脐血MSCs的分离
试剂和材料: 1. 培养基;2. 0.05%胰蛋白酶,含EDTA;3. PBSA;4. T25;实验方法:1. 为了获得新鲜制备的CB-MNCs,按密度梯度分离法分离单个核细胞(MNCs);2. 用培养基重悬新鲜分离或冻存的MNCs。冻存的MNCs在铺板前要37℃迅速复苏并用培养基洗一遍;3. 将重悬在培养基的CB-MNCs接种到T25的培养瓶,接种密度为3×105 个细胞/cm2;4. 将细胞放入37℃ 5%CO2的培养箱中;5. 每7天更换一次培养基,直到贴壁生长的成纤维细胞样的细胞达到汇合;6. 一旦达到汇合,用0.05%胰蛋白酶/EDTA处理5min,重悬细胞,然后将细胞按1×105 个/瓶重新接种;7. 达到细胞汇合后,用培养基按1:5稀释后再接种培养。......阅读全文
脐血MSCs的分离
试剂和材料: 1. 培养基;2. 0.05%胰蛋白酶,含EDTA;3. PBSA;4. T25;实验方法:1. 为了获得新鲜制备的CB-MNCs,按密度梯度分离法分离单个核细胞(MNCs);2. 用培养基重悬新鲜分离或冻存的MNCs。冻存的MNCs在铺板前要37℃迅速复苏并用培养基洗一遍;3. 将重
脐血脐带中干细胞分离实验—脐血来源多能前体细胞分离
实验材料脐血来源的MNCs。试剂、试剂盒灭菌培养基0.05%胰蛋白酶含EDTAPBSA仪器、耗材T25培养瓶实验步骤(a)分离和制备脐血来源的MNCs。(b)如果使用冻存的CB-MNCs,复苏的细胞可以用于培养,不需要其他分离步骤。(c)细胞复苏后在30 min内,用台盼蓝染色进行活细胞计数。(d)
脐血脐带中干细胞分离实验—脐血来源胚胎样干细胞分离
实验材料脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒灭菌培养基TPOFLK细胞因子混合物(10 ng mL促血小板生成素50 ng mL Flt-3配体和20 ng mL c-kit配体)ACD-A缓冲液小鼠抗人CD45CD33CD47单克隆抗体抗血型糖蛋白A抗体2%人丙种球蛋白(HAG。用P
脐血脐带中干细胞分离实验
非限制性体干细胞(unrestricted somatic stem cells,USSCs)的分离脐血来源胚胎样干细胞(cord blood-derived embryonic-like stem cells,CBEs)的分离脐血来源多能前体细胞(cord blood-derived multip
脐血脐带中干细胞分离实验
实验方法原理 实验材料 脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒 灭菌起始培养基扩增培养基0.05%的胰蛋白酶含EDTAPBSA仪器、耗材 T25培养瓶实验步骤 (a)制备和分离脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)。(b)如果使用冻存的CB-MNCs,复苏的细胞可以用于培养,不需要其他分
脐血脐带中干细胞分离实验
非限制性体干细胞(unrestricted somatic stem cells,USSCs)的分离 脐血来源胚胎样干细胞(cord blood-derived embryonic-like stem cells,CBEs)的分离 脐血来源多能前体细胞(cor
脐带和脐血来源干细胞的培养实验_从脐静脉分离干细胞
实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶培养基仪器、耗材导管实验步骤(a)在正常分娩后6〜12h内收集和处理脐带。(b)在脐静脉内插入导管,用PBSA完全地洗2次。(c)夹住远端脐带。(d)用0.1%胶原酶溶液充满静脉。(e)夹住近端脐带。(f)将脐带在37℃孵育20min。(g)轻轻按摩脐带,收集含有内皮和
采用密度梯度离心法分离脐血干细胞
利用 3 种质量浓度的聚蔗糖泛影葡胺分离液分离脐血单个核细胞,用细胞计数法、活细胞染色法及流式细胞计数仪分析单个核细胞的表面标志,以探讨密度梯度离心法分离人脐血干细胞分离介质的zui佳浓度,建立临床级干细胞分离应用方案,使用的离心机设备为冷冻离心机 脐血由于其来源容易,所含细胞种类和数
采用密度梯度离心法分离脐血干细胞
利用 3 种质量浓度的聚蔗糖泛影葡胺分离液分离脐血单个核细胞,用细胞计数法、活细胞染色法及流式细胞计数仪分析单个核细胞的表面标志,以探讨密度梯度离心法分离人脐血干细胞分离介质的zui佳浓度,建立临床级干细胞分离应用方案,使用的离心机设备为冷冻离心机 脐血由于其来源容易,所含细胞种类和数量比较
