培养细胞的染色实验——苏木精伊红染色法
培养细胞可用各种方法染色,有一般和特殊之分;一般染色为观察细胞一般形态之用,特殊染色为用于观察细胞的特殊成分和结构的染色方法。内容来源:组织培养和分子细胞学技术。实验材料苏木精试剂、试剂盒甘油冰醋酸伊红铵矾仪器、耗材载玻片盖玻片实验步骤1. 37 ℃温BSS漂洗3 次,每次20 秒~1 分钟;中性福尔马林固定30 分钟;2. 先用蒸馏水漂洗1 次;再用蒸馏水稀释的苏木精液(1/20)染10 分钟;3. 自来水洗、置入1 %NaHCO3液中漂洗至蓝紫色;4. 伊红水溶液中染30 秒~1 分钟;5. 蒸馏水洗,迅速通过丙酮2 次,每次3~5 分钟;6. 通过2:1 丙酮/二甲苯3 次,每次1~2 分钟;7. 通过1:2 丙酮/二甲苯3 次,每次1~2 分钟;8. 纯二甲苯5~10 分钟;9. 把盖片置载物玻片上,用树胶封存,再......阅读全文
细胞骨架观察实验—抗管蛋白免疫染色法
实验方法原理细胞骨架微管的主要成分主要为管蛋白(Tublin),用免疫荧光法能显出其清晰结构。实验材料细胞试剂、试剂盒PBS丙酮甲醛仪器、耗材碟皿恒温箱实验步骤1. 细胞培养用支持物细胞培养法,把细胞培养在小盖片上;2. 漂洗用镊子挟出小盖片,在温PBS中漂洗3 次,每次30 秒;3. 固定在
关于额颞叶变性的病理生理介绍
随着免疫组织化学和生化的发展,对额颞叶变性的病理已经有了深入了解。 (1)大体病理:主要表现为局限性脑萎缩,患者全脑重量减轻,大部分在1000~1250g之间。萎缩主要位于大脑半球内,包括大部分的额叶、颞叶和岛叶区域、顶叶前部,有时形成“刀切样”萎缩。起始病变部位不完全相同,但随疾病进展,病变
光学显微镜检测肿瘤细胞形态实验
光学显微镜检测肿瘤细胞形态可以:(1)辅助判断肿瘤细胞是否凋亡;(2)用于病理检查;(3)提取肿瘤细胞微细结构信息。实验方法瑞氏-吉姆萨混染法HE染色法实验方法原理吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。 1)嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结果,染粉红色,称为嗜酸性物
革兰氏染色液染色法
1.葡萄球菌和大肠杆菌混合菌液。 2.结晶紫染色液。 3.革兰氏碘液。 4.95%酒精。 5.番红染液。 6.载玻片。方 法 一、涂片标本的制备(见实验一) 二、革兰氏染色法 1.初染:在上述已固定的涂片上,滴加结晶紫染液,染色1分钟,水洗
光学显微镜检测肿瘤细胞形态实验
瑞氏-吉姆萨混染法 HE染色法 实验方法原理 吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。 1)嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与
光学显微镜检测肿瘤细胞形态实验
瑞氏-吉姆萨混染法 HE染色法 实验方法原理 吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。 1)嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与
细菌芽孢染色实验_改良的SchaefferFulton-氏染色法
实验方法原理用着色力强的染色剂孔雀缘或石炭酸复红,在加热条件下染色,使染料不仅进入菌体也可进入芽孢内卡进入菌体的染料经水洗后被脱色,而芽孢一经着色难以被水洗脱当用对比度大的复染剂染色后,芽孢仍保留初染剂的颜色,而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色,使芽孢和菌体更易于区分。实验材料蜡样芽孢杆菌(约2d 营
原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法
实验方法原理苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。实验材料细胞样品试剂
原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法
原理:苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。配制试剂:1.苏丹红Ⅲ染色
原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法
