杀伤细胞功能的检测实验
实验方法原理NK细胞存在于人或动物外周血、脾脏、淋巴结和骨髓中,能杀伤某些肿瘤细胞、病毒感染靶细胞,无需抗原或有丝分裂原刺激,也不依赖抗体或补体,在机体杀伤肿瘤、防御感染及免疫调节中发挥重要作用。LAK是NK或T细胞在体外高剂量IL-2诱导下,获得能杀伤NK抵抗的肿瘤细胞的功能,在过继免疫治疗肿瘤中已得到广泛的应用。通过将同位素51Cr掺入到NK的靶细胞K562(红白细胞白血病细胞)或LAK的靶细胞Libr(黑色素瘤细胞),按一定细胞比例与效应细胞(NK或LAK)孵育4小时,根据细胞上清中靶细胞被杀伤后所释放的51Cr水平计算出杀伤细胞的杀伤活性。实验材料细胞系试剂、试剂盒FCS RPMI 164051Cr仪器、耗材培养瓶培养板CO2孵箱离心机β-液闪仪γ-计数仪实验步骤一、 效应细胞的制备1. NK功能效应细胞可取静止的PBMC,或经不同细胞因子诱导的PBMC。2. LAK功能的效应细胞通常将PBMC或......阅读全文
杀伤细胞功能的检测实验
实验方法原理NK细胞存在于人或动物外周血、脾脏、淋巴结和骨髓中,能杀伤某些肿瘤细胞、病毒感染靶细胞,无需抗原或有丝分裂原刺激,也不依赖抗体或补体,在机体杀伤肿瘤、防御感染及免疫调节中发挥重要作用。LAK是NK或T细胞在体外高剂量IL-2诱导下,获得能杀伤NK抵抗的肿瘤细胞的功能,在过继免疫治疗肿瘤中
杀伤细胞功能的检测
实验方法原理 NK细胞存在于人或动物外周血、脾脏、淋巴结和骨髓中,能杀伤某些肿瘤细胞、病毒感染靶细胞,无需抗原或有丝分裂原刺激,也不依赖抗体或补体,在机体杀伤肿瘤、防御感染及免疫调节中发挥重要作用。LAK是NK或T细胞在体外高剂量IL-2诱导下,获得能杀伤NK抵抗的肿瘤细胞的功能,在过继免疫治疗肿瘤
T细胞杀伤功能的检测
T细胞杀伤功能的检测可以应用于(1)免疫细胞功能测定(2)临床免疫诊断。实验步骤基 本 方案 1 抗 CD3 诱 导 的 T 细胞杀伤实验材 料展开 其他本实验来自「精编免疫学实验指南」作者:J.E.科利根等,译者:曹雪涛等
自然杀伤细胞和淋巴因子激活杀伤细胞的杀伤功能实验
实验方法原理NK细胞存在于人或动物外周血、脾脏、淋巴结和骨髓中,能杀伤某些肿瘤细胞、病毒感染靶细胞,无需抗原或有丝分裂原刺激,亦不依赖抗体或补体,在机体杀伤肿瘤、防御感染及免疫调节中发挥重要作用。 LAK是NK或T细胞在体外高剂量IL-2诱导下,获得能杀伤NK抵抗的肿瘤细胞的功能,在过继免疫治疗肿
自然杀伤细胞和淋巴因子激活杀伤细胞的杀伤功能实验
实验方法原理 NK细胞存在于人或动物外周血、脾脏、淋巴结和骨髓中,能杀伤某些肿瘤细胞、病毒感染靶细胞,无需抗原或有丝分裂原刺激,亦不依赖抗体或补体,在机体杀伤肿瘤、防御感染及免疫调节中发挥重要作用。 LAK是NK或T细胞在体外高剂量IL
自然杀伤细胞和淋巴因子激活杀伤细胞的杀伤功能实验
实验方法原理 NK细胞存在于人或动物外周血、脾脏、淋巴结和骨髓中,能杀伤某些肿瘤细胞、病毒感染靶细胞,无需抗原或有丝分裂原刺激,亦不依赖抗体或补体,在机体杀伤肿瘤、防御感染及免疫调节中发挥重要作用。 LAK是NK或T细胞在体外高剂量IL
自然杀伤细胞(NK)及功能的检测
NK细胞表面至少存在CD2、CD11b、CD11c、CD16、CD56和CD69等多种抗原,但均非NK细胞所特有,因此极少以CD系列抗原为指标鉴定和计数NK细胞,现多检测NK细胞活性,因NK细胞具有细胞介导的细胞毒作用,它能直接杀伤靶细胞。测定人NK细胞活性多以K562细胞株作为靶细胞,而测小
巨噬细胞吞噬功能和杀伤功能的检测
