培养细胞的染色实验——苏木精伊红染色法

培养细胞可用各种方法染色,有一般和特殊之分;一般染色为观察细胞一般形态之用,特殊染色为用于观察细胞的特殊成分和结构的染色方法。内容来源:组织培养和分子细胞学技术。实验材料苏木精试剂、试剂盒甘油冰醋酸伊红铵矾仪器、耗材载玻片盖玻片实验步骤1. 37 ℃温BSS漂洗3 次,每次20 秒~1 分钟;中性福尔马林固定30 分钟;2. 先用蒸馏水漂洗1 次;再用蒸馏水稀释的苏木精液(1/20)染10 分钟;3. 自来水洗、置入1 %NaHCO3液中漂洗至蓝紫色;4. 伊红水溶液中染30 秒~1 分钟;5. 蒸馏水洗,迅速通过丙酮2 次,每次3~5 分钟;6. 通过2:1 丙酮/二甲苯3 次,每次1~2 分钟;7. 通过1:2 丙酮/二甲苯3 次,每次1~2 分钟;8. 纯二甲苯5~10 分钟;9. 把盖片置载物玻片上,用树胶封存,再......阅读全文

如何调整巴氏染色液使细胞胞浆呈蓝色

如何调整巴氏染色液使细胞胞浆呈蓝色巴氏染色法是脱落细胞染色中最好的染色方法。苏木素染液,细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的双螺旋结构中,两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素精碱性染料以离子或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝

心型脂肪酸结合蛋白的检测

  用两种hFABP特异性单克隆抗体通过夹心酶联免疫吸附法测定血浆和血清hFABP浓度。可以用全血样本进行一步免疫色谱分析法来快速测量hFABP;获得血清hFABP水平定性数据需要15分钟。利用面板试验,初步结果显示对AMI检测的灵敏度高(93%)但是特异性低(43%)。hFABP在血浆和血清中的正

革兰氏染色法实验步骤简介

  步骤  革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:  1)涂片固定。  2)草酸铵结晶紫染1分钟。  3)蒸馏水冲洗。  4)加碘液覆盖涂面染约1分钟。  5)水洗,用吸水纸吸去水分。  6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。  7)蕃红染

简述革兰氏染色法的实验原理

原理  通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其

血液细胞染色法有哪些?

一、瑞氏染色瑞氏染色是血涂片最常用、最经典的染色方法,对细胞质和颗粒染色效果好。1.染液组成:碱性亚甲蓝、酸性伊红、甲醇(作为溶剂及固定细胞形态)。2.原理:物理吸附和化学亲和作用。3.染色效果:最适pH为6.4~6.8。若缓冲液偏酸,则红细胞和嗜酸性粒细胞偏红,细胞核呈淡蓝色或不着色。若缓冲液偏碱

固定细胞的PI单染色法

方法一1.收集细胞(1~5)×106个,500~1000r/min离心5min,弃去培养液。2.3ml PBS洗一次。3.离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1h。4.离心弃去固定液,3ml PBS重悬5min。5.400目的筛网过滤1次,500~1000r/min离心5min,弃去P

常用HE染色试剂配制方法

 苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosin staining) ,简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。  一、苏木素  (1) Harris苏木素液  配方: labdd.com  苏木精1 g ;无水乙醇10 ml;蒸馏水200 ml;钾明矾20g;HgO 0.5 g  

简单染色法与革兰氏染色法

(一)细菌的简单染色法 1 目的 1.1 学习微生物  涂片、染色的基本技术。 1.2 掌握细菌的简单染色法。 1.3 初步认识细菌的形态特征,巩固学习油镜的使用方法和无菌操作技术。 2 原理 细菌的涂片和染色是微生物学实验中的一项基本技术。细菌的细胞小而透明,在普通的光学显微镜下不易识

免疫酶染色试验_细胞免疫酶染色法

细胞免疫酶染色法(以检测血清中 EB 病毒 IgA 抗体为例说明)实验方法原理免疫酶染色试验 (immunoenzymatic staining test, IEST) 是用酶(如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等)标记已知抗体或抗原,与相应抗原或抗体结合,形成酶标记抗体-抗原复合物,复合物中的酶在遇到相

