酸性磷酸酶的显示实验

实验方法原理Gomori硝酸铅改良法是根据:以磷酸酯为底物,其被磷酸酶水解后释放出磷酸基,在pH5左右和铅盐结合成磷酸铅盐,但磷酸铅无色,须经硫化铵作用使其变成棕黄色至棕黑色的硫化铅沉淀。实验材料427细胞试剂、试剂盒丙酮乙醇Gomori硝酸铅作用液甲基绿硫化铵仪器、耗材温箱冰箱显微镜乳头吸管实验步骤1. 将培养的427细胞在冷丙酮或95%乙醇中固定15~30分钟。2. 待片干燥。3. 移入已预热(37℃)的作用液中孵育2小时。4. 蒸馏水洗。5. 移入2%醋酸酸化1分钟,蒸馏水快速漂洗。6. 移入1%硫化铵1分钟,自来水漂洗数次。7. 必要时用甲基绿复染。8. 酸性磷酸酶活性结构呈棕黄色至棕黑色。对照:在处理过程中,在作用液中不加入甘油磷酸钠而加入蒸馏水,则呈阴性。展开......阅读全文

酸性磷酸酶的显示实验

实验方法原理 Gomori硝酸铅改良法是根据:以磷酸酯为底物,其被磷酸酶水解后释放出磷酸基,在pH5左右和铅盐结合成磷酸铅盐,但磷酸铅无色,须经硫化铵作用使其变成棕黄色至棕黑色的硫化铅沉淀。实验材料 427细胞试剂、试剂盒 丙酮乙醇Gomori硝酸铅作用液甲基绿硫化铵仪器、耗材 温箱冰箱显微镜乳头吸

酸性磷酸酶的显示实验

基本方案             实验方法原理 Gomori硝酸铅改良法是根据:以磷酸酯为底物,其被磷酸酶水解后释放出磷酸基,在pH5左右和铅盐结合成磷酸铅盐,但磷酸铅无色,须经硫化

酸性磷酸酶的显示实验

实验方法原理Gomori硝酸铅改良法是根据:以磷酸酯为底物,其被磷酸酶水解后释放出磷酸基,在pH5左右和铅盐结合成磷酸铅盐,但磷酸铅无色,须经硫化铵作用使其变成棕黄色至棕黑色的硫化铅沉淀。实验材料427细胞试剂、试剂盒丙酮乙醇Gomori硝酸铅作用液甲基绿硫化铵仪器、耗材温箱冰箱显微镜乳头吸管实验步

酸性磷酸酶的显示实验

基本方案             实验方法原理 Gomori硝酸铅改良法是根据:以磷酸酯为底物,其被磷酸酶水解后释放出磷酸基,在pH5左右和铅盐结合成磷酸铅盐,但磷酸铅无色,须经硫化

酸性磷酸酶的显示方法实验步骤

实验试剂1. 10%中性福尔马林(pH6.8~7.1)甲醛 10ml 蒸馏水 90ml 醋酸钠 2g2. 酸性磷酸酶作用液蒸馏水 90ml 0.2mol/L醋酸缓冲液(pH4.6) 12ml 5%硝酸铅 2ml3. 2%β—甘油磷酸钠 4ml先将蒸馏水和醋酸缓冲液混合,随后分成大致相等的两份,一份中

酸性磷酸酶的显示方法

1.目的与原理实验目的:  掌握Comori法的基本原理和方法。观察酸性磷酸酶在细胞内的分布状况。实验原理:  酸性磷酸酶能分解磷酸脂而释放出磷酸基。在pH5.0的环境中,磷酸基能与铅盐反应形成磷酸铅。但因其是无色的,所以再经过与硫化铵作用,形成棕黑色的硫化铅沉淀,由此就能显示酸性磷酸酶在细胞内的存

酸性磷酸酶的显示方法

实验试剂1.   10%中性福尔马林(pH6.8~7.1)甲醛 10ml 蒸馏水 90ml 醋酸钠 2g2.   酸性磷酸酶作用液  蒸馏水 90ml 0.2mol/L醋酸缓冲液(pH4.6) 12ml 5%硝酸铅 2ml3.   2%β—甘油磷酸钠 4ml  先将蒸馏水和醋酸缓冲液混合,随

酸性磷酸酶的显示方法

实验概要酸性磷酸酶能分解磷酸脂而释放出磷酸基。在pH5.0的环境中,磷酸基能与铅盐反应形成磷酸铅。但因其是无色的,所以再经过与硫化铵作用,形成棕黑色的硫化铅沉淀,由此就能显示酸性磷酸酶在细胞内的存在与分布。主要试剂1.   10%中性福尔马林(pH6.8~7.1)甲醛 10ml 蒸馏水 90ml 醋

