细胞电融合

实验方法原理 将制备的游离细胞或原生质体,置于电融合室中,在高频交流电场的作用下,细胞被极化,成为偶极子,造成细胞之间相互连接,如果施加的高频交流电压(即正弦波的p-p值)过高或作用时间过长,则细胞连接成串珠状,应适当控制以上条件,尽量使两细胞处于点接触状态,然后施加方波脉冲予以刺激,由于电脉冲的瞬间作用,可击破两细胞接触点部位的质膜,此时质膜的脂类分子发生重组,同时由于细胞表面的张力作用,使两细胞融合逐步完全。 实验材料 动物游离细胞 植物原生质体 试剂、试剂盒 甘露醇 氧化钠 ......阅读全文

细胞电融合

            实验方法原理 将制备的游离细胞或原生质体,置于电融合室中,在高频交流电场的作用下,细胞被极化,成为偶极子,造成细胞之间相互连接,如果施加的高频交流电压(即正弦波的p-p值)过高或作用时间过长,则细胞连接成串珠状,应适当控制以上条件,尽量使两细

细胞电融合

细胞电融合的优势在于(1)融合率高(2)无毒性(3)操作简便(4)融合后的细胞继续培养成活率高等。动物的游离细胞以及植物成微生物去壁后的原生质体,在电刺激下进行细胞融合,是细胞工程手段的又一进展。实验方法原理将制备的游离细胞或原生质体,置于电融合室中,在高频交流电场的作用下,细胞被极化,成为偶极子,

细胞电融合

            实验方法原理 将制备的游离细胞或原生质体,置于电融合室中,在高频交流电场的作用下,细胞被极化,成为偶极子,造成细胞之间相互连接,如果施加的高频交流电压(即正弦波的p-p值)过高或作用时间过长,则细胞连接成串珠状,应适当控制以上条件,尽量使两细

什么是细胞电融合?

当细胞置于非常高的电场中,细胞膜就变得具有通透性,能让外界的分子扩散进细胞内,这一现象称为电融合,又叫电穿孔。

细胞电融合技术的简介

当细胞置于非常高的电场中,细胞膜就变得具有通透性,能让外界的分子扩散进细胞内,这一现象称为电穿孔。运用这一技术,许多物质,包括DNA、RNA、蛋白质、药物、抗体和荧光探针都能载入细胞。作为一种基因转导方法,电穿孔已被广泛用于各种细胞类型,包括细菌、酵母、植物和动物细胞;而且,它还能作为注射方法(称为

细胞电融合技术的优点

与其他常用的导入外源物质的方法相比,电穿孔具有很多优点。首先,不必象显微注射那样使用玻璃针,不需要技术培训和昂贵的设备,可以一次对成百万的细胞进行注射。第二,与用化学物质相比,电穿孔几乎没有生物或化学副作用。第三,因为电穿孔是一种物理方法,较少依赖细胞类型,因而应用广泛。实际上,对大多数细胞类型,用

细胞电融合技术的方法步骤

除了能使细胞膜具有通透性,让外界的分子扩散入胞液中以外,高强度的电场脉冲也能引起细胞融合,这一现象叫做电融合。然而,在用电脉冲融合前必须使细胞相互紧密接触,这一电融合方法在原生质融合制取杂交植物,胚胎细胞相互融合制备动物克隆方面非常有用,尤其在制取杂交瘤细胞制备单克隆抗体方面用处很大。几个实验室已证

细胞融合技术电融合法

在直流电脉冲的诱导下,细胞膜表面的氧化还原电位发生改变,使异种细胞粘合并发生质膜瞬间破裂,进而质膜开始连接,直到闭和成完整的膜,形成融合体。优点:融合率高、重复性强、对细胞伤害小;装置精巧、方法简单、可在显微镜下观察或录像观察融合过程;免去PEG诱导后的洗涤过程、诱导过程可控性强。

细胞融合技术电融合法

在直流电脉冲的诱导下,细胞膜表面的氧化还原电位发生改变,使异种细胞粘合并发生质膜瞬间破裂,进而质膜开始连接,直到闭和成完整的膜,形成融合体。优点:融合率高、重复性强、对细胞伤害小;装置精巧、方法简单、可在显微镜下观察或录像观察融合过程;免去PEG诱导后的洗涤过程、诱导过程可控性强。