脐血间充质干细胞治疗帕金森病研究现状
间充质干细胞(mesenchymalStallcells,MSCs)作为一种成体干细胞,具有未分化细胞的特性,能高效率的自我更新,并且有着向多种成熟细胞分化的潜能。在生物医学和组织工程中具有巨大的科研价值。骨髓是第一个被报道含有MSCs的组织来源,也是如今临床应用的主要来源,但获取过程有创。易导
脐带和脐血的准备
脐带血(umbilicalcordblood,UCB)是出生后脐带(umbilicalcord,UC)和胎盘中的血液。这在过去一直被认为是医疗废物而废弃。然而,近年来逐渐认识到UCB是HSCs和其他干细胞的一个重要来源,还具有操作和伦理的优势。从]988年第一例UCB移植治疗范可尼贫血(Fancon
脐血脐带中干细胞分离实验—非限制性体干细胞的分离
实验材料脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒灭菌起始培养基扩增培养基0.05%的胰蛋白酶含EDTAPBSA仪器、耗材T25培养瓶实验步骤(a)制备和分离脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)。(b)如果使用冻存的CB-MNCs,复苏的细胞可以用于培养,不需要其他分离步骤。(c)用起始培
脐带和脐血来源干细胞的培养实验_脐带和脐血的准备
实验材料脐带试剂、试剂盒培养基:脐带运输培养基:Eagle基础培养基(EBM)添加300 U mL青霉素300 μg mL链霉素150μg mL庆大霉素和lμg mL两性霉素B。 MSCs培养基:含2 mmol L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM(LG-DMEM)添加10% 热灭活胎牛血清(FBS)10
从脐静脉分离干细胞
试剂和材料:1. 培养基:完全LG-DMEM:含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM,添加10%热灭活胎牛血清,100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素;2. PBSA;3. 胰蛋白酶,0.05%,含EDTA;4. 胶原酶A,0.1%用PBSA配制;5. 培养瓶;6. 导管;实验方法:1.
从脐静脉分离干细胞操作步骤
从脐静脉分离干细胞试剂和材料:培养基:完全LG-DMEM:含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM,添加10%热灭活胎牛血清,100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素;2.A;3.胰蛋白酶,0.05%,含EDTA;4.胶原酶A,0.1%用A配制;5.培养瓶;6.导管;实验方法:在正常分娩后6
脐带和脐血来源干细胞的培养实验
脐带和脐血的准备 从脐静脉分离干细胞 种植法从Wharton胶中分离干细胞 种植法从Wharton胶中分离干细胞 酶消化法从Wharton胶中分离干细胞
从脐血来源多能祖细胞(CBMNCs)分离培养CD34+细胞实验2
体外扩增CD34+细胞实验材料CD34+细胞试剂、试剂盒灭菌培养基;完全IMDM细胞因子(Flt-3配体干细胞因子促血小板生成素IL-6)仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)用添加细胞因子的培养基重悬细胞(50 ng/mL Flt-3配体,50 ng/mL干细胞因子,20 ng/mL促血小板生成素和10
从脐血来源多能祖细胞(CBMNCs)分离培养CD34+细胞实验3
实验材料CD34+细胞试剂、试剂盒灭菌MSCs培养基丝裂霉素C100μg mL共培养的培养基细胞因子(干细胞因子IL-6Flt-3配体促血小板生成素)仪器、耗材6孔培养板实验步骤(a)将脐带血来源的间充质干细胞(blood-derived mesenchymal stem cells, CB-MSC
从脐血来源多能祖细胞(CBMNCs)中分离并培养CD34+细胞
从CB-MNCs中分离CD34+细胞体外扩增CD34+细胞饲养层细胞共培养体外扩增CD34+细胞实验方法原理实验材料CB-MNCs 试剂、试剂盒灭菌培养基
从脐血来源多能祖细胞(CBMNCs)分离培养CD34+细胞实验1