原理:苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。 配制试剂:1.苏丹红Ⅲ染
原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法
实验方法原理 苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或
革兰氏染色法
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。细菌先经碱性染料结晶染色,而经碘液媒染后,用酒精脱色,在一定条件下有的细菌此色不被脱去,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌(G—)。为观察方便,脱色后再用一种红色染料
原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法的染色步骤
1.用Hanks液漂洗盖玻片3次;2.用甲醛钙固定液固定20min;3.用蒸馏水漂洗盖玻片3次;4.用70%乙醇将盖玻片冲洗3次;5.用苏丹红Ⅲ染色液覆盖盖片样品,染色10—30min;6.用70%乙醇漂洗盖片3次;7.用甘油明胶封片后观察;
肺结核患者痰标本抗酸染色实验_抗酸染色法
实验方法原理分枝杆菌一般不易着色,经加温或延长染色时间而着色后,能抵抗酸酒精的脱色作用,故又称抗酸杆菌。对人有致病性的分枝杆菌主要是结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌。实验步骤1. 取痰中粘稠脓性或干酪样带血丝部分涂片(略厚),自然干燥后,通过火焰固定,于涂片外周用蜡笔划圆。 2. 用木夹持玻片,滴加石
培养细胞的染色实验——吖啶橙染色荧光观察法
实验方法原理吖啶橙(Acridine Oringe:AO)是一种常用荧光染料,用于直接染色观察活细胞或固定染色观察细胞均可。吖啶橙对DNA和RNA都能染色,快速、简便和有一定的特异性。吖啶橙对活细胞毒性小,配成2×10-4~1×10-4 可用于直接染色观察法更好。实验材料细胞试剂、试剂盒酒精PBSC
黑素细胞的Dopa染色法鉴定方法介绍
黑色素的合成是以酪氨酸为底物,在酪氨酸酶的作用下,经过羟化变成多巴,进而氧化成多巴醌,进一步变成黑色素。MC中存在特异性的酪氨酸酶,细胞培养时加入外源性左旋多巴,会在酪氨酸酶的作用下合成较多的色素颗粒使细胞在镜下呈现黑色。
细菌的简单染色和革兰氏染色
(一)实验目的:学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。 (二)实验原理:用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷,能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低,当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷,所以通常采用碱性染料(如美蓝、结晶紫、碱性复红或
细菌的简单染色和革兰氏染色
(一)实验目的:学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。(二)实验原理:用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷,能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低,当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷,所以通常采用碱性染料(如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔
细菌的简单染色和革兰氏染色
(一)实验目的:学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。(二)实验原理:用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷,能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低,当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷,所以通常采用碱性染料(如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔
