125IUdR释放试验测定NK细胞活性

自然杀伤(NK)细胞参与了机体免疫防御的第一道防线,主要用于(1)免疫监视系统中抗肿瘤抗病毒(2)免疫调控。实验方法原理25I-UdR(125I-2′脱氧尿嘧啶核苷)是胸腺嘧啶核苷的类似物,作为DNA合成的前体物,能相当特异地取代胸腺嘧啶核苷掺入到细胞核DNA链上。因此,可用125I-UdR标记体外传代培养的肿瘤细胞作为靶细胞,以外周血分离的单个核细胞或小鼠脾细胞作为效应细胞,进行体外NK细胞活性检测。被效应细胞杀伤的靶细胞溶解后可释放125 I-UdR,用γ-计数仪测定其放射性强度,以125I-UdR释放百分率表示NK细胞的活性。实验材料YAC-1细胞试剂、试剂盒125I-UdR(125I-2′脱氧尿嘧啶核苷)胰蛋白酶DNA酶5-氟脱氧尿嘧啶核苷RPMI-1640培养液仪器、耗材塑料试管γ-计数仪离心机实验步骤一、材料1. 125I-UdR :125I的物理半寿期为59.7d。2. 胰蛋白酶:用无Ca2+、Mg2+的Hanks......阅读全文

Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验

            实验方法原理 Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quen

Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验

实验方法原理Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quench试剂(一种以Ca2+螯合的小牛血红蛋白主要成分、还含溴化乙啶试

NK细胞的来源

   NK细胞确切的来源还不十分清楚,一般变人直接从骨髓中衍生,其安育成熟信赖于骨髓的微环境。小鼠和人的体外实验表明,胸腺细胞在体外IL-2等细胞因子存在条件下培养也可诱导出NK细胞。小鼠脾脏在体内IL-3诱导下可促进NK细胞的分化。NK细胞主要分布于外周血中,占PBMC5-10%,淋巴结和骨髓中也

趋化活性测定法测定细胞因子活性

  具有趋化活性的细胞因子,也称趋化因子,诸如IL-8、IL-16、PANTES、MCP及MIP等,能诱导中性粒细胞、单核-巨噬细胞或淋巴细胞等定向迁移。其诱导细胞迁移的方式包括趋化性和化学增活性。趋化性是诱导细胞由趋化因子低浓度处向趋化因子高浓度处做定向移动的特性,可采用琼脂糖和Boyden盲端微

趋化活性测定法测定细胞因子活性

  具有趋化活性的细胞因子,也称趋化因子,诸如IL-8、IL-16、PANTES、MCP及MIP等,能诱导中性粒细胞、单核-巨噬细胞或淋巴细胞等定向迁移。其诱导细胞迁移的方式包括趋化性和化学增活性。趋化性是诱导细胞由趋化因子低浓度处向趋化因子高浓度处做定向移动的特性,可采用琼脂糖和Boyden盲端微

细胞活性检测代谢增殖测定

MTT检测法活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶,能使额外添加的MTT还原为不溶于水的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan),并沉积在细胞中,死细胞则无此现象。接着用二甲基亚砜(DMSO)溶解沉积在细胞中的甲瓒后,可利用酶标仪490nm波长测光吸收值,依据吸光值(OD值)计算出活细胞数量。在一定细胞数范围内,吸

自然杀伤细胞的活性测定

【中文名称】自然杀伤细胞活性测定【概述】自然杀伤细胞(NK)介导天然免疫应答,它不依赖抗体和补体,即能直接杀伤靶细胞,如肿瘤细胞或受病毒感染的细胞等;此外,尚有免疫调节功能,也参与移植排斥反应和某些自身免疫病的发生发展。【参考值】51Cr释放法:自然释放率

NK细胞有什么作用?

  NK细胞是天然免疫系统中一类十分重要的淋巴细胞,由于其杀伤作用是自发的,无需有抗体存在或预先加以致敏,因此将其命名为自然杀伤细胞。它通过其细胞毒活性和产生淋巴因子,在机体抗感染、抗肿瘤、免疫调节和造血调控等方面发挥重要的免疫功能。  NK细胞和杀伤T细胞在清除病原生物感染靶细胞方面有着相似的功能

癌症中的NK细胞

NK细胞在防御实体瘤及其扩散方面发挥着核心作用。研究表明,外周血中的NK活性与总体癌症风险的降低有关,肿瘤浸润性NK细胞是多种恶性肿瘤的阳性预后标志物。尽管NK细胞对于浸润肿瘤组织和消除实体瘤的能力较差,但NK细胞可能位于间质外围,募集树突状细胞,这些细胞随后迁移到次级淋巴器官,在那里它们加速反应性

