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成纤维细胞的分离

实验方法原理下述的通用操作方案适用于小鼠、大鼠、仓鼠和鸡胚胎。选择大约一半足孕时间的胚胎最好,10~13天龄胚胎含有最大数量的未分化的间质细胞,成纤维细胞可从这些细胞衍生获得。图4.1显示了小鼠胚胎的取出和解剖,图4.2显示的是鸡胚胎的取出过程。实验步骤1) 胚胎的分离。适用哺乳动物(仓鼠、小鼠和大鼠)a. 采用认可的方案处死啮齿动物。b. 立即在无菌超净台内用 70% 乙醇擦洗整个动物。若可能,置紫外灯下照射 5 分钟。c. 用无菌的镊了和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用无菌镊子将皮肤扯向后腿。d. 用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部,取出含有胚胎的子宮,置于无菌的培荞皿上。e. 剔除胚胎周围的包膜,将胚胎放于无菌的含有无菌 PBS 的烧瓶中。f. 漂洗胚胎,去掉 PBS。继续用 PBS 漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。适用鸡胚胎a. 用 70% 乙醇擦洗鸡蛋壳。b. 用无菌剪刀轻敲鸡蛋的圆端,轻轻去除蛋壳露出气囊。c. 用无菌摄子去......阅读全文

一文了解成纤维细胞研究

  本文中,小编整理了多篇研究成果,共同解读科学家们在成纤维细胞研究领域取得的新进展,分享给大家!  图片来源:Brian Aguado  【1】Science子刊:经导管主动脉瓣置换术介导肌成纤维细胞失活,促进心脏重塑  doi:10.1126/scitranslmed.aav3233  在一项新

大鼠淋巴成纤维细胞提取物的应用!

  一、背景   大鼠淋巴成纤维细胞提取物是从大鼠原代淋巴成纤维细胞提取的,大鼠原代淋巴成纤维细胞从正常大鼠淋巴组织制备可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。   大鼠淋巴成纤维细胞分离自正常大鼠淋巴节,成纤维细胞是胚胎中胚层起源的间叶细胞。它们被广泛地用于细胞和分

肿瘤细胞培养

肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置,首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。一、组织培养肿瘤细胞生物学特性肿瘤细胞与体内正

《Cell》文章: 首次鉴定肿瘤微环境特殊成纤维细胞亚群

   来自中山大学,孙逸仙纪念医院,广东省恶性肿瘤表观遗传与基因调控重点实验室的研究人员发表了题为“CD10+GPR77+ Cancer-Associated Fibroblasts Promote Cancer Formation and Chemoresistance by Sustaining

科学家鉴别出诱发风湿性关节炎的两类成纤维细胞

  成纤维细胞是机体所有组织中存在的一种细胞,其能通过分泌胶原蛋白和组成包含细胞外基质等材料的组分来维持结缔组织的结构完整性,尽管其在维持健康组织的架构上扮演着关键角色,但如今研究人员越来越意识到,成纤维细胞或会在一系列自身免疫性疾病中诱发炎症及组织的损伤,比如风湿性关节炎、骨质侵蚀和关节软骨的破坏

细胞的纯化的两种方法

细胞的纯化一般分为两种,即自然纯化很人工纯化.常用的纯化方法有,酶消化法,细胞因子依赖纯化法,机械刮除法,反复贴壁法,电烙筛选法. 体外培养的细胞源于人或动物或胚胎组织,体内的细胞都是混杂生长,每一种组织都有血管和间叶组织,因此,来源于上述组织的培养材料的原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有

细胞的纯化的两种方法

细胞的纯化的两种方法细胞的纯化一般分为两种,即自然纯化很人工纯化.常用的纯化方法有,酶消化法,细胞因子依赖纯化法,机械刮除法,反复贴壁法,电烙筛选法. 体外培养的细胞源于人或动物或胚胎组织,体内的细胞都是混杂生长,每一种组织都有血管和间叶组织,因此,来源于上述组织的培养材料的原代细胞、传代

原代细胞的培养与建系-3

下面为美国标准细胞库或细胞银行(ATCC)入库细胞的基本要求:   (1)培养简历 组织来源日期、物种、组织来源、性别、年龄、供体正常或异常健康状态,细胞已传代数等。   (2)冻存液 培养基和保护剂名称。 &