基本方案1 巨噬细胞吞噬功能的检测材 料单核/巨噬细胞:如巨噬细胞株、小鼠腹腔巨噬细胞[单元6.1,需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸盐肉汤],或 人 P B M C (单 元 8.1)平衡盐溶液(balanced salt solution, BSS)细菌(如单核细胞增多
人自然杀伤细胞的功能分析实验
1975年,Herberman 等首次报道自然杀伤(nature
杀伤细胞的功能特点
杀伤细胞(kill cell)是表面具有IgG的Fc受体,当靶器官细胞与相应的IgG结合,可与结合在靶细胞上的IgG的Fc结合,从而使自身活化,释放细胞毒素,裂解靶细胞的一种细胞。
自然杀伤细胞NK细胞的细胞功能
自然杀伤活性由于NK细胞的杀伤活性无MHC限制,不依赖抗体,因此称为自然杀伤活性。NK细胞胞浆丰富,含有较大的嗜天青颗粒,颗粒的含量与NK细胞的杀伤活性呈正相关。NK细胞作用于靶细胞后杀伤作用出现早,在体外1小时、体内4小时即可见到杀伤效应。NK细胞的靶细胞主要有某些肿瘤细胞(包括部分细胞系)、病毒
自然杀伤细胞的功能介绍
自然杀伤活性自然杀伤细胞由于NK细胞的杀伤活性无MHC限制,不依赖抗体,因此称为自然杀伤活性。NK细胞胞浆丰富,含有较大的嗜天青颗粒,颗粒的含量与NK细胞的杀伤活性呈正相关。NK细胞作用于靶细胞后杀伤作用出现早,在体外1小时、体内4小时即可见到杀伤效应。NK细胞的靶细胞主要有某些肿瘤细胞(包括部分细
自然杀伤细胞NK的功能
(一)自然杀伤活性 由于NK细胞的杀伤活性无MHC限制,不依赖抗体,因此称为自然杀伤活性。NK细胞浆丰富,含有较大的嗜天青颗粒,颗粒的含量与NK细胞的杀伤活性呈正相关。NK细胞作用于靶细胞后杀伤作用出现早,在体外1小时、体内4小时即可见到杀伤效应。NK细胞的靶细胞主要有某些肿瘤细胞(包括部分细
自然杀伤细胞特点及功能
分布于脾和外周血中,CD16和CD56为其特异性标志。可非特异性直接杀伤肿瘤细胞和病毒的靶细胞。
外周血自然杀伤细胞(NK)细胞的检测
外周血自然杀伤细胞(NK)细胞的检测 实验步骤
外周血自然杀伤细胞(NK)细胞的检测
实验步骤展开
外周血自然杀伤细胞(NK)细胞的检测
实验步骤 展开
靶细胞杀伤实验总论-1
细胞介导的免疫反应(cell mediated immune, CMI)在机体抗感染及抗肿瘤免疫、移植排斥反应和自身免疫病中发挥重要的作用。CMI的主要效应细胞之一为细胞毒T淋细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)。目前在医学基础与临床研究中重视CTL活性测定,将其作为
靶细胞杀伤实验总论-2
2、流式细胞标记法 (1)PE-mAb/FITC-annexin V 荧光标记法 正常细胞的磷酯酰丝氨(phosphatidylserine,PS)位于细胞膜内表面,细胞凋亡时翻转露于膜外侧,可与annexinV高亲合力结合。研究发现PS外翻为细胞凋亡的早期事件,先于膜通透性增加所51Cr或其他染料
靶细胞杀伤实验:LDH法
一、效应细胞的制备 激惹5天后,于无菌条件下取出受鼠引流的腹股沟淋巴结,100目钢网研磨,调整细胞浓度为2×107.ml-1。台盼蓝色要求存活率>95%。 二、靶细胞的制备 P815细胞株系DBA/2小鼠的肥大细胞瘤细胞株。连续传代培养,调整细胞浓度为2×105/ml或3.33×1
自然杀伤细胞的主要功能
自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)是机体重要的免疫细胞,不仅与抗肿瘤、 抗病毒感染和免疫调节有关,而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生,能够识别靶细胞、杀伤介质。