NK细胞计数的简介

  自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)具有本身的形态、表型及功能特征。NK细胞的确切来源还不十分清楚,一般认为直接从骨髓中衍生,其发育成熟依赖于骨髓的微环境。它分布广泛,在外周血及脾脏中较多,淋巴结和骨髓次之。NK细胞绝大部分为大颗粒淋巴细胞,免疫表型为 CD3+、CD4+

自然杀伤细胞NK细胞的细胞功能

自然杀伤活性由于NK细胞的杀伤活性无MHC限制,不依赖抗体,因此称为自然杀伤活性。NK细胞胞浆丰富,含有较大的嗜天青颗粒,颗粒的含量与NK细胞的杀伤活性呈正相关。NK细胞作用于靶细胞后杀伤作用出现早,在体外1小时、体内4小时即可见到杀伤效应。NK细胞的靶细胞主要有某些肿瘤细胞(包括部分细胞系)、病毒

自然杀伤细胞NK细胞的细胞表型

与T细胞、B细胞相比,NK细胞表面标志的特异性是相对的。人NK细胞mIg-,部分NK细胞CD2、CD3和CD8阳性,表达IL-2受体β链 (P75,CD122),CD11b/CD18阳性。常用检测NK细胞的标记有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1。一种稳定表达在

关于NK细胞的细胞表型介绍

  与T细胞、B细胞相比,NK细胞表面标志的特异性是相对的。人NK细胞mIg-,部分NK细胞CD2、CD3和CD8阳性,表达IL-2受体β链 (P75,CD122),CD11b/CD18阳性。常用检测NK细胞的标记有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1。  一种稳

自然杀伤细胞和淋巴因子激活杀伤细胞的杀伤功能实验

实验方法原理NK细胞存在于人或动物外周血、脾脏、淋巴结和骨髓中,能杀伤某些肿瘤细胞、病毒感染靶细胞,无需抗原或有丝分裂原刺激,亦不依赖抗体或补体,在机体杀伤肿瘤、防御感染及免疫调节中发挥重要作用。  LAK是NK或T细胞在体外高剂量IL-2诱导下,获得能杀伤NK抵抗的肿瘤细胞的功能,在过继免疫治疗肿

自然杀伤细胞活性测定方法介绍

【概述】自然杀伤细胞(NK)介导天然免疫应答,它不依赖抗体和补体,即能直接杀伤靶细胞,如肿瘤细胞或受病毒感染的细胞等;此外,尚有免疫调节功能,也参与移植排斥反应和某些自身免疫病的发生发展。【参考值】51Cr释放法:自然释放率

3HTdR掺入法检测IL2的生物活性

实验概要本实验应用3H-TdR掺入法检测了IL-2的生物活性。主要试剂1. 10% Fcs-RPMI-1640完全培养液2. 3H-TdR3. IL-2标准品:倍比稀释为不同浓度主要设备96孔培养板,刻度吸管,毛细吸管,刻度离心管,离心机,加样器(头),细胞计数板,倒置显微镜,超净工作台,CO2培养

自然杀伤细胞和淋巴因子激活杀伤细胞的杀伤功能实验

            实验方法原理 NK细胞存在于人或动物外周血、脾脏、淋巴结和骨髓中,能杀伤某些肿瘤细胞、病毒感染靶细胞,无需抗原或有丝分裂原刺激,亦不依赖抗体或补体,在机体杀伤肿瘤、防御感染及免疫调节中发挥重要作用。    LAK是NK或T细胞在体外高剂量IL

自然杀伤细胞和淋巴因子激活杀伤细胞的杀伤功能实验

            实验方法原理 NK细胞存在于人或动物外周血、脾脏、淋巴结和骨髓中,能杀伤某些肿瘤细胞、病毒感染靶细胞,无需抗原或有丝分裂原刺激,亦不依赖抗体或补体,在机体杀伤肿瘤、防御感染及免疫调节中发挥重要作用。    LAK是NK或T细胞在体外高剂量IL