原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化

PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。在体外培养原代细胞时,为了保证实验结果的可靠性、一致性、稳定性、和可重复性,要求采用

宋尔卫等揭示成纤维细胞亚群调控肿瘤耐药新机制

  中山大学孙逸仙纪念医院宋尔卫、苏士成团队率先运用细胞膜蛋白CD10和GPR77为化疗耐受相关的成纤维细胞亚群贴上“身份标签”。相关研究1月25日在线发表于《细胞》。  “岩”是中医对癌症的描述,祖辈们很早就认识到“质硬如石”是恶性肿瘤的重要临床特征。然而,肿瘤细胞实际上并不硬,质硬是由于肿瘤微环

宋尔卫等揭示成纤维细胞亚群调控肿瘤耐药新机制

  中山大学孙逸仙纪念医院宋尔卫、苏士成团队率先运用细胞膜蛋白CD10和GPR77为化疗耐受相关的成纤维细胞亚群贴上“身份标签”。相关研究1月25日在线发表于《细胞》。  “岩”是中医对癌症的描述,祖辈们很早就认识到“质硬如石”是恶性肿瘤的重要临床特征。然而,肿瘤细胞实际上并不硬,质硬是由于肿瘤微环

肿瘤细胞培养实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 培养液Hanks胰蛋白酶EDTA胶原酶仪器、耗材 培养瓶离心管实验步骤 一、成纤维细胞排除法1.  机械刮除法 是用不锈钢丝末端插有橡胶刮头(用胶塞剪成三角形插以不锈钢丝),或裹少许脱脂棉制成,装入试管中高压灭菌后备用(也可用特制电热烧灼器刮除)。刮除

肿瘤细胞原代培养实验——酶消化法

实验方法原理本法是利用成纤维细胞对胶原酶较为敏感的特点,通过消化进行选择。可用0.5mg/ml的胶原酶消化处理,边消化边在倒置显微镜下窥视,当发现成纤维细胞被除掉后,即终止消化;用Hanks洗涤处理一次后,更换新培养液,继续培养,可获纯净肿瘤细胞。如成纤维细胞未被除净,可再次重复。实验材料组织试剂、

组织培养肿瘤细胞生物学特性和肿瘤细胞细胞系的培养-2

2.培养基: 肿瘤细胞对培养基的要求不如正常细胞严格,一般常用的 RPMIl640、  DMEM、Mc-Coy5A等培养基等皆可用于肿瘤细胞培养。肿瘤细胞对血清的需求比正常细胞低,正常细胞培养不加血清不能生长,肿瘤细胞在低血清培养基中也能生长。肿瘤细胞对培养环境适应性较大,是因肿瘤细胞有自

exFoxp3 Th17细胞对自身免疫关节炎的作用机制研究

  “我是谁?我从哪里来?我要到哪里去?” 是柏拉图提出的经典哲学三大问,小编每天早上起床前都要用这个问题叫醒我沉睡的灵魂。在本期带来的经典文献回顾中,请跟随本文作者一起听一听ex Foxp3 TH17细胞的深刻哲学独白吧!   一、故事背景   自身免疫性疾病通常由调节性T细胞(Treg细胞)

实用哺乳动物细胞培养手册(中)

  细胞培养环境   1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作

实用哺乳动物细胞培养手册(中)

细胞培养环境1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规

exFoxp3 Th17细胞对自身免疫关节炎的作用机制研究(二)

第三问 怎么成为我小编:等等等等,不按逻辑出牌呢,不是应该问我要去哪么我:去去,别打岔,我有更深刻的问题要思考,我是怎么成为现在这个样子的?这对理解关节炎发生的机制很重要上述实验结果中可以发现ex Foxp3 TH17细胞在炎症关节中聚集,作者假设关节中存在细胞与Foxp3+T细胞反应,促使其转变为

