石蜡包埋组织样本的制备
实验材料组织胰蛋白酶试剂、试剂盒二甲苯乙醇生理盐水仪器、耗材尼龙网实验步骤1. 把石蜡包埋组织切成 40~50 μm 厚的组织片 3~5 片,或用乳钵研成 0.5 mm 直径大小颗粒状,放入 10 ml 的试管中。2. 加入二甲苯 5~8 ml 时,在室温下脱蜡 1~2 d,视石蜡脱净与否,更换 1~2 次二甲苯,石蜡脱净后,弃去二甲苯。3. 水化:依次加入 100%、95%、70%、50% 梯度乙醇 5 ml,每步为 10 min,去乙醇,加入蒸馏水 3~5 ml,10 min 后弃之。4. 消化:加入 2 ml 0.5% 胰蛋白酶 ( pH 1.5~2.0) 消化液,置 37℃ 恒温水浴中消化 30 min,在消化期间,每隔 10 min 用振荡器振荡 1 次。5. 消化 30 min 后,立即加生理盐水终止消化。6. 经 300 目尼龙网过滤,未消化好的组织可做第 2 次消化。7. 收集细胞悬液,离心沉淀 1500 r/m......阅读全文
新鲜实体组织样本的制备(酶消化法)
实验方法原理对实体组织分散的作用原理主要有3个方面:① 可以破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等;② 可以水解组织间的黏多糖等物质;③ 可以水解组织细胞间的紧密联结装置的蛋白质物质。实验材料组织
新鲜实体组织样本的制备(酶消化法)
实验方法原理 对实体组织分散的作用原理主要有3个方面:① 可以破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等;② 可以水解组织间的黏多糖等物质;③ 可以水解组织细胞间的紧密联结装置的蛋白质物质。实验材料 组织酶仪器、耗材 试管离心管尼龙网实验步骤 1. 将适合于酶消化的组织置于离心管中。2. 将选好的酶溶掖 1~
新鲜实体组织样本的制备(酶消化法)
实验方法原理对实体组织分散的作用原理主要有3个方面:① 可以破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等;② 可以水解组织间的黏多糖等物质;③ 可以水解组织细胞间的紧密联结装置的蛋白质物质。实验材料组织酶仪器、耗材试管离心管尼龙网实验步骤1. 将适合于酶消化的组织置于离心管中。2. 将选好的酶溶掖 1~2 ml
靶向序列捕获和新一代测序前对石蜡包埋组织及...(一)
靶向序列捕获和新一代测序前对石蜡包埋组织及新鲜冷冻组织进行DNA质控靶向序列捕获和新一代测序前对福尔马林固定石蜡包埋组织及新鲜冷冻组织进行 DNA 质量控制 作者Melissa Huang Liu安捷伦科技有限公司美国加利福尼亚州拉霍亚Maria Celeste Ramirez安捷伦科技有限公司美国
靶向序列捕获和新一代测序前对石蜡包埋组织及...(二)
捕获前扩增四个 DNA 样品按照样品前处理工作流程(图 1)进行进一步处理。对捕获前扩增样品进行五次 PCR 循环,然后采用 DNA 1000 试剂盒在 2100 生物分析仪上进行分析(图 3)。 图3. 使用 Agilent 2100 生物分析仪及安捷伦 DNA 1000 试剂盒分析所得的捕获前扩
IHC全攻略2:如何制备样品
对于每一项IHC/ICC研究,组织和细胞样本的制备都不可掉以轻心。为了方便孵育,整个组织必须被切成超薄(5-10 μm)的切片,或切成小块用于整体免疫组化(whole mount IHC)。对于ICC实验,在开始染色步骤之前,细胞必须附着在显微镜载玻片或盖玻片上。样本制备也与固定方法密切
新鲜实体组织样本的制备(化学处理法)
实验方法原理化学处理法是将组织细胞间起黏着作用的钙、镁离子置换出来,从而使细胞分散开来。实验材料胰酶 组织
细胞表面抗原染色的组织样本制备方法
该方法适用于新鲜和冷冻标本1.将组织(10-20mm)切成1-2mm的碎片,用缓冲液或培养液浸湿。2.用1ml缓冲液或培养液预洗Medicon 二遍。3.将组织和1ml缓冲液或培养液放入到Medicon中,盖上盖子,将Medicon 插入到Medimachine中。4.降解组织。降解组织的时间长短依
新鲜实体组织样本的制备(化学处理法)
