大鼠、小鼠心脏干细胞(祖细胞)分离培养方法
心脏病是引起人类死因的一种代表性疾病,如果失去了心肌细胞,就会引起心力衰竭等心脏疾病。心肌细胞几乎没有再生能力,一旦失去就不能再生。从前认为心脏当中没有干细胞,所以心肌没有再生能力,但是近年的研究表明,成体心脏内部也会存在一些心肌干细胞。细胞培养操作:1.摘取出心脏,去掉心脏包膜,把心尖部分剪下来(心尖部分是心室部分,心肌细胞含量高)。2.剪碎,移入15或50ml离心管中,用PBS多洗几遍,尽量把血细胞洗掉。3.加入2-3ml的50%血清+50%IMDM培养基,37℃、一小时浸泡。4.采用贴块法:用枪把组织块连同培养基一同移入T25瓶中,然后用枪吸出培养基。在培养箱中放置1-2小时,待组织粘贴在瓶底后,加入3ml含20%血清的IMDM培养基。5.在贴块培养到第三、四天时,从组织块上会脱落一些细胞团和单个细胞,收集到15ml离心管中。6.采用300rpm离心(或自然沉淀),去上清,取沉淀部分的细胞培养(多为细胞团)。7.用IMDM......阅读全文
大鼠、小鼠心脏干细胞(祖细胞)分离培养方法
心脏病是引起人类死因的一种代表性疾病,如果失去了心肌细胞,就会引起心力衰竭等心脏疾病。心肌细胞几乎没有再生能力,一旦失去就不能再生。从前认为心脏当中没有干细胞,所以心肌没有再生能力,但是近年的研究表明,成体心脏内部也会存在一些心肌干细胞。细胞培养操作:1.摘取出心脏,去掉心脏包膜,把心尖部分剪下来(
大鼠小鼠心脏干细胞祖细胞分离培养方法【赛百慷原创】
心脏病是引起人类死因的一种代表性疾病,如果失去了心肌细胞,就会引起心力衰竭等心脏疾病。心肌细胞几乎没有再生能力,一旦失去就不能再生。从前认为心脏当中没有干细胞,所以心肌没有再生能力,但是近年的研究表明,成体心脏内部也会存在一些心肌干细胞。赛百慷公司开发出一种新型心肌干细胞培养方法,希望能为这项研
小鼠造血干细胞/祖细胞免疫磁性分离操作步骤
小鼠造血干细胞/祖细胞免疫磁性分离操作步骤: 1) 取小鼠骨髓用BD染色液制成约2×108单细胞悬液 2) 阻断:加入Ms Fc BlockTM置冰上15min,0.25mg/106细胞 3) 加入Lineage Panel中biotin-mAb, 每种2ml/ 106细胞,冰上15mi
小鼠精原干细胞分离培养
实验概要小鼠精原干细胞分离培养主要试剂0.1%明胶、DPBS、0.25%胰蛋白酶、400目细胞筛、精原干细胞培养液、1 mg/mL胶原酶Ⅳ、7 mg/mLDNase、细胞基础培养液、DMEM-C、精原干细胞冻存液(Kubota et. al., 2004a and 2004b)(4℃条件下可
新生大鼠心脏细胞的分离和培养实验_分离及培养程序
实验材料Sprague Dawley 幼鼠试剂、试剂盒胰酶液乙醇仪器、耗材搅拌台烧杯实验步骤组织消化和分离细胞1. 在细胞操作间内,放一个加热搅拌台,上放一个装有 100 ml 灭菌水的容量 600 ml 的烧杯,加热至 37℃。2. 准备胰酶液。用水浴或温箱使胰酶液温度保持在 37℃。3. 做一个
新生大鼠心脏细胞的分离和培养实验
实验材料 Sprague Dawley 幼鼠试剂、试剂盒 胰酶液乙醇仪器、耗材 搅拌台烧杯实验步骤 组织消化和分离细胞1. 在细胞操作间内,放一个加热搅拌台,上放一个装有 100 ml 灭菌水的容量 600 ml 的烧杯,加热至 37℃。2. 准备胰酶液。用水浴或温箱使胰酶液温度保持在 37℃。3.