肿瘤细胞培养实验

肿瘤细胞培养实验 提高肿瘤细胞培养存活率和生长率的实验             实验方法原理 肿瘤组织及细胞在模

肿瘤细胞培养实验

肿瘤细胞培养实验可用于:(1)研究肿瘤的发生机理;(2)研究生物学行为;(3)研究抗肿瘤药物。实验方法原理肿瘤组织及细胞在模拟体内生长环境的条件下、与一般组织细胞一样、也能够生长发育乃至繁殖、为研究癌变机理、抗癌药检测、肿瘤分子生物学提供大量的实验材料。实验材料肿瘤组织试剂、试剂盒培养液Hanks胰

实用哺乳动物细胞培养手册(四)

细胞培养无菌操作基本技术无菌操作技术分为三个部分:工作环境及表面的处理,细胞培养所用玻璃及塑料制品的处理及培养液与培养细胞的处理。工作环境的处理 使用层流超净工作台是最经济有效的手段。超净工作台正常工作时,向下的气流可阻挡外界空气污染物进入超净台。(1)实验前,无菌室及无菌操作台用紫外灯照射 30-

一项对压力性尿失禁患者阴道壁成纤维细胞外泌体的研究

  压力性尿失禁(SUI)是指腹压增加时尿液的无意识泄漏,是一种女性常见的泌尿学问题,中国20岁以上成年女性的患病率达18.9%。SUI业已成为一项突出的医疗问题和备受关注的社会问题,大大增加了全球卫生系统的经济负担。外泌体是一种直径约30~100 nm,由双层脂膜包裹的分泌性囊泡。目前已知几乎所有

原代细胞分离与培养,你都掌握了吗?

  对于大部分科研人员来说,研究中一般用到均是现成的细胞系/株,我们只需要:进行细胞传代和保种。然而,这些细胞系常常由于体外长期培养,而丢失原有生物学特性,对药物处理的反应差距越来越大。因此,原代细胞的地位日渐凸显,Paper中若有了原代细胞的数据都会添色不少。然而,就小编亲生经历,原代细胞分离着实

基因传递到肌肉实验

实验材料 新生的小鼠试剂、试剂盒 乙醇PBS胶原蛋白酶 分散酶 氯化钙溶液F-10肌肉原代细胞培养基分化培养基仪器、耗材 用于断头术的器具或者是用于二氧化碳吸人的装置锋利的弯手术剪(灭菌) 组织培养板灭菌的剃刀刀片尼龙网桌面离心机胶原包被的组织培养板带相位光轴的倒置显微镜实验步骤 1.用断头术或者二

小鼠肌肉原代细胞的分离和生长(没有细胞分类)

实验材料新生的小鼠试剂、试剂盒乙醇PBS胶原蛋白酶 分散酶 氯化钙溶液F-10肌肉原代细胞培养基分化培养基仪器、耗材用于断头术的器具或者是用于二氧化碳吸人的装置锋利的弯手术剪(灭菌)组织培养板灭菌的剃刀刀片尼龙网桌面离心机胶原包被的组织培养板带相位光轴的倒置显微镜实验步骤1.用断头术或者二氧化碳吸入

细胞的纯化方法介绍(自然纯化和人工纯化)(二)

(1)上皮细胞与成纤维细胞的分离纯化: 两者在胰蛋白酶的作用下,由于成纤维细胞先脱壁,二上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁,特别是在原代细胞初次传代和早期传代中两种差别尤为明显,故可采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开,方法步骤如下。 采用常规消化传代方式将0.25%胰蛋白酶注入培养

肿瘤细胞的培养(三)

三、成纤维细胞排除法 1.机械刮除法: 是用不锈钢丝末端插有橡胶刮头(用胶塞剪成三角形插以不锈钢丝)、或裹少许脱脂棉制成,装入试管中高压灭菌后备用(也可用特制电热烧灼器刮除)。刮除程序为: (1)标记:镜下观察,用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位; (2)刮除:弃掉培养液,把无菌胶刮伸

新生大鼠心肌细胞原代培养实验

原代培养技术             实验方法原理 将大鼠的心肌细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散

新生大鼠心肌细胞原代培养实验

原代培养技术             实验方法原理 将大鼠的心肌细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散

新生大鼠心肌细胞原代培养实验——原代培养技术

新生大鼠心肌细胞原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)用于细胞形态研究;(3)应用于临床研究。实验方法原理将大鼠的心肌细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料SD 乳鼠试剂、试剂盒低糖 DMEM、胰酶EDTA青链