杀伤细胞功能的检测

实验方法原理 NK细胞存在于人或动物外周血、脾脏、淋巴结和骨髓中,能杀伤某些肿瘤细胞、病毒感染靶细胞,无需抗原或有丝分裂原刺激,也不依赖抗体或补体,在机体杀伤肿瘤、防御感染及免疫调节中发挥重要作用。LAK是NK或T细胞在体外高剂量IL-2诱导下,获得能杀伤NK抵抗的肿瘤细胞的功能,在过继免疫治疗肿瘤

杀伤细胞功能的检测实验

实验方法原理NK细胞存在于人或动物外周血、脾脏、淋巴结和骨髓中,能杀伤某些肿瘤细胞、病毒感染靶细胞,无需抗原或有丝分裂原刺激,也不依赖抗体或补体,在机体杀伤肿瘤、防御感染及免疫调节中发挥重要作用。LAK是NK或T细胞在体外高剂量IL-2诱导下,获得能杀伤NK抵抗的肿瘤细胞的功能,在过继免疫治疗肿瘤中

关于NK细胞的来源介绍

  NK细胞确切的来源还不十分清楚,一般认为直接从骨髓中衍生,其发育成熟依赖于骨髓的微环境。小鼠和人的体外实验表明,胸腺细胞在体外IL-2等细胞因子存在条件下培养也可诱导出NK细胞。小鼠脾脏在体内IL-3诱导下可促进NK细胞的分化。NK细胞主要分布于外周血中,占PBMC 5~10%,淋巴结和骨髓中也

NK细胞的抑制和激活

NK细胞没有主开关,它们的激活是激活性和抑制性受体相互作用以及免疫检查点的结果(图2)。因此,激活受体直接与转化细胞上过表达的配体相互作用,使NK细胞具有识别和杀伤肿瘤细胞的能力,而不考虑其HLA-I的表达。为了防止NK细胞介导的攻击,健康的宿主细胞表达高水平的MHC-1。事实上,在成熟的NK细胞中

自然杀伤细胞NK的表型

   与T细胞、B细胞相比,NK细胞表面标志的特异性是相对的。人NK细胞mIg-,部分NK细胞CD2、CD3和CD8阳性,表达IL-2受体β链(P75,CD122),CD11b/CD18阳性。目前常用检测NK细胞的标记有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1(见表7

自然杀伤细胞NK的功能

  (一)自然杀伤活性  由于NK细胞的杀伤活性无MHC限制,不依赖抗体,因此称为自然杀伤活性。NK细胞浆丰富,含有较大的嗜天青颗粒,颗粒的含量与NK细胞的杀伤活性呈正相关。NK细胞作用于靶细胞后杀伤作用出现早,在体外1小时、体内4小时即可见到杀伤效应。NK细胞的靶细胞主要有某些肿瘤细胞(包括部分细

NK细胞培养与优化

  因NK细胞是一种比较难培养的细胞。培养过程会涉及很多问题,如:细胞接种密度如何?NK细胞有哪些特性?NK细胞具有哪些形态特征?......       使用的NK细胞培养套装为无饲养层细胞体外扩增技术,以外周血单个核细胞(PBMC)为起始种子细胞,结合多种细胞因子的诱导和刺激,实现NK细胞体外特

自然杀伤细胞NK的活化

   NK细胞可通过多种途径被活化,包括膜表面的CD2、CD3分子和多种细胞因子。  1.通过CD3分子的ζ链 NK细胞不表达TCR/CD3复合物,但部分NK细胞表达CD3ζ链,当用CD16抗体刺激NK细胞活化时,ζ链发生酪氨酸磷酸化,引起胞浆内Ca2+浓度升高,IP3水平增加,促进细胞因子合成和A

NK与NKT细胞的异同

NK与NKT细胞的区别:1、细胞类别:NK是机体重要的免疫细胞;NKT(natural killer T)细胞是一群细胞表面既有T细胞受体TCR,又有NK细胞受体的特殊T细胞亚群。2、细胞作用:NK不仅与抗肿瘤、 抗病毒感染和免疫调节有关,而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生,识别靶细

自然杀伤细胞NK细胞的活化途径

通过CD3分子的ζ链NK细胞不表达TCR/CD3复合物,但部分NK细胞表达CD3ζ链,当用CD16抗体刺激NK细胞活化时,ζ链发生酪氨酸磷酸化,引起胞浆内Ca2+ 浓度升高,IP3水平增加,促进细胞因子合成和ADCC作用。通过CD2分子CD2与CD58相互作用或用CD2 McAb刺激可活化NK细胞,

外周血自然杀伤细胞(NK)细胞的检测

外周血自然杀伤细胞(NK)细胞的检测             实验步骤