电融合技术简介

当细胞置于非常高的电场中,细胞膜就变得具有通透性,能让外界的分子扩散进细胞内,这一现象称为电融合,又叫电穿孔。

电穿孔和电融合技术

实验概要了解细胞电穿孔(electroporation)和电融合(Electrofusion Method)的基本原理。学习电穿孔和电融合基本技术。实验原理当细胞置于非常高的电场中,细胞膜就变得具有通透性,能让外界的分子扩散进细胞内,这一现象称为电穿孔。运用这一技术,许多物质,包括DNA、   RN

电融合法的特点和基本过程

与PEG融合比较起来,电融合有三大优点:一是不存在对细胞的毒害问题;二是融合效率高;三是融合技术操作简便。电融合仪的结构特点:一是交变电场部分;一是高频直流电击部分。电融合的基本过程:细胞膜的接触:当原生质体置于电导率很低的溶液中时,电场通电后,电流即通过原生质体而不是通过溶液,其结果是原生质体在电

“光电融合超分辨生物显微成像系统”通过验收

  2016年6月21日,国家重大科研仪器研制项目(部门推荐)“光电融合超分辨生物显微成像系统”现场验收会在北京召开。国家自然科学基金委员会(以下简称基金委)副主任沈岩院士出席会议并讲话。基金委计划局局长王长锐、生命科学部常务副主任杜生明研究员、生命科学部副主任冯雪莲研究员、财务

“光电融合超分辨生物显微成像系统”获验收

  近日,国家重大科研仪器研制项目(部门推荐)“光电融合超分辨生物显微成像系统”现场验收会在北京召开。基金委副主任沈岩院士出席会议并发表讲话。  根据《国家重大科研仪器设备研制专项实施管理工作细则》和《国家重大科研仪器研制项目验收工作方案(试行)》要求,本次现场验收考核专家组由重大科研仪器专项专家委

电穿孔技术的方法步骤

除了能使细胞膜具有通透性,让外界的分子扩散入胞液中以外,高强度的电场脉冲也能引起细胞融合,这一现象叫做电融合。然而,在用电脉冲融合前必须使细胞相互紧密接触,这一电融合方法在原生质融合制取杂交植物,胚胎细胞相互融合制备动物克隆方面非常有用,尤其在制取杂交瘤细胞制备单克隆抗体方面用处很大。几个实验室已证

mESCs四倍体胚胎嵌合

实验概要mESCs四倍体胚胎嵌合主要试剂PMSG、H-CZB、hCG、电融合液、CZB培养液、含葡萄糖的CZB培养液实验材料注射器、手术剪、手术镊、35 mm培养皿、15 mL离心管、持卵针、体视显微镜、显微操作仪、电融合仪实验步骤(1)二倍体二细胞期胚胎准备①超数排卵。采用8~12周龄的雌性小鼠,

关于原生质体融合的历史进展介绍

  1960年,Cocking用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功;  1970年,Power首次用硝酸钠进行为诱导剂进行了较大规模的原生质体诱导融合;  1971年,Nagata和Takebe首次从离体烟草原生质体培养中获得再生完整植株;  1972年,Carlson首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的

植物体细胞杂交的研究与发展

1960年,Cocking用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功;1970年,Power首次用硝酸钠进行为诱导剂进行了较大规模的原生质体诱导融合;1971年,Nagata和Takebe首次从离体烟草原生质体培养中获得再生完整植株;1972年,Carlson首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的细胞杂种,这也是

原生质体融合的发展与研究

1960年,Cocking用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功;1970年,Power首次用硝酸钠进行为诱导剂进行了较大规模的原生质体诱导融合;1971年,Nagata和Takebe首次从离体烟草原生质体培养中获得再生完整植株;1972年,Carlson首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的细胞杂种,这也是

植物体细胞杂交的融合方法介绍

1.PEG诱导融合法 PEG诱导融合的特点:其优点是融合成本低,勿需特殊设备;融合子产生的异核率较高;融合过程不受物种限制。其缺点是融合过程繁琐,PEG可能对细胞有毒害。 PEG的作用机理: Kao等认为,由于PEG分子具有轻微的负极性,故可以与具有正极性基团的水、蛋白质和碳水化合物等形成H键,