新生大鼠心脏细胞的分离和培养实验
分离及培养程序 实验材料 Sprague Dawley 幼鼠 试剂、试剂盒
新生大鼠心脏细胞的分离和培养实验
分离及培养程序 实验材料 Sprague Dawley 幼鼠 试剂、试剂盒
大鼠、小鼠心脏取血实验
实验材料大鼠小鼠试剂、试剂盒酒精棉球仪器、耗材小动物实验台注射器酒精实验步骤先将动物仰卧固定,左手食指在左侧第3~4肋间触到心尖搏动最强处,右手用连有针头的注射器在此穿刺。由于心脏跳动血液进入注射器。小鼠约0.5~0.6ml,大鼠约0.8~1.2ml。
大鼠、小鼠心脏取血实验
实验材料 大鼠 小鼠试剂、试剂盒 酒精棉球仪器、耗材 小动物实验台注射器酒精实验步骤 先将动物仰卧固定,左手食指在左侧第3~4肋间触到心尖搏动最强处,右手用连有针头的注射器在此穿刺。由于心脏跳动血液进入注射器。小鼠约0.5~0.6ml,大鼠约0.8~1.2ml。
血管内皮细胞的分离和培养_分离小鼠心脏内皮细胞
实验方法原理本方法是由 Marelli-Berg 等 [ 2000 ] 的方法改写的。实验材料小鼠心脏胶原蛋白酶A无关对照抗体大鼠抗小鼠内皮糖蛋白(endoglin)(CD105)抗体山羊抗大鼠IgG微珠试剂、试剂盒MCEC生长培养液非内皮细胞培养液HBSS PSHHSS FBCMF胰蛋白酶和EDT
大鼠胚胎神经嵴干细胞的直接分离和培养
1、培养用液:HBSS。含有10mmol/L Hepes 的无钙、镁离子的PBS(ph7.4)。酶消化液。用HBSS配制,含0.025%胰蛋白酶和1mg/ml III型的胶原酶。细胞分散液。含有1mg/ml BSA、10mmol/L hepes、50U/ml青霉素和50/ml链霉素、25ug/mlD
胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定
方法:神经干细胞的培养①原代细胞的培养:取孕13.5天昆明种二级孕小鼠,引臼脱颈处死,碘酒、乙醇消毒腹部,逐层剖开腹部皮肤、肌肉、腹膜,取出子宫,放入盛有D1-SGH液的器皿中。仔细剥离胎膜、羊膜,暴露胎鼠,剪开颅骨,取出胎鼠脑组织并转移至另一盛有D1-SGH液的器皿中,体视显微镜下剥离脑膜,分离胎
胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定
原代、传代培养 实验材料 孕13d的昆明种二级小鼠 试剂、试剂盒 胎牛血清
胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定
原代、传代培养实验材料孕13d的昆明种二级小鼠 试剂、试剂盒胎牛血清
胚胎小鼠纹状体神经干细胞分离培养鉴定_原代传代培养
实验材料孕13d的昆明种二级小鼠试剂、试剂盒胎牛血清青霉素链霉素胰酶阻断剂葡萄糖台盼蓝蔗糖酚红磷酸氢二钾磷酸氢二钠FITC 偶联荧光抗小鼠二抗氯化钠氯化钾碘酒乙醇仪器、耗材解剖剪虹膜剪眼科剪离心机自动双重纯水蒸馏器微孔滤膜滤器培养箱体视显微镜无菌超净工作台培养瓶96孔细胞培养板24孔细胞培养板6 孔
小鼠神经干细胞的分离
实验概要小鼠神经干细胞的分离主要试剂0.05% Trpsin、神经干细胞的分离溶液Ⅰ、神经干细胞的分离溶液II、神经干细胞的分离溶液III、神经干细胞培养液主要设备15 mL、50 mL离心管,10%FBS包被的玻璃巴斯德管,70 μm细胞滤膜,4℃低温离心机实验步骤(1)用10%FBS(vol/v
大鼠原代细胞分离与培养
一、大鼠神经元细胞(酶消化法) 简述:新生24h或E18胎鼠,取脑,剥离海马,剪碎,木瓜酶消化,清洗过筛后铺于多聚赖氨酸包被的培养板中。 二、大鼠雪旺细胞(植块法) 简述:新生24h大鼠,取坐骨神经,剥去外膜和束膜,剪成1mm3的小块,均匀铺于培养皿内,加少量血清,37℃ C
小鼠大鼠的采血方法
割(剪)尾采血 当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3~0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口,割破尾动脉
原代细胞培养经典案例和细胞药筛介绍(三)
