化,成为偶极子,造成细胞之间相互连接,如果施加的高频交流电压(即正弦波的p-p值)过高或作用

电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用

  Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning   郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu   第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038   Insti

电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用

  郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu   第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038   Institute of Orthopedic Oncology, Fourth Military Medical University, Xi''an 710038

电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用

Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthop

电穿孔技术在转基因及动物克隆中的应用

Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu第四军医大学全军骨肿瘤研究所 西安 710038Institute of Orthopedi

细胞融合技术

细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)是指真核细胞通过介导和培养,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。人工的细胞融合开始于20世纪50年代, 60年代到70代作为一门新兴的技术, 发展非常快, 应用范围也极为广泛, 除了同种类细胞间可以

电穿孔和电融合技术

实验概要了解细胞电穿孔(electroporation)和电融合(Electrofusion Method)的基本原理。学习电穿孔和电融合基本技术。实验原理当细胞置于非常高的电场中,细胞膜就变得具有通透性,能让外界的分子扩散进细胞内,这一现象称为电穿孔。运用这一技术,许多物质,包括DNA、 &nbs

细胞融合的方法、过程和影响因素

由于对新生物资源需要、淋巴细胞杂交瘤和单克隆抗体的制备,以及寻求远缘物种间的遗传物质交换的新途径,细胞融合技术现在已经成为生命科学里最热的话题之一,那么,细胞融合的方法就是细胞融合的关键。细胞融合的概念 细胞融合(cell fusion):又称somatic hybridization or c

诱导动物细胞融合的方法

  为什么灭活的仙台病毒能作细胞融合的诱导剂?  问题的提出  在新冠肺炎疫情下,科研人员加紧在研究新冠病毒(SARS-CoV-2),不断有新的研究成果产生,如要彻底了解该病毒的结构和侵染机理,还需要一段时间,甚至可能要较长的时间。要知道,人类与病毒的斗争看不到尽头,仅仅是认识第一个病毒-烟草花叶病

TGF-β1受体阻滞剂对树突状细胞融合疫苗制备的影响研究

绝大多数肿瘤缺乏特异性抗原,而且肿瘤组织中抗原提呈细胞数量减少、功能低下或缺如。因此应用细胞融合技术将肿瘤细胞和DC融合,融合细胞即包含肿瘤细胞表面的所有抗原,又具有DC的强大的抗原提呈能力和刺激效应细胞免疫能力[1-2]。   转化生长因子-β(TGF-β)超家族生长分化因子是一种具有多

如何选择BTX转基因仪(电转仪)?(二)

植物细胞转化         (系统:ECM630/830)      对植物原生质(玉米、烟草等)及完整植物的电穿孔可以用于产生对农业/园艺有用的转基因作物。植物细胞转化的一个主要目的是对植物细胞进行稳定转化以产生具有优良品

诱导动物细胞融合的方法有哪些

  在体外培养条件下,动物细胞会自发融合,但是频率极低。因此,一般都需要添加具有诱导细胞融合效应的生物或化学药剂,或者采用电融合技术,人为地促进细胞融合。  病毒诱导融合 病毒是*早采用的融合剂。常用于诱导动物细胞融合的病毒有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等,其中仙台病毒*常用。用作融合剂的病毒必

诱导动物细胞融合的方法介绍

诱导动物细胞融合的方法在体外培养条件下,动物细胞会自发融合,但是频率极低。因此,一般都需要添加具有诱导细胞融合效应的生物或化学药剂,或者采用电融合技术,人为地促进细胞融合。病毒诱导融合 病毒是zui早采用的融合剂。常用于诱导动物细胞融合的病毒有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等,其中仙台病

诱导动物细胞融合的方法

  在体外培养条件下,动物细胞会自发融合,但是频率极低。因此,一般都需要添加具有诱导细胞融合效应的生物或化学药剂,或者采用电融合技术,人为地促进细胞融合。   病毒诱导融合   病毒是最早采用的融合剂。常用于诱导动物细胞融合的病毒有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等,其中仙台病毒最常用

诱导动物细胞融合的方法

  在体外培养条件下,动物细胞会自发融合,但是频率极低。因此,一般都需要添加具有诱导细胞融合效应的生物或化学药剂,或者采用电融合技术,人为地促进细胞融合。   病毒诱导融合   病毒是最早采用的融合剂。常用于诱导动物细胞融合的病毒有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等,其中仙台病毒最常用

电穿孔和细胞电融仪-Cyto puls

   Cyto Pulse Sciences, Inc.是一家专业从事电穿孔、电融合仪器研发和生产的公司。该公司主要将脉冲电场技术应用于人类疾病的治疗;通过免疫技术预防疾病;纠正基因缺陷;IVF;细胞融合等相关研究。    脉冲电场可以将两个或两个以上的细胞进行融合从而产生一个更大的细胞。如单克隆