诱导动物细胞融合的方法介绍

诱导动物细胞融合的方法在体外培养条件下,动物细胞会自发融合,但是频率极低。因此,一般都需要添加具有诱导细胞融合效应的生物或化学药剂,或者采用电融合技术,人为地促进细胞融合。病毒诱导融合 病毒是zui早采用的融合剂。常用于诱导动物细胞融合的病毒有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等,其中仙台病毒zui常

诱导细胞融合的方法有哪些

在体外培养条件下,动物细胞会自发融合,但是频率极低。因此,一般都需要添加具有诱导细胞融合效应的生物或化学药剂,或者采用电融合技术,人为地促进细胞融合。1.病毒诱导融合  病毒是最早采用的融合剂。常用于诱导动物细胞融合的病毒有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等,其中仙台病毒最常用。用作融合剂的病毒必须

诱导动物细胞融合的方法有哪些

  在体外培养条件下,动物细胞会自发融合,但是频率极低。因此,一般都需要添加具有诱导细胞融合效应的生物或化学药剂,或者采用电融合技术,人为地促进细胞融合。  病毒诱导融合 病毒是*早采用的融合剂。常用于诱导动物细胞融合的病毒有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等,其中仙台病毒*常用。用作融合剂的病毒必

诱导细胞融合的方法有哪些

在体外培养条件下,动物细胞会自发融合,但是频率极低。因此,一般都需要添加具有诱导细胞融合效应的生物或化学药剂,或者采用电融合技术,人为地促进细胞融合。1.病毒诱导融合  病毒是最早采用的融合剂。常用于诱导动物细胞融合的病毒有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等,其中仙台病毒最常用。用作融合剂的病毒必须

杂交瘤阳性克隆增强佐剂的使用方法

杂交瘤阳性克隆增强佐剂Positive Clone Stimulate Adjuvant细胞电融合法以其无化学毒性、操作标准化、克隆得率高等独特优势逐步取代聚乙二醇法(PEG),成为主流的杂交瘤细胞产生方法。在同等情况下,电融合法产生的融合克隆数目是PEG的5-10倍。但美中不足的是,该法产生克隆的

细胞融合的方法有哪些

一、细胞融合的方法有三种:生物方法、化学方法、物理方法。二、细胞融合也称细胞杂交 , 是指细胞通过介导和培养, 在离体条件下用人工方法将不同种的细胞通过无性方式融合( 合并) 成一个核或多核的杂合细胞的过程。体细胞融合后可形成四倍体或多倍体细胞,由此形成的杂交细胞,其特性会有很大的变化。三、化学诱导

生物杂交瘤技术平台的优化策略

杂交瘤技术仍然是单克隆抗体发现的主要技术,尤其是在治疗性抗体药物治疗领域,相比噬菌体、酵母等非天然文库,具有成药性好、特异性强等特点。由于杂交瘤获得的单克隆抗体,系经过哺乳动物细胞自然进化筛选获得的序列,因此其通常不会遇到表达困难、产量低、非特异性结合等问题。 杂交瘤技术具有以下挑战:1. 对于免疫

细胞融合的基本原理和方法

1.病毒诱导助融:细胞融合在自然界是存在的,细胞融合研究第一也是基于自发的细胞融合,1957年,冈田善雄意外发现仙台病毒,能诱导悬液中艾氏腹细胞融合,然后Harris、Kada等用于诱导种间细胞融合,获得成功。2.化学助融:1972年,卡尔森第一用硝酸钠进行烟草两个种的细胞原生质体的融合,1974年

细胞融合的基本原理和方法

1.病毒诱导助融:细胞融合在自然界是存在的,细胞融合研究第一也是基于自发的细胞融合,1957年,冈田善雄意外发现仙台病毒,能诱导悬液中艾氏腹细胞融合,然后Harris、Kada等用于诱导种间细胞融合,获得成功。2.化学助融:1972年,卡尔森第一用硝酸钠进行烟草两个种的细胞原生质体的融合,1974年

如何选择BTX转基因仪(电转仪)?(二)

植物细胞转化 (系统:ECM630/830) 对植物原生质(玉米、烟草等)及完整植物的电穿孔可以用于产生对农业/园艺有用的转基因作物。植物细胞转化的一个主要目的是对植物细胞进行稳定转化以产生具有优良品质及产量增加的作物。Lin等人(1997)优化了多种植物上用于GUS表达