125IUdR释放试验测定NK细胞活性

自然杀伤(NK)细胞参与了机体免疫防御的第一道防线,主要用于(1)免疫监视系统中抗肿瘤抗病毒(2)免疫调控。实验方法原理25I-UdR(125I-2′脱氧尿嘧啶核苷)是胸腺嘧啶核苷的类似物,作为DNA合成的前体物,能相当特异地取代胸腺嘧啶核苷掺入到细胞核DNA链上。因此,可用125I-UdR标记体外传代培养的肿瘤细胞作为靶细胞,以外周血分离的单个核细胞或小鼠脾细胞作为效应细胞,进行体外NK细胞活性检测。被效应细胞杀伤的靶细胞溶解后可释放125 I-UdR,用γ-计数仪测定其放射性强度,以125I-UdR释放百分率表示NK细胞的活性。实验材料YAC-1细胞试剂、试剂盒125I-UdR(125I-2′脱氧尿嘧啶核苷)胰蛋白酶DNA酶5-氟脱氧尿嘧啶核苷RPMI-1640培养液仪器、耗材塑料试管γ-计数仪离心机实验步骤一、材料1. 125I-UdR :125I的物理半寿期为59.7d。2. 胰蛋白酶:用无Ca2+、Mg2+的Hanks......阅读全文

125IUdR释放试验测定NK细胞活性

自然杀伤(NK)细胞参与了机体免疫防御的第一道防线,主要用于(1)免疫监视系统中抗肿瘤抗病毒(2)免疫调控。实验方法原理25I-UdR(125I-2′脱氧尿嘧啶核苷)是胸腺嘧啶核苷的类似物,作为DNA合成的前体物,能相当特异地取代胸腺嘧啶核苷掺入到细胞核DNA链上。因此,可用125I-UdR标记体外

125IUdR释放试验测定NK细胞活性

实验方法原理25I-UdR(125I-2′脱氧尿嘧啶核苷)是胸腺嘧啶核苷的类似物,作为DNA合成的前体物,能相当特异地取代胸腺嘧啶核苷掺入到细胞核DNA链上。因此,可用125I-UdR标记体外传代培养的肿瘤细胞作为靶细胞,以外周血分离的单个核细胞或小鼠脾细胞作为效应细胞,进行体外NK细胞活性检测。被

125IUdR释放试验测定NK细胞活性

            实验方法原理 25I-UdR(125I-2′脱氧尿嘧啶核苷)是胸腺嘧啶核苷的类似物,作为DNA合成的前体物,能相当特异地取代胸腺嘧啶核苷掺入到细胞核DNA链上。因此,可用125I-UdR标记体外传代培养的肿瘤细胞作为靶细胞,以外周血分离的单个

NK细胞活性测定实验——放射性核素释放

实验方法原理用放射性核素标记靶细胞,当靶细胞受到破坏时,放射性核素被释放出来,通过测定释放或残留在未被破坏细胞内的放射性核素放射活性,即可计算和推测杀伤细胞的细胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本实验采用51Cr释放法检测人NK细胞活性。实验材料靶细胞试剂、试剂盒

NK细胞活性测定实验——乳酸脱氢酶释放法

实验方法原理乳酸脱氢酶(LDH)存在于细胞内,正常情况下,不能透过细胞膜。当细胞受到损伤时,由于细胞膜通透性改变,LDH可从细胞内释放至培养液中。释放出来的LDH再催化乳酸的过程中,使氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)变成还原型辅酶(NADH2),后者再通过递氢体-吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化氮唑

NK细胞活性测定实验

实验方法原理 用放射性核素标记靶细胞,当靶细胞受到破坏时,放射性核素被释放出来,通过测定释放或残留在未被破坏细胞内的放射性核素放射活性,即可计算和推测杀伤细胞的细胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本实验采用51Cr释放法检测人NK细胞活性。实验材料 靶细胞试剂、试

关于NK细胞活性测定(NK)的基本介绍

  自然杀伤(NK)细胞是一群异质性多功能的免疫细胞,是与特异性免疫应答无关的自然毒杀伤细胞。它对体内多种细胞,特别是T、B淋巴细胞有调节作用。它所介导的裂解细胞作用不受主要组织相溶性复合体的限制。自然杀伤细胞不仅对癌细胞,对病毒、胞内寄生菌和老化变异细胞也具有极强的清除作用。NK细胞起杀伤作用不需