从CB-MNCs中分离CD34+细胞实验材料CB-MNCs试剂、试剂盒灭菌培养基过柱缓冲液FcR阻断剂CD34微球仪器、耗材柱子(MS+ RS+或LS+ VS+)磁珠细胞分离仪尼龙过滤网 30μm实验步骤(a)准备过柱缓冲液,用抽真空装置去除气体。(b)每108个CB-MNCs用终体积300μL缓冲
从脐血来源多能祖细胞(CBMNCs)中分离并培养CD34+细胞
从CB-MNCs中分离CD34+细胞 体外扩增CD34+细胞 饲养层细胞共培养体外扩增CD34+细胞 实验方法原理
从脐血产生更多干细胞的新方法
最近,以加拿大John Dick博士和荷兰Gerald de Haan为首的国际干细胞科学家,发现了一个开关可利用脐带血的力量,并可能提高干细胞的供应,用于需要移植疗法来对抗疾病的癌症患者。 这些概念验证结果,今天在线发表于《Cell Stem Cell》,为从脐带血中产生更多的干细胞,提供了
人脐血间充质干细胞培养流程
准备:MSC 细胞培养基配制:MSC 专用基础培养基 440 ml+FDCC 胎牛血清 50 ml+青霉素 5 ml+谷氨酸盐 5 ml(一般分装成 10 管 50 ml,后考虑 1 株仅传 3~5 代约需最多 5 管)。并于培养室内提前准备 T25 培养瓶、15 ml 离心管、50 ml 离心管、
人脐血间充质干细胞培养流程
1. 准备:MSC 细胞培养基配制:MSC 基础培养基 440 ml+FDCC 胎牛血清 50 ml+青霉素 5 ml+谷氨酸盐 5 ml(一般分装成 10 管 50 ml,后考虑 1 株仅传 3~5 代约需多 5 管)。并于培养室内提前准备 T25 培养瓶、15 ml 离心管、50 ml 离心管、
什么是MSCs?
间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells, 简称MSCs),来源于胚胎发育早期的中胚层和外胚层,是一群具有多向分化潜能的多能干细胞,在体内外特定的诱导条件下可以分化成骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮甚至血液等多种间充质系列细胞或非间充质系列细胞。MSCs存在于身体的
血管内皮细胞的分离和培养_分离人脐静脉内皮细胞
实验方法原理本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改写的。实验材料D-PBSA胰蛋白酶EDTA人脐带胶原蛋内酶H冷的新生小牛血试剂、试剂盒Hank平衡盐溶液HBSS PSG70%乙醇HUVRC生长培养液仪器、耗材培养瓶手术刀和22号刀片手术针20ml注射器鳄鱼夹动脉夹尖头剪棉纸铝箔塑料
脐带和脐血来源干细胞的培养实验_酶消化法
实验材料脐带试剂、试剂盒Wharton胶PBSA胶原酶仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)脐带取材后,可在PBSA中保存1〜24h。(b)除去血管,将Wharton胶剪成大约0.5cm的小组织块。(c)将剪碎的组织块转移到50mL离心管,用无血清DMEM洗,室温250g离心5min。(d)倒掉上清液,将离
脐带和脐血来源干细胞培养实验_种植法
种植法从Wharton胶中分离干细胞实验材料脐带试剂、试剂盒Wharton胶仪器、耗材6孔板实验步骤(a)正常分娩后获得脐带,保存在PBSA中,1〜24 h内处理标本。(b)去除血管,将Wharton胶切成小块。(c)将种植块转移到加有DMEM/FBS的6孔板中。(d)将培养板静置5〜7天,使细胞从
大鼠MSCs的获得和扩增实验——收集大鼠骨髓用于MSCs生产
实验材料大鼠骨髓试剂、试剂盒灭菌CCM含0.2μg ml两性霉素B(两性霉素B洗剂)纱布含100U ml青霉素100μg ml链霉素和0.2μg ml两性霉素B的PBSA无镁和钙的Hank’s平衡盐溶液(HBSS)仪器、耗材塑料Petri培养皿 15 cm直径装有#10和#15刀片的解剖刀1和2英尺
间充质干细胞的来源
间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells, 简称MSCs),来源于胚胎发育早期的中胚层和外胚层,是一群具有多向分化潜能的多能干细胞,在体内外特定的诱导条件下可以分化成骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮甚至血液等多种间充质系列细胞或非间充质系列细胞。MSCs存在于身体的