实验方法原理化学处理法是将组织细胞间起黏着作用的钙、镁离子置换出来,从而使细胞分散开来。实验材料胰酶组织试剂、试剂盒EDTA仪器、耗材尼龙网实验步骤一、试剂的配制1. 0.2% EDTA 配制:称 EDTA 0.2 g,加入 Hank 液 100 ml,封装高压消毒。置 0~4℃ 保存。2. 胰酶加
新鲜实体组织样本的制备(机械法)——研磨法
实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆,再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液;采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块,所以常与其他方法配合使用。实验材料组织试剂、试剂盒生理盐水仪器、耗材研磨器尼龙网实
什么是组织包埋技术
太高深太转业了。需要现场观察。干冰(固态二氧化碳)温度为摄氏负78.5度。可能是冷冻时间过长温度过低,加上OCT包埋方法不合理所致。推荐:《冰冻切片OCT包埋方法的改进》
组织学——包埋技术
Tissue Preparation for Methy Methacrylate EmbeddingMethyl Methacrylate Embedding Protocols (Energy Beam Sciences, Inc.)General protocol for plastic em
什么是组织包埋技术
太高深太转业了。需要现场观察。干冰(固态二氧化碳)温度为摄氏负78.5度。可能是冷冻时间过长温度过低,加上OCT包埋方法不合理所致。推荐:《冰冻切片OCT包埋方法的改进》
病理之组织包埋的步骤
(1)包埋时的用蜡需预先熔化,充分沉淀后使用。 (2)将熔蜡注入蜡模内,将镊子加温,夹持浸好蜡的组织块,选择好包埋面,将其朝下埋入熔蜡内,用镊子轻轻按压,使组织在蜡中并紧贴蜡模底部。 (3)待熔蜡表面凝固后,可投入流水中、放进冰箱冷冻室或包埋机冷台上促凝。 (4)待蜡完全凝固后脱模,并把蜡
病理之组织包埋的选择
(1)一般情况下以组织最大面为包埋面。 (2)管状结构的组织以横切面为包埋面。 (3)皮肤组织或有表层上皮的组织,包埋面应垂直于上皮表面。 (4)带有病变特点的组织,或者对包埋面有特别要求的组织应按预先标记的包埋。
病理之组织包埋的种类
用于组织包埋的材料有石蜡、碳蜡、树脂、火棉胶和各种塑料等。石蜡是最常用的组织包埋剂。甲基丙烯酸甲酯的硬度很强,多用于未脱钙骨组织的包埋。环氧树脂和甲基丙烯酸甲酯同样需要更复杂的包埋处理过程。Epon主要用于电镜组织的包埋。碳蜡包埋的主要优点是不经过脱水与透明处理,故组织块收缩较少,所以特别适用于
植物组织石蜡切片的制作
一、实验目的 1.熟练掌握石蜡切片的方法。 2.掌握永久制片的制作过程,为研究植物的内部结构奠定基础。 3.学会植物内部结构的比较研究方法。 二、实验器具与 试剂1.器具 石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻
新鲜实体组织样本的制备(机械法)_剪碎法
实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆,再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液;采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块,所以常与其他方法配合使用。实验材料组织酶试剂、试剂盒生理盐水仪器、耗材剪刀尼龙网实
新鲜实体组织样本的制备(机械法)——网搓法
实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆,再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液;采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块,所以常与其他方法配合使用。实验材料组织仪器、耗材尼龙网实验步骤1. 将 100 目
石蜡切片的制备指南(四)
