从脐血来源多能祖细胞（CBMNCs）分离培养CD34+细胞实验1
从CB-MNCs中分离CD34+细胞实验材料CB-MNCs试剂、试剂盒灭菌培养基过柱缓冲液FcR阻断剂CD34微球仪器、耗材柱子（MS+ RS+或LS+ VS+)磁珠细胞分离仪尼龙过滤网 30μm实验步骤(a)准备过柱缓冲液，用抽真空装置去除气体。(b)每108个CB-MNCs用终体积300μL缓冲液重悬。(c)每108个CB-MNCs悬液加100μL FcR阻断剂，抑制CD34微珠非特异性结合或通过Fc受体介导与非靶细胞的结合。(d)每108个CB-MNCs悬液加100μL CD34微球进行细胞标记，充分混匀后在6〜12℃冰箱放置30min。(e)加PBSA洗，室温200g离心10min;加适量的缓冲液重选细胞。(f)根据CB-MNCs的细胞总数选择合适的柱子类型（MS+/RS+或LS+/VS+)，将柱子放人MACs分离仪的磁场中。加人缓冲液润洗柱子（MS+/RS+:50μL;LS+/VS：3mL)。(g)用30μm的尼龙过滤......阅读全文
从脐血来源多能祖细胞（CBMNCs）分离培养CD34+细胞实验1
从CB-MNCs中分离CD34+细胞 实验材料 CB-MNCs 试剂、试剂盒 灭菌培养基过柱缓冲液FcR阻断剂CD34微球 仪器、耗材 柱子（MS+ RS+或LS+ VS+)磁珠细胞分离仪尼龙过滤网 30μm 实验步骤 (a)准备过柱缓冲液
从脐血来源多能祖细胞（CBMNCs）分离培养CD34+细胞实验2
体外扩增CD34+细胞 实验材料 CD34+细胞 试剂、试剂盒 灭菌培养基；完全IMDM细胞因子（Flt-3配体干细胞因子促血小板生成素IL-6) 仪器、耗材 培养瓶 实验步骤 (a)用添加细胞因子的培养基重悬细胞（50 ng/mL Flt
从脐血来源多能祖细胞（CBMNCs）分离培养CD34+细胞实验3
实验材料CD34+细胞试剂、试剂盒灭菌MSCs培养基丝裂霉素C100μg mL共培养的培养基细胞因子（干细胞因子IL-6Flt-3配体促血小板生成素）仪器、耗材6孔培养板实验步骤(a)将脐带血来源的间充质干细胞（blood-derived mesenchymal stem cells, CB-MSC
从脐血来源多能祖细胞（CBMNCs）中分离并培养CD34+细胞
从CB-MNCs中分离CD34+细胞体外扩增CD34+细胞饲养层细胞共培养体外扩增CD34+细胞实验方法原理实验材料CB-MNCs 试剂、试剂盒灭菌培养基
从脐血来源多能祖细胞（CBMNCs）中分离并培养CD34+细胞
从CB-MNCs中分离CD34+细胞 体外扩增CD34+细胞 饲养层细胞共培养体外扩增CD34+细胞 实验方法原理
脐血来源多能祖细胞（CBMNCs）的冻存与复苏实验
实验方法原理 实验材料 CB-MNCs试剂、试剂盒 FBS二甲基亚砜（DMSO)仪器、耗材 冻存管慢速冷冻盒（如Mr.Frosty程序降温盒）或控速降温仪耐液氮储存盒实验步骤 (a)准备冻存液：90%FBS+10%DMSO;放冰上或4℃冰箱冷却，至少30min。(b)CB-MNCs细胞计数。(c)用
脐血来源多能祖细胞（CBMNCs）的冻存与复苏实验
CB-MNCs冻存CB-MNCs的复苏实验方法原理实验材料CB-MNCs 试剂、试剂盒FBS
脐血来源多能祖细胞（CBMNCs）的冻存与复苏实验
CB-MNCs冻存 CB-MNCs的复苏 实验方法原理 实验材料 CB-MNCs
脐血来源多能祖细胞的冻存与复苏实验_CBMNCs冻存
实验材料 CB-MNCs 试剂、试剂盒 FBS二甲基亚砜（DMSO) 仪器、耗材 冻存管慢速冷冻盒（如Mr.Frosty程序降温盒）或控速降温仪耐液氮储存盒 实验步骤 (a)准备冻存液：90%FBS+10%DMSO;放冰上或4℃冰箱冷却，至少30
脐血来源多能祖细胞的冻存与复苏实验_CBMNCs的复苏
实验材料CB-MNCs试剂、试剂盒灭菌合适的培养基添加10%FBSPBSA70%乙醇仪器、耗材水浴锅实验步骤(a)将装有CB-MNCs的冻存管移入37℃水浴中。(b)先擦干冻存管，然后用70%酒精擦拭冻存管防止污染，打开冻存管。(C)迅速将细胞悬液（大约1mL)转移到装有1OmL预冷的10%FBS培
脐血脐带中干细胞分离实验—脐血来源多能前体细胞分离
实验材料脐血来源的MNCs。试剂、试剂盒灭菌培养基0.05%胰蛋白酶含EDTAPBSA仪器、耗材T25培养瓶实验步骤(a)分离和制备脐血来源的MNCs。(b)如果使用冻存的CB-MNCs,复苏的细胞可以用于培养，不需要其他分离步骤。(c)细胞复苏后在30 min内，用台盼蓝染色进行活细胞计数。(d)
脐带和脐血来源干细胞的培养实验_从脐静脉分离干细胞
