细胞运送实验——充液法
实验方法原理当前培养细胞既可可在国内相互寄赠，也可进行国际间的交流，为此要有运输细胞的方法。装运方法有两种：一是用液氮或干冰保存，效果较好，但需用特制容器如小液氮罐等，又因液氮和干冰蒸发均能较快，适于空运，比较麻烦；另为充液法，比较简便。实验材料细胞试剂、试剂盒培养液仪器、耗材培养瓶实验步骤充液法，装运过程如下1. 选生生状态良好的细胞，待达80%或90%汇合时，去掉旧培养液换入新培养液，量要达到培养瓶的颈部（过满易污染），保留少许空间，塞紧瓶塞；空气过多运输中气泡运动易使细胞脱落；2. 妥善包装和运送；一般在不超过四五天到达目的地的情况下，对细胞活力无严重影响；3. 到达后，倒出大部分培养液，保留正常量，置37 ℃培养，次日传代。......阅读全文
间充质干细胞（MSCs）鉴定
实验方法原理 实验材料 MSCs试剂、试剂盒 无菌CCMPBSA0.85%台盼蓝盐溶液胰蛋白酶 EDTA仪器、耗材 聚丙烯离心管15 ml或50 ml塑料组织培养皿直径15 cm移液器枪头非灭菌结晶紫溶液蒸馏水改良的Neubauer血细胞计数器移液器实验步骤 (a)进行MSCs收集和传代。对悬液中的
间充质干细胞的特性
间充质干细胞是一种多能干细胞，它具有干细胞的所有共性，即自我更新和多向分化能力。在临床应用也最多，与造血干细胞联合应用，可以提高移植的成功率，加速造血重建。当患者接受大剂量化疗后，将间充质干细胞与造血干细胞一同输入，可明显加速患者血细胞恢复时间，且安全无不良反应。
间充质干细胞的复苏
实验概要间充质干细胞的复苏主要试剂间充质干细胞培养液主要设备15 mL离心管、水浴锅、培养箱、离心机实验步骤（1）在15 mL离心管中准备9倍于冻存细胞悬液体积的间充质干细胞培养液。（2）在37℃水浴锅将冻存管中细胞悬液融化，迅速滴入事先准备好的离心管。（3）室温1000 r/min离心3 min，
间充质干细胞的定义
间充质干细胞(MSC, mesenchymal stem cells)是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层，属于多能干细胞，MSC最初在骨髓中发现，因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。如间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分
间充质干细胞的功能
间充质干细胞可以分化为骨、软骨、肌肉或肌腱，为临床治疗各种创伤提供细胞来源；间充质干细胞还可以分化为心肌组织，在显微镜下，能观察到心肌组织中的细胞株出现自发搏动；用间充质干细胞分化为真皮组织，可覆盖于烧伤创面。
间充质干细胞的传代
实验概要间充质干细胞的传代主要试剂DPBS、0.05%的Trypsin、间充质干细胞培养液主要设备15 mL离心管、培养皿、离心机、培养箱、倒置显微镜实验步骤（1）37℃预热间充质干细胞培养液和0.05%胰蛋白酶胰蛋白酶。（2）弃掉旧培养液，加入室温放置的DPBS洗一遍，尽可能将残留的培养液洗净，吸
间充质干细胞的来源
间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cells, 简称MSCs），来源于胚胎发育早期的中胚层和外胚层，是一群具有多向分化潜能的多能干细胞，在体内外特定的诱导条件下可以分化成骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮甚至血液等多种间充质系列细胞或非间充质系列细胞。MSCs存在于身体的
用端粒酶诱导人类间充质干细胞永生化实验
实验方法原理 1. 从动物或人组织中提取的细胞，在体外培养中，细胞会有不同程度的分裂增殖，称为增殖性衰老 。但是有些细胞在自发或其他条件诱导下可突破增殖性衰老，拥有无限增殖的能力，成为永生化细胞，骨髓来源的间充质干细胞属于多能干细胞，可作为组
用端粒酶诱导人类间充质干细胞永生化实验
实验方法原理 1. 从动物或人组织中提取的细胞，在体外培养中，细胞会有不同程度的分裂增殖，称为增殖性衰老 。但是有些细胞在自发或其他条件诱导下可突破增殖性衰老，拥有无限增殖的能力，成为永生化细胞，骨髓来源的间充质干细胞属于多能干细胞，可作为组