前言:制备高质量的病理切片需要一定的技巧和经验。该教程的目的是协助初学者熟悉石蜡切片的制备,以及作为经验更丰富的技术专家的进修课程。涵盖轮转式切片机制备石蜡切片的设置和操作相关的基本内容。同时对切片过程中的部分常见故障进行具体说明,并提供故障排除建议。06 设定最佳刀片间隙角刀片间隙角可调,必须进行
石蜡切片的制备指南(一)
前言制备高质量的病理切片需要一定的技巧和经验—但我们都须从头开始学习。该教程的目的是协助初学者熟悉石蜡切片的制备,以及作为经验更丰富的技术专家的进修课程。涵盖轮转式切片机制备石蜡切片的设置和操作相关的基本内容。同时对切片过程中的部分常见故障进行具体说明,并提供故障排除建议。13学习厚薄一致、高质量、
石蜡切片的制备指南(二)
17彻底清洁和维护切片机使用后清除累积的组织和石蜡碎片将非常重要,定期预防性维护亦非常重要。每天对仪器进行清洁。在清洁之前,切记取下刀片。持刀架可以很容易地移除,从而方便清洁。最好采用干燥毛笔清除切片所产生的垃圾。切勿使用酒精或二甲苯清洗外表面,因为仪器不耐受这些溶剂,应避免暴露于二甲苯。推荐采用清
石蜡切片的制备指南(五)
09了解切片机的设计特点及其使用方法回缩式切片机的设计理念在于标本上行冲程中回缩,让蜡块远离刀片。重要的是要知道您所使用的切片机是否具备此功能。回缩是切片机的设计特点之一,可在切片过程中提供独特的优势并可延长刀片寿命。当使用回缩式切片机时,蜡块下行冲程中必须将蜡块表面对齐刀口(即处于前出位置,而非退
石蜡切片的制备指南(三)
E、细裂缝或微颤振夹持系统未安全锁定标本过硬或过大处理不足间隙角不足切片速度过快切片机磨损F、粗调颤振漂片技术不足固定和/或处理不足(支持不足)蜡块温度较高切片厚度过薄间隙角过大水浴温度过高G、褶皱处理不足(支持不足)蜡块温度较高切片速度过快刀刃较钝间隙角过大石蜡质量较低H、过度压缩漂片仪的底部和边
组织包埋时的注意事项
1、包埋的石蜡温度不宜过高,否则注入模型时,会四处溢流。 2、组织块本身的蜡不能凝固,如果凝固了,应放回重新加温,使其熔化,否则会影响切片,或整块崩出,破坏组织块。 3、包埋完后,应待蜡块完全凝固,方可放入水中,否则未凝固石蜡会被水挤走,漂浮于水面,造成包埋块蜡块的缺损。 4、小的多块的组
LSCM组织的冷冻包埋和切片
组织的冷冻包埋和切片 组织的冷冻方法可根据固定和保存条件不同而不同,尽可能加快冷冻速度以力求减少组织在冷冻 过 程 中 冰晶 的 形 成 。组织冷冻后 ,使用冷冻切片机,将组织切成 5 ~ 15 μm 的切片,粘贴于处理过的载玻片上,室温干燥 1h 后,可进行免疫荧光抗体标记。或放入载玻片盒,- 8
如何选购生物组织包埋机?
包埋机是为切片做准备的设备之一,包埋机的功能就是把石蜡融化成液态,把已经处理好的组织包裹其中,以便于切片机切片。结合市场情况来看,部分厂家的包埋机存在一下问题,希望病理工作人员和设备科在选购包埋机时能引起重视:一、漏蜡或流蜡不止--漏蜡的原因有很多,主要有两个方面是造成漏蜡的重点因素:(1)生产厂家
用于PCR的模板DNA制备实验——酚氯仿法提取石蜡组织中DNA
模板 DNA 质量直接影响 PCR 结果,是 PCR 成功的关键之一。根据其检测对象(组织细胞材料)的不同,有不同的制备方法,常用的材料有石蜡切片、冰冻切片、血细胞、胸腹水等。实验步骤1. 10 mm 厚石蜡切片 10~15 张,置入消毒后的 1.5 ml Eppendorf 管中。2. 脱蜡 二甲
病理制片技术——组织石蜡切片
组织经石蜡包埋后制成的蜡块,用切片机制成切片的过程为石蜡切片法。石蜡切片法现使用的切片机有平推式切片机、轮转式切片机两种。一、平推式切片机石蜡切片法1.切片前的准备:清洗过的载物片(或免清洗的),毛笔,铅笔,小竹片,水槽,雾化器,摊片器,切片刀,刀架。2.切片制作步骤:刀架的粗削部放在头端,在切片机
组织病理实验_石蜡切片法
实验方法原理石蜡切片是最基本的切片技术,冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法(简称H.E.对染法)是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。实验