NK细胞活性测定:LDH法

实验方法原理活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下,LDH不能透过细胞膜,当细胞受到NK细胞的杀伤后,LDH释放到细胞外。LDH 可使乳酸锂脱氢,进而使NAD还原成NADH,后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT 接受H+被还原成紫红色甲月赞类化合物。在酶标仪上

LDH法测定NK细胞活性

一、原理活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下,LDH不能透过细胞膜,当细胞受到NK细胞的杀伤后,LDH释放到细胞外。LDH 可使乳酸锂脱氢,进而使NAD还原成NADH,后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT 接受H+被还原成紫红色甲月赞类化合物。在酶标仪上用4

NK细胞活性测定:LDH法

实验概要活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下,LDH不能透过细胞膜,当细胞受到NK细胞的杀伤后,LDH释放到细胞外。LDH  可使乳酸锂脱氢,进而使NAD还原成NADH,后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT  接受H+被还原成紫红色甲月赞类化合物。在酶标仪上

简述NK细胞活性测定(NK)的检查过程

  一、NK细胞活性测定(NK)的检查过程:  取传代后24h生长良好的YAC-1细胞(存活率>95%)按1×106/mL YAC-1细胞悬液加3H-TdR 10uCi进行标记,于37℃、5%CO2培养箱中培养2h,每30min振荡1次。标记后的细胞用培养液洗涤3次,重悬于培养液中,使细胞浓度为1×

免疫学实验NK细胞活性测定(NK)介绍

  NK细胞活性测定(NK)介绍:  自然杀伤(NK)细胞是一群异质性多功能的免疫细胞,是与特异性免疫应答无关的自然毒杀伤细胞。它对体内多种细胞,特别是T、B淋巴细胞有调节作用。它所介导的裂解细胞作用不受主要组织相溶性复合体的限制。自然杀伤细胞不仅对癌细胞,对病毒、胞内寄生菌和老化变异细胞也具有极强

简述NK细胞活性测定(NK)的临床意义

  一、NK细胞活性测定(NK)的临床意义:  异常结果:受试样品组的NK细胞活性显著高于对照组的NK细胞活性,可判定该项试验结果阳性。活性升高,常见于病毒感染的早期,Down综合征,接受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增强剂治疗患者。活性降低,常见于恶性肿瘤、重症联合免疫缺陷病,AIDS和免疫抑制

什么是NK细胞活性测定呢

  NK细胞具有ADCC,能直接杀伤肿瘤细胞,故将单个核细胞与肿瘤细胞共同培养,肿瘤细胞存活率低,NK细胞的活性则高。测定人NK细胞活性的靶细胞多用K562细胞株,而测定小鼠NK细胞活性则常采用YAC-1细胞株。  体外检测NK细胞活性的方法有形态学法、酶释放法、放射性核素释放法、化学发光法、流式细

临床化学检查方法介绍NK细胞活性测定(NK)介绍

NK细胞活性测定(NK)介绍:  自然杀伤(NK)细胞是一群异质性多功能的免疫细胞,是与特异性免疫应答无关的自然毒杀伤细胞。它对体内多种细胞,特别是T、B淋巴细胞有调节作用。它所介导的裂解细胞作用不受主要组织相溶性复合体的限制。自然杀伤细胞不仅对癌细胞,对病毒、胞内寄生菌和老化变异细胞也具有极强的清

乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞活性实验

实验方法原理乳酸脱氢酶(LDH)是活细胞胞浆内含酶之一。在正常情况下,不能透过细胞膜。当靶细胞受到效应细胞的攻击而损伤时,细胞膜通透性改变,LDH可释放至介质中,释放出来的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的过程中,使氧化型辅酶I(NAD+)变成还原型辅酶I (NADH2),后者再通过递氢体-吩嗪二甲酯硫酸

乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞活性实验

            实验方法原理 乳酸脱氢酶(LDH)是活细胞胞浆内含酶之一。在正常情况下,不能透过细胞膜。当靶细胞受到效应细胞的攻击而损伤时,细胞膜通透性改变,LDH可释放至介质中,释放出来的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的过程中,使氧化型辅酶I(NAD+)变成

乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞活性实验

实验方法原理 乳酸脱氢酶(LDH)是活细胞胞浆内含酶之一。在正常情况下,不能透过细胞膜。当靶细胞受到效应细胞的攻击而损伤时,细胞膜通透性改变,LDH可释放至介质中,释放出来的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的过程中,使氧化型辅酶I(NAD+)变成还原型辅酶I (NADH2),后者再通过递氢体-吩嗪

乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞活性实验

            实验方法原理 乳酸脱氢酶(LDH)是活细胞胞浆内含酶之一。在正常情况下,不能透过细胞膜。当靶细胞受到效应细胞的攻击而损伤时,细胞膜通透性改变,LDH可释放至介质中,释放出来的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的过程中,使氧化型辅酶I(NAD+)变成

NK细胞活性测定:LDH法原理和实验步骤

一、原理 活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下,LDH不能透过细胞膜,当细胞受到NK细胞的杀伤后,LDH释放到细胞外。LDH 可使乳酸锂脱氢,进而使NAD还原成NADH,后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT 接受H+被还原成紫红色甲月赞类化合物。在酶

NK细胞活性检测实验步骤

  细胞毒检测技术包括补体依赖细胞毒试验、NK细胞介导的细胞毒试验和特异性CTL活性检测,常用的实验技术有后两种。NK细胞(natural killer cell)是在天然免疫系统发挥主要作用的效应细胞,可直接杀伤病毒感染的靶细胞和某些肿瘤细胞。而细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymp

NK细胞活性测定:同位素法原理和实验步骤

一、原理 将用同位素3H-TdR标记的靶细胞与淋巴细胞共同培养时,靶细胞可被NK细胞杀伤。同位素便从被杀伤的靶细胞中释放出来,其释放的量与NK细胞活性成正比。通过测定靶细胞3H-TdR的释放率即可反应NK细胞的活性。 二、仪器和材料 液体闪烁仪、多头细胞取集器、二氧化碳培养箱、3H-TdR、RPMI

NK细胞的自然杀伤活性功能介绍

  由于NK细胞的杀伤活性无MHC限制,不依赖抗体,因此称为自然杀伤活性。NK细胞胞浆丰富,含有较大的嗜天青颗粒,颗粒的含量与NK细胞的杀伤活性呈正相关。NK细胞作用于靶细胞后杀伤作用出现早,在体外1小时、体内4小时即可见到杀伤效应。NK细胞的靶细胞主要有某些肿瘤细胞(包括部分细胞系)、病毒感染细胞

细胞活性测定

1. 4细胞活性测定原理:根据活细胞线粒体内的脱氢酶可将试剂中的有效成分转变为有颜色的Formazan,并可被酶标仪检测,间接反应活细胞数量。对于细胞增殖、凋亡、生长受抑等可通过细胞数量间接得知的生物学改变,采用细胞活性测定可以提供可应用和参考的数据。应用:用于生物活性因子的活性检测、大规模药物筛选

PNAS:III型干扰素助力NK细胞发挥最佳活性

  近日, 来自澳大利亚的科学家在国际学术期刊PNAS发表了一项最新研究进展,他们利用敲除小鼠模型发现III型干扰素对NK细胞发挥效应功能具有重要调节作用。  自然杀伤细胞是正常情况下存在于循环系统中的固有淋巴细胞,具有对抗肿瘤起始转移,促进炎症过程中免疫系统功能执行的作用。到目前为止,虽然关于I型

药物对动物体内NK细胞活性的影响实验

实验方法原理 肺癌是最常见的严重严胁人类健康和生命的恶性肿瘤之一, 机体免疫功能低下,与肺癌的发生发展密切相关。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 RPMI1640 培养基中止液Hank. s曲拉通X-100仪器、耗材 酶联免疫监测仪96 孔24 孔平底培养板离心沉淀机实验步骤 1.  动物分组及用药(1)

药物对动物体内NK细胞活性的影响实验

瘤细胞悬液皮下接种法实验方法原理肺癌是最常见的严重严胁人类健康和生命的恶性肿瘤之一, 机体免疫功能低下,与肺癌的发生发展密切相关。实验材料小鼠试剂、试剂盒RPMI1640 培养基中止液Hank. s曲拉通X-100仪器、耗材酶联免疫监测仪96 孔24 孔平底培养板离心沉淀机实验步骤1.  动物分组及

细胞活性检测化学发光细胞活性测定

ATP发光法ATP是细胞的能量直接来源,ATP发光法是通过检测细胞内ATP含量来分析细胞增殖。市面上的原理是利用外源的萤火虫荧光素(Luciferin)与荧光素酶(Luciferase),以细胞内含的ATP为能量来源,发生氧化反应产生生物冷光,因此可通过监测冷光光度,来对应ATP含量并判断细胞增殖状

Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验

            实验方法原理 Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quen

Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验

实验方法原理 Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quench试剂(一种以Ca2+螯合的小牛血红蛋白主要成分、还含溴化