药物筛选 威斯腾生物与上海中科院生物与细胞所化学生物学技术平台合作,享有英国国家医学研究院科技转化部MRCT独家提供的约1万种核心结构小分子化合物库资源,基于成药性结构设计,特别适于进行以新药研发为目的的活性化合物筛选。精选SiRNA库,包含20个亚库,可根据需求定制提高通路筛选。 高内涵筛选:通过
科学家发现心脏干细胞移植的新工具
干细胞,来自胚胎、胎儿组织和成人组织,具有发展成身体中各种类型细胞的潜力,例如肌肉细胞、脑细胞和红血细胞。干细胞也拥有修复人体组织的能力。再生医学领域——探究利用胚胎、胎儿和成人干细胞使组织和器官修复和再生的可行性,已经成功地将培养状态的细胞移植到受伤组织中。 美国佛蒙特大学的医学副教授J
小鼠胚胎干细胞的培养
实验概要了解小鼠胚胎干细胞的培养方法。主要试剂1. 贮存液 DMEM(高糖) 胎牛血清 L-谷氨酰胺(200mM) MEM NEAA(10mM) HEPES(1M) β-巯基乙醇(55Mm) 转铁蛋白50mg/ml 胰岛素5mg/ml 亚硒酸钠300μM 黄体酮(20μM) 腐
小鼠胚胎干细胞的培养
完全培养基: 高糖DMEM (GIBCO 12430); 15%胎牛血清(BIOCHROM S0615); 0.1 mmol/L非必需氨基酸(GIBCO 11140-050); 2 mmol/L谷氨酰胺(GIBCO 25030); 0.1 mmol/L β-巯基乙醇(GIBCO 21985); 1
小鼠、大鼠安乐死方法
投稿人:郭晓冲 中国医科大学动物部写给看文献的你们 系列四:小鼠、大鼠安乐死方法!!!当实验动物完成了它的使命后,它应该有权利没有痛苦的死去。安乐死是人类文明的产物,对实验动物进行安乐死也是文明的体现。美国兽医协会推出的动物安乐死指南(AVMAGuidelines for the Euthanasi
浅谈大鼠海马神经元细胞的分离培养方法
大鼠海马神经元细胞分离自海马体,海马体,又名海马回、海马区、大脑海马,海马体主要负责记忆和学习。海马神经元细胞是海马区的主要细胞组成,主要功能是参与近期记忆、情绪及内脏功能调节、是老年性痴呆、癫痫等疾病的主要病灶之一。 海马属于大脑的边缘系统,在学习、记忆、情绪反应及神经系统疾病的病理生理变化
医学研究:用人iPS细胞和小鼠心脏来人造人心脏组织
近日,一篇刊登在国际杂志Nature Communications上的报告指出,来自人诱导多能干(iPS)细胞、在小鼠心脏支架上培养的功能性人心脏组织。这一人造个性化心脏构造的新方法有可能帮助研究早期心脏形成,或最终在临床前试验中派上用场。 通过一个将心肌“补种”到去细胞化的整个心脏中
小鼠角质细胞的分离和培养
实验概要本实验是根据Hennings等(1980)的方法改进而来的。该方案也适用于原代大鼠角质细胞的分离。主要试剂HBSS: NaCl 8g/L KCl 400mg/L KH2PO4 60mg/L 无水Na2PO4 47.86mg/L 无水葡萄糖 1000mg/L NaHCO3 350mg/L实验
小鼠角质细胞的分离和培养
实验步骤 1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗,然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3)
小鼠角质细胞的分离和培养
实验试剂HBSS: NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4 60mg/L无水Na2PO4 47.86mg/L无水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3 350mg/L实验材料妊娠期BALB/c小鼠实验步骤1. 将1~2天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠,流
小鼠角质细胞的分离和培养
实验步骤1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗,然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 将小鼠从尾巴至鼻子的皮肤作一简单切口,用大鼠牙齿镊轻轻将整个身体的皮肤剥下,用一把镊子夹住身体,另一把镊子拉开皮肤。4) 将