用端粒酶诱导人类间充质干细胞永生化实验
实验步骤材料 无菌生长培养基：含高浓度葡萄糖（4.5 g/L）的 Dulbecco's modifiled Eagle's 培养液（DMEM），添加 L-谷酰胺 2 mmol/L、10% 胎牛血清、100U/mL 青霉素及 100 μg/mL 链霉素聚凝胺： 8 mg/mL普通容器
用端粒酶诱导人类间充质干细胞永生化实验
端粒酶对染色体的稳定性及决定细胞生命周期起极其重要的作用，主要用于（1）转基因技术的发展（2）基因诱导表达。实验方法原理1. 从动物或人组织中提取的细胞，在体外培养中，细胞会有不同程度的分裂增殖，称为增殖性衰老 。但是有些细胞在自发或其他条件诱导下可突破增殖性衰老，拥有无限增殖的能力，成为永生化细胞
溶血空斑实验——小室液相法
溶血空斑试验，又称空斑形成细胞（Plague Forming Cell, PFC）试验，是一种体外检测抗体形成细胞的方法。（来源：免疫学实习指导--北京大学医学部基础医学院免疫学系）实验方法原理溶血空斑试验，又称空斑形成细胞（Plague Forming Cell, PFC）试验，是一种体外检测抗体
Southern－印迹实验——碱性缓冲液法
实验方法原理用带正电荷的尼龙膜时，如果用碱性转移缓冲液，则转移的DNA可共价结合于膜上。实验材料DNA试剂、试剂盒NaOHNaCl仪器、耗材电泳仪实验步骤1. 印迹法中步骤1和歩骤2中所述准备凝胶及用0.25 mol/l HCl处理。2. 用蒸馏水漂洗凝胶，并用10倍体积的0.4 mol/l N
实验室用水常用样品水样的运送和接收
1、水样的运送装有水样的容器必须加以妥善的保护和密封，并装在包装箱内固定，以防在运输途中破损，包括材料和运输水样的条件都应严格要求。除了防震、避免日光照射和低温运输外，还要防止新的污染物进入容器和沾污瓶口使水样变质。在水样转运过程中，每个水样都要附有一张管理程序登记卡(见表1)。在转交水样时，转交人
细胞增殖生长方面实验_细胞计数法
实验方法原理细胞计数法：细胞计数法是测定细胞绝对增长数值常用最简便的方法。一般过程为接种21 孔/24 孔板细胞（如用培养瓶时则21 瓶）。分7 组，每组3 孔（或瓶），培养一周，期间逐日检测一组，计数。把7天中的细胞数值绘成图，即为细胞生长曲线。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶仪器、耗材培养瓶恒温
肿瘤细胞原代培养实验——脱落细胞法
实验方法原理脱落细胞法是指采集人体各部位，特别是管腔器官表面的脱落细胞进行培养。实验材料肿瘤组织试剂、试剂盒完全培养基洗涤液仪器、耗材刀片培养箱培养皿实验步骤一、将新鲜的肿瘤组织去除脂肪和结缔组织。二、洗液洗2次后，用刀片将肿瘤组织切成细薄片。三、在切割的同时有许多上皮细胞脱落下来，脱落细胞经洗涤后
细胞的PFA固定实验——悬浮法
当纯净甲醛在水溶液中溶解时，会自动聚合成长链的多聚甲醛。其长度不一，在水中同时进行聚合与解聚反应。甲醛易溶于脂类物质，因此能穿过细胞膜进入细胞内。用多聚甲醛固定细胞时，能使细胞内的自由氨基基团发生化学交联。当不同的分子发生交联时，形成一网状结构，把细胞的各个结构成分连接起来。实验材料细胞悬液试剂、试
痘苗载体转染细胞实验——DOTAP－法
实验方法原理将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上，外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后，将重组质粒转染病毒感染的细胞，痘苗病毒基因组与质粒上同源的部分发生同源重组。应用适当的筛选方案，经几轮噬斑纯化，从细胞裂解物中获得重组病毒。实验材料pSCll／pRB21／pSC65／pLW9
靶细胞杀伤实验：CFSE/PI法
做免疫学特别是肿瘤学实验，总免不了要测淋巴细胞或其他细胞对肿瘤细胞的杀伤，老外最常用的是Cr51放射实验，但这个方法在国内的不少地方都不能做，而MTT这个方法又太老了，而且也不准确，那么替代方法就用流式细胞术，又方便，又准确。 1、计数靶细胞，并加入CFSE，使CFSE终浓度达到2u
MTT法细胞活性检测实验步骤