蛋白质凝胶染色法实验3
糖蛋白的检测1. 通用糖蛋白检测糖 基 化 是 真 核 细 胞 中 最 常 见 的 蛋 白 质 翻 译 后 修 饰 。寡 糖 通 常 连 接 于 天 冬 酰 胺 侧 链(iV-连 接 糖 基 化 ) 或 丝 氨 酸 和 苏 氨 酸 羟 基 侧 链 (〇 连 接 糖 基 化)。凝 胶 中 蛋 白 质
蛋白质凝胶染色法实验2
2. 总蛋白质荧光法染色荧光染色法结合了检测灵敏度 (可与银染法媲美) 与染色流程简便性 (与考马斯亮蓝染 色 或 Z n 2+ 反染法相同),且其线性定量范围较比色法大 10〜100 倍 。检测依赖于仪器,需要一个单色激发光源、能将波长较长的发射光从波长较短 (也更亮)的激发光中分离出来的选择性光
蛋白质凝胶染色法实验(四)
(3) 用 10% 〇 //V ) 甲醇、7 % ( V /V ) 乙酸进行简单的凝胶脱色。利用基于微波炉的方案可以加快染色过程的进行。 SYPRO R uby 蛋白质凝胶染料具有相对较高的消光系数和量子产率,因此它十分亮眼, 化学稳定性和光稳定性都很高。光谱的激发可借助紫外线或是蓝光光源;
蛋白质凝胶染色法实验(五)
磷 蛋 白 的 检 测作为基本的细胞信号机制, 指定氨基酸残基的可逆磷酸化作用的重要性已无需争辩。当前磷蛋白染料具有受ZL保护的构型,即磷酸基结合部分共价连接于荧光团。检测的方式是选择性结合磷酸化的氨基酸,但是没有荧光增强作用。从某种程度上讲, 许多可溶的荧光复合物都可作为总蛋白质染色剂
蛋白质凝胶染色法实验(二)
关键步骤通常如下所述。(1) 固定凝胶,以固定蛋白质条带,并移除凝胶中的干扰物质, 如 S D S 、缓冲液和盐,这些物质会结合银并造成背景染色。(2) 用能够结合蛋白质并提高银结合能力的物质, 或是能够干扰剩余未结合的银造成的背景染色的物质来孵育凝胶。总之,这些各种各样的方法都和敏化作用有关。(3
蛋白质凝胶染色法实验(三)
尼罗红蛋白质凝胶染色剂尼罗红 (Nile red) 是一种吩囉嗪酮类染料, 当其从水转入到疏水环境,如 S D S 微粒或蛋白质-S D S 复合物中时,便显示出强烈的荧光增强作用。尼 罗 红 不 会 与 S D S 单体发生显著作用》利用这一特点开发出了一种适合 S D S 凝胶的迅速
蛋白质凝胶染色法实验(一)
总蛋白质的检测1. 总蛋白质色度法染色简便的目视检测、相对简单的使用及广大熟悉方法的用户基础群,使得考马斯亮蓝(C B B )—直是最普遍使用的总蛋白质凝胶染色剂。如需要比考马斯亮蓝染色更高的检测敏感度,那么银染法是可选择的色度方法。如果需要对切下的蛋白质进行质谱分析,则首选不会引入共价蛋白
培养细胞染色体显示法实验——传代培养细胞染色体显示法
实验方法原理培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和制出标本清晰度高等优点,是制备染色体极好的对象。实验材料细胞试剂、试剂盒HanksNaHCO3培养基血清秋水仙素仪器、耗材酒精灯镊子培养瓶吸管离心管实验步骤1. 培养细胞取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80 %~90 %汇合单层培养细胞;2. 加
原代贴壁细胞吉姆萨染色法
原代贴壁细胞吉姆萨染色法染液制备:1. 称取0.5g吉姆萨粉和22ml甘油;2. 取少量甘油与吉姆萨粉在研钵内充分混合,研磨至无颗粒;3. 将剩余的甘油倒入研钵,于56℃保温2h;4. 加入33ml纯甲醇混匀,即为吉姆萨母液,将其保存于棕色试剂瓶内;5. 取9份pH6.80—7.38的Sorense
原代贴壁细胞吉姆萨染色法
原代贴壁细胞吉姆萨染色法染液制备:1. 称取0.5g吉姆萨粉和22ml甘油;2. 取少量甘油与吉姆萨粉在研钵内充分混合,研磨至无颗粒;3. 将剩余的甘油倒入研钵,于56℃保温2h;4. 加入33ml纯甲醇混匀,即为吉姆萨母液,将其保存于棕色试剂瓶内;5. 取9份pH6.80—7.38的Soreen缓
各种组织特殊染色法—纤维素染色法
纤维素又称纤维蛋白,在正常的情况下,它是血液内的纤维蛋白原分子聚合而形成的一种特殊蛋白质。正常的组织是见不到纤维素的。但是,当组织受损,血管内皮受到了较为严重的损害,血管通透性随之升高,则可导致大量纤维蛋白的漏出。纤维素性炎症就是以纤维素渗出为主[6]的一种抗损害的症状。在HE感染时于镜下可见到大量