实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶培养基仪器、耗材导管实验步骤(a)在正常分娩后6〜12h内收集和处理脐带。(b)在脐静脉内插入导管，用PBSA完全地洗2次。(c)夹住远端脐带。(d)用0.1%胶原酶溶液充满静脉。(e)夹住近端脐带。(f)将脐带在37℃孵育20min。(g)轻轻按摩脐带，收集含有内皮和
从CBMNCs中分离CD34+细胞
试剂和材料：1. 培养基；2. 过柱缓冲液：pH7.2的PBSA，添加0.5%牛血清白蛋白和2mmol/L EDTA或0.6%枸橼酸葡萄糖A方（ACD-A）。用真空装置除去缓冲液中的气体；3. FcR阻断剂；4. CD34微球；5. 柱子（MS+/RS+或LS+/VS+）；6. 磁珠细胞分离仪（如M
脐血脐带中干细胞分离实验—脐血来源胚胎样干细胞分离
实验材料脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒灭菌培养基TPOFLK细胞因子混合物（10 ng mL促血小板生成素50 ng mL Flt-3配体和20 ng mL c-kit配体）ACD-A缓冲液小鼠抗人CD45CD33CD47单克隆抗体抗血型糖蛋白A抗体2%人丙种球蛋白（HAG。用P
脐带和脐血来源干细胞的培养实验
脐带和脐血的准备 从脐静脉分离干细胞 种植法从Wharton胶中分离干细胞 种植法从Wharton胶中分离干细胞 酶消化法从Wharton胶中分离干细胞
脐带和脐血来源干细胞的培养实验_脐带和脐血的准备
实验材料脐带试剂、试剂盒培养基：脐带运输培养基：Eagle基础培养基（EBM)添加300 U mL青霉素300 μg mL链霉素150μg mL庆大霉素和lμg mL两性霉素B。 MSCs培养基：含2 mmol L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM(LG-DMEM)添加10% 热灭活胎牛血清（FBS)10
脐血脐带中干细胞分离实验
非限制性体干细胞（unrestricted somatic stem cells，USSCs)的分离脐血来源胚胎样干细胞（cord blood-derived embryonic-like stem cells，CBEs)的分离脐血来源多能前体细胞（cord blood-derived multip
脐血脐带中干细胞分离实验
非限制性体干细胞（unrestricted somatic stem cells，USSCs)的分离 脐血来源胚胎样干细胞（cord blood-derived embryonic-like stem cells，CBEs)的分离 脐血来源多能前体细胞（cor
脐带和脐血来源干细胞培养实验_种植法
种植法从Wharton胶中分离干细胞实验材料脐带试剂、试剂盒Wharton胶仪器、耗材6孔板实验步骤(a)正常分娩后获得脐带，保存在PBSA中，1〜24 h内处理标本。(b)去除血管，将Wharton胶切成小块。(c)将种植块转移到加有DMEM/FBS的6孔板中。(d)将培养板静置5〜7天，使细胞从
脐带和脐血来源干细胞的培养实验_酶消化法
实验材料脐带试剂、试剂盒Wharton胶PBSA胶原酶仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)脐带取材后，可在PBSA中保存1〜24h。(b)除去血管，将Wharton胶剪成大约0.5cm的小组织块。(c)将剪碎的组织块转移到50mL离心管，用无血清DMEM洗，室温250g离心5min。(d)倒掉上清液，将离
脐血脐带中干细胞分离实验
实验方法原理 实验材料 脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒 灭菌起始培养基扩增培养基0.05%的胰蛋白酶含EDTAPBSA仪器、耗材 T25培养瓶实验步骤 (a)制备和分离脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)。(b)如果使用冻存的CB-MNCs,复苏的细胞可以用于培养，不需要其他分
从脐静脉分离干细胞
试剂和材料：1. 培养基：完全LG-DMEM：含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM，添加10%热灭活胎牛血清，100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素；2. PBSA；3. 胰蛋白酶，0.05%，含EDTA；4. 胶原酶A，0.1%用PBSA配制；5. 培养瓶；6. 导管；实验方法：1.