细胞因子诱导的杀伤细胞的生理功能
因为CIK细胞可以杀死自然杀伤细胞或LAK细胞无法裂解的细胞,所以具备独特的功能。CIK细胞同时具备T细胞和NK细胞样表型特征,二者功能的独特组合,产生强有力而又广泛的不受MHC限制的抗肿瘤细胞毒性,具备广谱抗肿瘤效果。CIK细胞识别肿瘤的确切机制和其靶向杀伤作用尚不完全清楚。NK样细胞除了通过TC
靶细胞杀伤实验:AnnexiV标记法
正常细胞的磷酯酰丝氨(phosphatidylserine,PS)位于细胞膜内表面,细胞凋亡时翻转露于膜外侧,可与annexinV高亲合力结合。研究发现PS外翻为细胞凋亡的早期事件,先于膜通透性增加所51Cr或其他染料的释放。将效应细胞与靶细胞充分共育后,用PE结合的效应细胞特异性单克隆抗体(如CD
靶细胞杀伤实验:CFSE/PI法
做免疫学特别是肿瘤学实验,总免不了要测淋巴细胞或其他细胞对肿瘤细胞的杀伤,老外最常用的是Cr51放射实验,但这个方法在国内的不少地方都不能做,而MTT这个方法又太老了,而且也不准确,那么替代方法就用流式细胞术,又方便,又准确。 1、计数靶细胞,并加入CFSE,使CFSE终浓度达到2u
靶细胞杀伤实验:CFSE/PI法
做免疫学特别是肿瘤学实验,总免不了要测淋巴细胞或其他细胞对肿瘤细胞的杀伤,老外最常用的是Cr51放射实验,但这个方法在国内的不少地方都不能做,而MTT这个方法又太老了,而且也不准确,那么替代方法就用流式细胞术,又方便,又准确。1、计数靶细胞,并加入CFSE,使CFSE终浓度达到2uM,37度30分钟
猕猴自然杀伤细胞亚群的功能分析
1975年,Herberman 等首次报道自然杀伤(nature killer,NK)细胞。该类细胞具有淋巴细胞形态,但不表达T、B细胞特有的TCR和BCR。对于称其为自然杀伤细胞,是因为NK细胞无需抗原预先致敏就能破坏靶细胞,且无MHC限制性,应答速度快,在免疫应答的早期即可发挥作用。NK
NK细胞的自然杀伤活性功能介绍
由于NK细胞的杀伤活性无MHC限制,不依赖抗体,因此称为自然杀伤活性。NK细胞胞浆丰富,含有较大的嗜天青颗粒,颗粒的含量与NK细胞的杀伤活性呈正相关。NK细胞作用于靶细胞后杀伤作用出现早,在体外1小时、体内4小时即可见到杀伤效应。NK细胞的靶细胞主要有某些肿瘤细胞(包括部分细胞系)、病毒感染细胞
自然杀伤细胞的自然杀伤活性简介
由于NK细胞的杀伤活性无MHC限制,不依赖抗体,因此称为自然杀伤活性。NK细胞胞浆丰富,含有较大的嗜天青颗粒,颗粒的含量与NK细胞的杀伤活性呈正相关。NK细胞作用于靶细胞后杀伤作用出现早,在体外1小时、体内4小时即可见到杀伤效应。NK细胞的靶细胞主要有某些肿瘤细胞(包括部分细胞系)、病毒感染细胞
靶细胞杀伤实验:Cr51法
一、原理 用Na2 51 CrO 4 标记靶细胞,若待检效应细胞能杀伤靶细胞,则51 Cr( 铬) 从靶细胞内释出。以γ计数仪测定释出的51 Cr 放射活性,靶细胞溶解破坏越多,51 Cr 释放就越多,上清液的放射活性也就越高,应用公式可计算出待检效应细胞的杀伤活性。 二、步骤 (以CTL杀伤肿
流式细胞术测效靶细胞杀伤实验
做免疫学特别是肿瘤学实验,总免不了要测淋巴细胞或其他细胞对肿瘤细胞的杀伤,老外最常用的是Cr51放射实验,但这个方法在国内的不少地方都不能做,而MTT这个方法又太老了,而且也不准确,那么替代方法就用流式细胞术,又方便,又准确,这也是偶参照老外的方法吧。1 计数靶细胞,并加入CFSE,使CFSE终浓度