细胞表面抗原染色的组织样本制备方法

该方法适用于新鲜和冷冻标本1.将组织(10-20mm)切成1-2mm的碎片,用缓冲液或培养液浸湿。2.用1ml缓冲液或培养液预洗Medicon 二遍。3.将组织和1ml缓冲液或培养液放入到Medicon中,盖上盖子,将Medicon 插入到Medimachine中。4.降解组织。降解组织的时间长短依赖于组织类型。(参见降解时间表)。5.用注射器通过 Medicon上的注射器接口将上清吸去。6.用1ml缓冲液或培养液冲洗Medicon三遍。7.选择适当大小孔径的Filcon 滤器过滤细胞悬液。(50-mmFilcon 适用 于大 多数组织,如:淋巴结、肿瘤组织、皮肤组织)8.用1ml缓冲液或培养液冲洗Filcon三遍。9.250g离心细胞悬液5分钟。10.用适当的缓冲液或培养液重悬细胞沉淀。11.若需要,重复3-10步骤。12.调节细胞浓度至5×105-1×10......阅读全文

细胞表面抗原染色的组织样本制备方法

该方法适用于新鲜和冷冻标本1.将组织(10-20mm)切成1-2mm的碎片,用缓冲液或培养液浸湿。2.用1ml缓冲液或培养液预洗Medicon 二遍。3.将组织和1ml缓冲液或培养液放入到Medicon中,盖上盖子,将Medicon 插入到Medimachine中。4.降解组织。降解组织的时间长短依

组织培养细胞染色体制备方法

组织细胞用于遗传学分析最常见的是体外培养的细胞株,多为恶性肿瘤细胞株,且呈贴壁生长,仅小数细胞株为悬浮生长。培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和染色体标本制出清晰度高等优点。组织细胞染色体制备的关键是掌握好体外细胞的生长动态,只有处在对数生长期的细胞才能出现较高的分裂相,所以积水仙素处理的时机及量是染

石蜡包埋组织样本的制备

实验材料组织胰蛋白酶试剂、试剂盒二甲苯乙醇生理盐水仪器、耗材尼龙网实验步骤1. 把石蜡包埋组织切成 40~50 μm 厚的组织片 3~5 片,或用乳钵研成 0.5 mm 直径大小颗粒状,放入 10 ml 的试管中。2. 加入二甲苯 5~8 ml 时,在室温下脱蜡 1~2 d,视石蜡脱净与否,更换 1

石蜡包埋组织样本的制备

实验材料 组织胰蛋白酶试剂、试剂盒 二甲苯乙醇生理盐水仪器、耗材 尼龙网实验步骤 1. 把石蜡包埋组织切成 40~50 μm 厚的组织片 3~5 片,或用乳钵研成 0.5 mm 直径大小颗粒状,放入 10 ml 的试管中。2. 加入二甲苯 5~8 ml 时,在室温下脱蜡 1~2 d,视石蜡脱净与否,

新鲜实体组织样本的制备(机械法)

剪碎法网搓法研磨法实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆,再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液;采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块,所以常与其他方法配合使用。实验材料组织          

红细胞凝集试验的样本的制备方法

1. 阿氏液(Alsever):即红细胞保养液枸橼酸钠(5H2O) 0.80g枸橼酸(H2O) 0.055g葡萄糖 2.05g氯化钠 0.42g双蒸水 加至 100 ml将以上试剂加热溶解于双蒸水中,调整pH至6.8,115℃灭菌10min,4℃保存备用。2. 0.5% 鸡红细胞制备方法先用灭菌注射

新鲜实体组织样本的制备(酶消化法)

实验方法原理对实体组织分散的作用原理主要有3个方面:① 可以破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等;② 可以水解组织间的黏多糖等物质;③ 可以水解组织细胞间的紧密联结装置的蛋白质物质。实验材料组织                                                    

新鲜实体组织样本的制备(酶消化法)

实验方法原理对实体组织分散的作用原理主要有3个方面:① 可以破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等;② 可以水解组织间的黏多糖等物质;③ 可以水解组织细胞间的紧密联结装置的蛋白质物质。实验材料组织酶仪器、耗材试管离心管尼龙网实验步骤1. 将适合于酶消化的组织置于离心管中。2. 将选好的酶溶掖 1~2 ml

新鲜实体组织样本的制备(酶消化法)

实验方法原理 对实体组织分散的作用原理主要有3个方面:① 可以破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等;② 可以水解组织间的黏多糖等物质;③ 可以水解组织细胞间的紧密联结装置的蛋白质物质。实验材料 组织酶仪器、耗材 试管离心管尼龙网实验步骤 1. 将适合于酶消化的组织置于离心管中。2. 将选好的酶溶掖 1~

细胞组织染色方法大盘点

在实验中,为了能够清楚地观察到目标组织或细胞,通常会采用染色的方式进行直观验证。面对形态各异的组织和细胞,研究学者们想到了多种多样的染色方法以佐证自己的实验结果。HE染色又称苏木素-伊红染色法,其中苏木素是Hematoxylin,简称H,伊红是Eosin,简称E,这是是普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋

细胞组织染色方法大盘点

  HE染色  又称苏木素-伊红染色法,其中苏木素是Hematoxylin,简称H,伊红是Eosin,简称E,这是是普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死的一种染色方法。  这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可

组织细胞化学染色方法的选择

  组织细胞化学的染色种类繁多,检测同一种物质可以有多种不同的染色液,形成不同色彩的终产物。有时即使是检测同一物质,因采用的方法不同,其结果有一定的偏差。另外有的方法学本身缺陷或步骤复杂,其结果也有误差。所以应尽量选择结果稳定、方法简便的方法染色。