免疫酶染色试验_细胞免疫酶染色法

细胞免疫酶染色法(以检测血清中 EB 病毒 IgA 抗体为例说明)实验方法原理免疫酶染色试验 (immunoenzymatic staining test, IEST) 是用酶(如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等)标记已知抗体或抗原,与相应抗原或抗体结合,形成酶标记抗体-抗原复合物,复合物中的酶在遇到相

常用HE染色试剂配制方法临检基础

常用HE染色试剂配制方法: 苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining),简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。 一、苏木素 (1)Harris苏木素液 配方:labdd.com 苏木精1g;无水乙醇10ml;蒸馏水200ml;钾明矾20g;HgO0.5g 先

常用HE染色试剂配制方法

苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining),简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。 一、苏木素 (1)Harris苏木素液 配方:labdd.com 苏木精1g;无水乙醇10ml;蒸馏水200ml;钾明矾20g;HgO0.5g 先将苏木精溶于无水乙醇中,备

细胞骨架观察实验—考马斯亮蓝染色法

实验方法原理荧光免疫染色法显示细胞骨架具有清晰优点,但操作过程较复杂;考马斯亮蓝染色法简便易行,清晰度稍差,但如分化处理适当能提高清晰度。实验材料细胞试剂、试剂盒磷酸二氢钠磷酸氢二钠戊二醛甲醇冰醋酸蒸溜水考马斯亮蓝仪器、耗材培养瓶实验步骤1.  固定液准备0.1 M 磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H

细胞膜糖类电镜显示实验——钌红染色法

细胞膜糖类 电镜 显示技术 免疫组织化学实验技术及应用 第十四章细胞膜糖类电镜显示实验可以用于:观察细胞膜上的糖蛋白和糖脂。其显示技术较常用的是凝集素细胞化学技术,此外,还有钌红染色法等。实验方法原理钌红染色法的原理是钌红可以与羧基(酸性基)通过静电结合,电镜下呈电子密度高染色。实验材料组织样品试剂

细胞计数及活力测定实验——台盼兰染色法

实验方法原理培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。 在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损

流式细胞仪检测细胞凋亡实验——PI单染色法

实验方法原理主要根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变,包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等进行检测。实验材料细胞试剂、试剂盒PBSPI蒸馏水乙醇仪器、耗材棕色瓶400目筛网流式细胞仪实验步骤一、收集细胞收集细胞{数目约(1~ 5)x106个/mL}

流式细胞仪检测细胞凋亡(双染色法)实验步骤

一、基本原理经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞,而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色,且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据

流式细胞仪检测细胞凋亡实验PI单染色法

一、基本原理其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征性,主要包括以下几个方面:1、细胞核的改变由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生改变

精子形态的注意事项及检查过程

  注意事项  检查前:必须禁欲3~5天,一般不超过5天。禁欲时间不要太长,因为精液量增加,而精子活力下降。检查前1周不能用丙酸睾丸酮、苯乙酸睾丸酮、苯丙酸诺龙。  检查时:采集的精液应及时交给医生进行检查,积极配合医生。  不适合人群:暂无。  检查过程  进行精液采集时,使用软皂或者石蜡对生殖器

冰冻切片的制作步骤

冷冻切片 1、取出组织支承器,放平摆好组织,周边滴上包埋剂,速放于冷冻台上冰冻,用吸热器压住组织,至包埋剂与组织冻结成白色冰体即可切片(1~3分种)。 2、将冷冻好的组织块,夹紧于切片机持承器上,启动粗进退键,转动旋钮,将组织修平。 3、调好欲切的厚度,根据不同的组织而定,原则上是细胞密集的薄切,纤