PEG介导的动物细胞融合(cell fusion)技术

细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)是指真核细胞通过介导和培养,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。人工的细胞融合开始于20世纪50年代, 60年代到70代作为一门新兴的技术, 发展非常快, 应用范围也极为广泛, 除了同种类细胞间可以融合,

诱导动物细胞融合的方法

在体外培养条件下,动物细胞会自发融合,但是频率极低。因此,一般都需要添加具有诱导细胞融合效应的生物或化学药剂,或者采用电融合技术,人为地促进细胞融合。 病毒诱导融合  病毒是最早采用的融合剂。常用于诱导动物细胞融合的病毒有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等,其中仙台病毒最常用。用作融合剂的

细胞融合主要方法和操作步骤

两个或两个以上的细胞合并成一个双核或多核细胞的现象称为细胞融合,也称细胞杂交,在自然情况下的受精过程即属这种现象。诱导细胞融合的主要方法有:病毒诱导融合,化学融合剂诱导融合和电融合。1. 病毒诱导融合:有许多种类的病毒能介导细胞融合,最常用的是灭活的仙台病毒(HVJ),为RNA病毒。病毒诱导细胞

mESCs四倍体胚胎嵌合

实验概要mESCs四倍体胚胎嵌合主要试剂PMSG、H-CZB、hCG、电融合液、CZB培养液、含葡萄糖的CZB培养液实验材料注射器、手术剪、手术镊、35 mm培养皿、15 mL离心管、持卵针、体视显微镜、显微操作仪、电融合仪实验步骤(1)二倍体二细胞期胚胎准备①超数排卵。采用8~12周龄的雌性小鼠,

细胞工程(cell engineering)技术介绍

广义的细胞工程(cell engineering)指所有应用于生物学和医学的、以细胞为操作对象的技术手段,其中也包括细胞培养。一般地说,细胞工程主要指应用各种手段对细胞不同结构层次(整体、细胞器、核、基因等)进行改造,如进行细胞融合、核移植、基因转移等,以获得具有特定生物学特性的细胞。一.细胞融

转基因技术的发展及其在转基因动植物的应用

  自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来,我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式:针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用,从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几率且无人类控制性的被动模式大大阻碍了农业的发展,迫切地需要

技术讲解:细胞融合的方法及诱导物

同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并,称自发融合;异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合,称诱发融合。仙台病毒法融合①两种细胞在一起培养,加入病毒,在4℃条件下病毒附着在细胞膜上。并使两细胞相互凝聚;②在37℃中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到破环,此时需要Ca2+和Mg2+,zui适PH为8

胚胎显微操作-细胞核移植

(一)概况   哺乳动物核移植是指将胚胎单个卵裂球或体细胞核(核供体)移入去核的成熟卵母细胞或受精卵(核受体)中,采用一定的方法激活卵母细胞,使核供体和核受体融合为重构胚,经移植后发育成新个体的技术。通过核移植,可以不经过有性繁殖过程,连续不断地复制遗传上相同的胚胎,再借用胚胎移植技术,生

转基因技术的发展及其在转基因动植物的应用

  自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来,我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式:针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用,从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几率且无人类控制性的被动模式大大阻碍了农业的发展,迫切地需要

动物细胞融合的诱导方法有哪些?

  动物细胞融合也称细胞杂交(cell hybridization),是指两个或多个动物细胞融合成一个细胞的过程,融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞(hybrid cell)。  诱导细胞融合的方法有三种:生物方法(病毒)、化学方法(聚乙二醇PEG)、物理方法(离心,

转基因技术的发展与转基因动植物

1.转基因技术的发展    自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来,我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式:针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用,从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几

细胞杂交和选择培养

     融合:细胞杂交之前,要分别准备好脾脏的B细胞悬液和小鼠骨髓瘤细胞(如SP2/0—Agl4细胞株)。免疫后的小鼠脾脏在无菌条件下破碎,将B细胞悬浮在没有血清的培养液中(通常使用RPMIl640商品配制),并洗涤3次去掉小鼠的血清。SP2/0细胞是用加有10%胎牛

培养基教您诱导细胞融合的主要方法

  两个或两个以上的细胞培养基合并成一个双核或多核细胞的现象称为细胞融合,也称细胞杂交,在自然情况下的受精过程即属这种现象。  诱导细胞培养基融合的主要方法有:病毒诱导融合,化学融合剂诱导融合和电融合。  1. 病毒诱导融合:有许多种类的病毒能介导细胞培养基融合,zui常用的是灭活的仙台病毒(HVJ