骨骼细胞染色体制备方法

1. 在含有细胞培养基的细胞培养管中无菌添加骨髓样本1ml(参考细胞密度

FDA的样本制备方法举例

   (1)样本的整理在测定生鲜农产品药物残留时,如果没有特别指明,按照规定,应以整个农产品作为试样。除了分析特定食品中特定药物残留外,一般不得洗涤、除尘、削皮。    水果:去掉水果的把、凹处和核。    香蕉:切掉两头。    芒果:去掉皮和核。    甜瓜:去掉皮、茎、籽,只分析食用部分。  

新鲜实体组织样本的制备(化学处理法)

实验方法原理化学处理法是将组织细胞间起黏着作用的钙、镁离子置换出来,从而使细胞分散开来。实验材料胰酶组织试剂、试剂盒EDTA仪器、耗材尼龙网实验步骤一、试剂的配制1. 0.2% EDTA 配制:称 EDTA 0.2 g,加入 Hank 液 100 ml,封装高压消毒。置 0~4℃ 保存。2. 胰酶加

新鲜实体组织样本的制备(机械法)——研磨法

实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆,再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液;采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块,所以常与其他方法配合使用。实验材料组织试剂、试剂盒生理盐水仪器、耗材研磨器尼龙网实

新鲜实体组织样本的制备(化学处理法)

实验方法原理化学处理法是将组织细胞间起黏着作用的钙、镁离子置换出来,从而使细胞分散开来。实验材料胰酶                                                                  组织                                

免疫荧光组织(细胞)化学染色方法

免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:直接法基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。 试剂与仪器 磷酸盐

免疫荧光组织(细胞)化学染色方法

免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:直接法基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。 试剂与仪器 磷酸盐

免疫荧光组织(细胞)化学染色方法

一、其它荧光抗体染色方法1、膜抗原荧光抗体染色法本法应用直接法或间接法的原理和步骤,可对活细胞在试管内进行染色,常用于T和B细胞、细胞培养物、瘤细胞抗原和受体等的检查和研究,阳性荧光主要在细胞膜上。FACS即采用此法原理。2、双重染色法在同一标本上有两个抗原需要同时显示(如A抗原和B抗原),A抗原的

微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备

实验步骤 1. 取肝素或EDTA抗凝全血(100μl/份),置12×75mm专用塑料试管中。2. 加入50μl特异的单克隆抗体(一抗),室温下孵育30min。3. 置Q-PREP仪上溶解红细胞,稳定和固定白细胞。4. 离心(800~1000rpm,5min)弃上清液,用PBS洗涤细胞2次。5. 加入

脾脏组织单细胞悬液的制备方法

1. 剪碎法:将组织块放入平皿后,加入少量F液及20%胎牛血清;用眼科剪将组织剪至匀浆状,加入5mlF液及20%胎牛血清;用吸管吸取组织匀浆,用100目不锈钢滤网(另购)过滤到试管内;离心沉淀1500转/分×3 min,再用细胞洗涤液清洗3次,每次以500rpm短时低速离心除去细胞碎片,以200目不

胸腹水细胞染色体制备方法

在恶性肿瘤的胸腹水中有大量的分裂期细胞,其中多以非整倍体细胞存在,并含有各种标记染色体。  1、 实验材料  2.5%碘精、75%酒精、无菌棉球、镊子20-22号无菌腰穿包、50ml离心管、秋水仙素、KCL、甲醇、冰乙酸、载玻片等。  2、 操作过程(1)采样:选择有胸或腹水患者,在无菌条件下,轻腹

淋巴细胞染色体制备方法

1. 向含有细胞培养基的细胞培养管中无菌添加全血0.5ml,盖紧培养瓶,充分混均;2. 水平培养72 h(37℃);3. 加入20ul 秋水溶液,培养2 h;4. 离心5 min(2000 rpm);5. 去除上清液,保留0.5ml的细胞;6. 重新充分混悬细胞1;7. 加入5ml 低渗溶液(KCl

新鲜实体组织样本的制备(机械法)——网搓法

实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆,再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液;采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块,所以常与其他方法配合使用。实验材料组织仪器、耗材尼龙网实验步骤1. 将 100 目

新鲜实体组织样本的制备(机械法)_剪碎法

实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆,再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液;采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块,所以常与其他方法配合使用。实验材料组织酶试剂、试剂盒生理盐水仪器、耗材剪刀尼龙网实

外周血单个核细胞样本的制备

实验方法原理 血液是天然的单个细胞分散的细胞悬液,血细胞在生理状态下呈分散的游离状态。它是流式细胞分析的理想样品。血液中的主要细胞成分为白细胞、红细胞和血小板;而其中白细胞主要成分又分为淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。但在血细胞中一般检测单个核细胞较为多见。实验材料 外周血试剂、试剂盒 肝素生理盐水实验

外周血单个核细胞样本的制备

实验方法原理血液是天然的单个细胞分散的细胞悬液,血细胞在生理状态下呈分散的游离状态。它是流式细胞分析的理想样品。血液中的主要细胞成分为白细胞、红细胞和血小板;而其中白细胞主要成分又分为淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。但在血细胞中一般检测单个核细胞较为多见。实验材料外周血试剂、试剂盒肝素生理盐水实验步骤一

微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备实验

微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备实验             实验步骤 1. 取肝素或EDTA抗凝全血(100μl/份),置1

微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备实验

实验步骤 1. 取肝素或EDTA抗凝全血(100μl/份),置12×75mm专用塑料试管中。2. 加入50μl特异的单克隆抗体(一抗),室温下孵育30min。3. 置Q-PREP仪上溶解红细胞,稳定和固定白细胞。4. 离心(800~1000r