从脐静脉分离干细胞操作步骤
从脐静脉分离干细胞试剂和材料：培养基：完全LG-DMEM：含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM，添加10%热灭活胎牛血清，100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素；2.A；3.胰蛋白酶，0.05%，含EDTA；4.胶原酶A，0.1%用A配制；5.培养瓶；6.导管；实验方法：在正常分娩后6
饲养层细胞共培养体外扩增原代CD34+细胞
试剂和材料：1. MSCs培养基；2. 6孔培养板；3. 丝裂霉素C，100μg/ml；4. 共培养的培养基：IMDM添加10%FBS，100U/ml青霉素和100μl/ml链霉素；5. 细胞因子（干细胞因子，IL-6，Flt-3配体，促血小板生成素）；实验方法：1. 将脐带血来源的间充质干细胞（C
脐血MSCs的分离
试剂和材料： 1. 培养基；2. 0.05%胰蛋白酶，含EDTA；3. PBSA；4. T25；实验方法：1. 为了获得新鲜制备的CB-MNCs，按密度梯度分离法分离单个核细胞（MNCs）；2. 用培养基重悬新鲜分离或冻存的MNCs。冻存的MNCs在铺板前要37℃迅速复苏并用培养基洗一遍；3. 将重
从人关节软骨中分离软骨祖细胞
试剂和材料： 1.骨关节炎患者行膝盖关节半切开手术时未累及的部分； 2.链霉蛋白酶消化培养基：DMEM/F12（1：1）、5%的F、抗坏血酸 50μg/ml、葡萄糖 1mg/ml、庆大霉素（50mg/ml），0.2%（终浓度100μg/ml）、链霉蛋白酶 70U/ml、HEPES 10mmo
从人关节软骨中分离软骨祖细胞
试剂和材料：1. 骨关节炎患者行膝盖关节半切开手术时未累及的部分；2. 链霉蛋白酶消化培养基：DMEM/F12（1：1）、5%的FBS、抗坏血酸 50μg/ml、葡萄糖 1mg/ml、庆大霉素（50mg/ml），0.2%（终浓度100μg/ml）、链霉蛋白酶 70U/ml、HEPES 10mmol/
脐血脐带中干细胞分离实验—非限制性体干细胞的分离
实验材料脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒灭菌起始培养基扩增培养基0.05%的胰蛋白酶含EDTAPBSA仪器、耗材T25培养瓶实验步骤(a)制备和分离脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)。(b)如果使用冻存的CB-MNCs,复苏的细胞可以用于培养，不需要其他分离步骤。(c)用起始培
大鼠、小鼠心脏干细胞（祖细胞）分离培养方法
心脏病是引起人类死因的一种代表性疾病，如果失去了心肌细胞，就会引起心力衰竭等心脏疾病。心肌细胞几乎没有再生能力，一旦失去就不能再生。从前认为心脏当中没有干细胞，所以心肌没有再生能力，但是近年的研究表明，成体心脏内部也会存在一些心肌干细胞。细胞培养操作：1.摘取出心脏，去掉心脏包膜，把心尖部分剪下来（
从正常人和骨关节炎患者关节软骨分离软骨祖细胞实验1
从人关节软骨中分离软骨祖细胞实验材料人关节软骨试剂、试剂盒胰蛋白酶 EDTA:胰蛋白酶（0.05%)和EDTA(0.53 mmol L)PBSA配制胎牛血清牛血清白蛋白（BSA)10μg ml和1 mg ml PBSC配制血清纤连蛋白 10μg m1 PBSC配制仪器、耗材尼龙膜40μm筛孔（“细胞