SpectrAPP高光谱成像技术监测伤口愈合过程

     伤口愈合过程是各种组织的再生共同作用的结果。创伤愈合的基本过程为:急性炎症期→细胞增生期→瘢痕形成期→表皮及其它组织再生。治疗不同原因(如创伤或慢性疾病)造成的伤口需要完全不同的临床护理方式,所以伤口的严重程度及愈合活力的评估是确定治疗方法的先决条件。      传统的活体组织检查

血液细胞染色——瑞氏染色法的注意事项

①选用的玻片应洁净干爽、无污物潮湿 ,否则 ,有可能出现血片不洁、血细胞被玻片上的杂物损坏、以及 “潮湿”使血细胞着色产生偏差等不 良后果。②血膜厚薄要适宜 ,太厚或太薄均不好 ,太厚不仅容易造成血细胞过多过密 、血膜片浓染 。而 日.,常会使部分 血细胞浓缩变小 、形态不佳 。太薄 ,血片

支原体的检测实验_荧光染色法

实验方法原理荧光显微镜检查法,荧光染料用 Hoechst 33258,它是一种能与DNA 特异结合的荧光染料。支原体内含有DNA,能着色,是现有检测法中最方便和最有效的一种。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks醋酸甲醇蒸馏水仪器、耗材盖片显微镜实验步骤1.  标本盖片培养细胞汇合前从瓶中取出(如细胞已

蛋白质凝胶染色法实验

实验步骤总蛋白质的检测1. 总蛋白质色度法染色简便的目视检测、相对简单的使用及广大熟悉方法的用户基础群,使得考马斯亮蓝(C B B )—直是最普遍使用的总蛋白质凝胶染色剂。如需要比考马斯亮蓝染色更高的检测敏感度,那么银染法是可选择的色度方法。如果需要对切下的蛋白质进行质谱分析,则首选不会引入共价蛋白

蛋白质凝胶染色法实验

实验步骤 总蛋白质的检测 1. 总蛋白质色度法染色 简便的目视检测、相对简单的使用及广大熟悉方法的用户基础群,使得考马斯亮蓝(C B B )—直是最普遍使用的总蛋白质凝胶染色剂。如需要比考马斯亮蓝染色更高的检测敏感度,那么银

原代悬浮细胞吉姆萨染色法

原代悬浮细胞吉姆萨染色法涂片法:1. 用含有5%—10%血清的等渗液将培养的细胞调制成密度为106个/ml的细胞悬液;2. 将1滴细胞悬液滴于一张载玻片的一端,用另一块干净的载玻片,按照血液涂片法将细胞铺展于载玻片上;3. 载玻片在空气中干燥后,再用甲醇固定;4. 对涂有细胞的载玻片进行染色;5.

染料染色法测定细胞数

结晶紫检测法: 1、在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164细胞的培养液(含10%小牛血清的RPMI-1640培养液),37℃ 5% CO2的二氧化碳培养箱中培养2~3小时,让细胞帖壁。 2、用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品,根据需要3

原代悬浮细胞吉姆萨染色法

原代悬浮细胞吉姆萨染色法涂片法:1. 用含有5%—10%血清的等渗液将培养的细胞调制成密度为106个/ml的细胞悬液;2. 将1滴细胞悬液滴于一张载玻片的一端,用另一块干净的载玻片,按照血液涂片法将细胞铺展于载玻片上;3. 载玻片在空气中干燥后,再用甲醇固定;4. 对涂有细胞的载玻片进行染色;5.

细菌芽孢染色实验_Schaeffer-Fulton-氏染色法

实验方法原理用着色力强的染色剂孔雀缘或石炭酸复红,在加热条件下染色,使染料不仅进入菌体也可进入芽孢内卡进入菌体的染料经水洗后被脱色,而芽孢一经着色难以被水洗脱当用对比度大的复染剂染色后,芽孢仍保留初染剂的颜色,而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色,使芽孢和菌体更易于区分。实验材料蜡样芽孢杆菌(约2d 营

革兰氏染色法的染色原理

革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类,是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌,是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。 通过初染和媒染后,细胞内形成了不溶于水的结晶紫一碘大分子复合物。革兰氏阳性细菌由