MTT是一种粉末状化学试剂，全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，汉语化学名为 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝，是一种黄颜色的染料。MTT主要有两个用途：
细胞凋亡检测实验——DNA－ladder法
实验方法原理发生细胞凋亡时，内源性核酸酶被激活，染色体DNA链在核小体之间被切割，形成180～200个碱基或其整数倍的DNA片段，将这些DNA片段抽提出来进行电泳，可得到DNA梯状条带（DNA ladder）。 实验材料凋亡细胞试剂、试剂盒蛋白酶K醋酸钾白细胞裂解液Tris-HClNaClEDTAS
靶细胞杀伤实验：CFSE/PI法
做免疫学特别是肿瘤学实验，总免不了要测淋巴细胞或其他细胞对肿瘤细胞的杀伤，老外最常用的是Cr51放射实验，但这个方法在国内的不少地方都不能做，而MTT这个方法又太老了，而且也不准确，那么替代方法就用流式细胞术，又方便，又准确。1、计数靶细胞，并加入CFSE，使CFSE终浓度达到2uM，37度30分钟
上皮细胞间的充质转化
人肾皮层上皮细胞主要功能： （1） 肾小管上皮细胞重吸收原尿中几乎全部的葡萄糖和氨基酸，并排泌非营养物质进入终尿。 （2） 细胞能分泌炎症介质如细胞因子和趋化因子，通过产生IL-8或直接趋化白细胞参与急性炎症反应。 （3） 是许多先天性疾病、代谢性疾病和炎症的主要损伤部位。 上皮结
间充质干细胞的主要特性
间充质干细胞(MSC)是属于中胚层的一类多能干细胞，主要存在于结缔组织和器官间质中，以骨髓组织中含量最为丰富，由于骨髓是其主要来源，因此统称为骨髓间充质干细胞。骨髓间充质干细胞具有以下特性：一、具有强大的增殖能力和多向分化潜能，在适宜的体内或体外环境下具有分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、脂肪细胞、软
什么是牙髓间充质干细胞
牙髓间充质干细胞简介牙髓间充质干细胞又被称为牙髓干细胞，广泛存在于乳牙、智齿、正畸牙等牙髓组织中的一种多功能细胞，能分化成许多种组织细胞，它可以修复损伤活病变的组织器官，具有较强的免疫调节作用，促进造血功能恢复。牙髓组织位于牙齿内部的牙髓腔内，是牙体组织中唯一的软组织。2000年Gronthos等通
神秘的间充质干细胞4
功能强大的间充质干细胞间充质干细胞是一种非常好的可用于移植的成体干细胞。首先，它和造血干细胞一样，主要来源于骨髓，易于获得；其次，它也很容易被分离出来，目前有非常经典的方法来分离它；第三，间充质干细胞在体外培养不易自动分化（人的间充质干细胞在12代以内可以保持核型正常，并保持很强的端粒酶活性）；第四
神秘的间充质干细胞7
此外，间充质干细胞还被用于肝细胞的移植，以及牙科，角膜疾病的研究，等等方面。作为一种面目模糊但却功能强大的成体干细胞，间充质干细胞的研究正是成体干细胞研究的一个热点。在未来，间充质干细胞的研究还有以下几个关键问题：首先，是寻找和鉴定间充质干细胞的特异性细胞表面标志分子。科学家们肯定不会放任间充质干细
神秘的间充质干细胞6
间充质干细胞可以在体外较长期的培养，近年来还发现它还很容易被外源基因转染和表达，是一种很好的基因载体。所以从理论上讲，我们可以通过将正常基因转入到患者自身的间充质干细胞内，经过体外扩增后再回输到患者体内，从而达到治疗某些基因突变引起的遗传性疾病的目的。人们很早就研究出间充质干细胞有支持造血的功能，它
神秘的间充质干细胞1
间充质干细胞就像成体干细胞中的007。这位说了，是像007那样英俊潇洒吗？错了！英俊潇洒的那是皮尔斯·布鲁斯南，真正的间谍才不会像他那样人见人爱、花见花开、车见车爆胎呢！真正的间谍应该长得非常普通，一副貌不惊人的样子，甚至你见过他之后转眼就会忘记他的长相，因为他长得实在是太普通了。但是实际上呢？人家
神秘的间充质干细胞5
间充质干细胞的应用研究最早是用于骨和软骨的修复，十九世纪就有人在从事这方面的研究，动物实验中取得了很好的效果。现代医学主要采用体外培养扩增后的间充质干细胞与组织工程学的支架材料复合制备出一个复合体，然后再植入缺损的部位。目前，这种治疗在骨和肌腱的修复中已经相当成功，但还没有办法造出完美的软骨，科学家