酸性磷酸酶的显示方法

实验概要酸性磷酸酶能分解磷酸脂而释放出磷酸基。在pH5.0的环境中,磷酸基能与铅盐反应形成磷酸铅。但因其是无色的,所以再经过与硫化铵作用,形成棕黑色的硫化铅沉淀,由此就能显示酸性磷酸酶在细胞内的存在与分布。主要试剂10%中性福尔马林(pH6.8~7.1)酸性磷酸酶作用液2%β—甘油磷酸钠 4ml1%

酸性磷酸酶的显示方法(Comori法)

一、实验目的1. 掌握Comori 法的基本原理和方法。2. 观察酸性磷酸酶在细胞内的分布状况。二、实验原理酸性磷酸酶能分解磷酸脂而释放出磷酸基,在PH5.0 的环境中,磷酸基能与铅盐反应形成磷酸铅。但因其是无色的,所以再经过与硫化铵作用,形成棕黑色的硫化铅沉淀,由此就能显示酸性璃酸酶在细胞内的存在

酸性磷酸酶的测定实验

实验方法原理正磷酸单酯磷酸水解酶(最适酸度)。最适 pH 在 5 左右,描述 σ-磷酸硝基苯的碱性磷酸试验系统可以用于酸性情况。邻磷酸羧基苯+H2O → 水杨酸+Pi实验材料酶样品试剂、试剂盒乙酸缓冲液σ-磷酸硝基苯仪器、耗材分光光度计实验步骤25℃时,持续 3 min0.1 ml 酶样品25℃ 时

酸性磷酸酶的测定实验

基本方案             实验方法原理 正磷酸单酯磷酸水解酶(最适酸度)。最适 pH 在 5 左右,描述 σ-磷酸硝基苯的碱性磷酸试验系统可以用于酸性情况。邻磷酸羧基苯+H2

mRNA-的-PCR-差异显示实验

            实验方法原理 实验材料 人的细胞总 RNA 或 poly(A)+ RNA 试剂、试剂盒

mRNA-的-PCR-差异显示实验

实验方法原理 实验材料 人的细胞总 RNA 或 poly(A)+ RNA试剂、试剂盒 人胎盘 RNase 抑制剂DNase ITris·ClKClMgCl23:1 (V V) 苯酚 氯仿乙酸钠乙醇DEPC 处理的水简并锚定 oligo(dT) 引物组合MoMuLV 逆转录酶缓冲液DTT4dN

mRNA-的-PCR-差异显示实验

对应于 mRNA 的 DNA 序列,可以被回收、克隆、测序,可以用作杂交或筛库的探针。来源:《精编分子生物学实验指南(第五版)》实验材料人的细胞总 RNA 或 poly(A)+ RNA试剂、试剂盒人胎盘 RNase 抑制剂DNase ITris·ClKClMgCl23:1 (V V) 苯酚 氯仿乙酸

自由基显示实验

实验方法原理 实验材料 组织样品试剂、试剂盒 铈生理溶液生理溶液多聚甲醛锇酸实验步骤 1. 组织取下后,立即在含 1 mmol/L 铈生理溶液中切成小块,孵育 5 min。2. 生理溶液漂洗 5 min。3. 4% 多聚甲醛固定、漂洗。4. 锇酸后固定、脱水、包埋等同常规。5. 电镜观察。

异显示技术(DD)实验

D D 由 Liang和 Pardee在 1992年首次提出。至今有大约1700篇 与 DD相关的文章发表,可见其影响巨大。许多与神经变性和凋亡相关的基因也通过DD 的方法得以鉴定。 .DD的原理基于对cDNA分子进行随机扩增和随后按大小进行的分离。为此,首先需分离靶细胞或组织中总RNA,反转录为c

自由基显示实验

H2O2细胞化学法 细胞化学法             实验方法原理 实验材料 组织样品

差异显示技术(DD)实验

            实验材料 无菌玻璃器皿 无菌 Eppendorf试 管 Eppendorf枪头 无菌 falcon离心管 试剂、试

单细胞mRNA差异显示实验

实验方法原理 ##流程图试剂、试剂盒 溶液和缓冲液仪器、耗材 水浴槽PCR热循环仪微量离心机塑料制品和滤器实验步骤 一、RNA 的分离收集对照组和实验组细胞,放入含 45ul2 mmol/L DTT 的 1.5 ml 微量离心管中。95℃ 水浴热解 2 min。每管加入以下物质:37℃ 温育 30

阴离子位点显示实验

实验方法原理 实验材料 组织样品试剂、试剂盒 磷酸缓冲液阳离子化铁蛋白液体戊二醛锇酸实验步骤 1. 0.1 mol/L磷酸缓冲液配制阳离子化铁蛋白,浓度为0.2~0.5 mg/ml。2. 组织样品悬浮于阳离子化铁蛋白液体中,室温下反应30 min。3. 0.1 mol/L磷酸缓冲液充分漂洗。4. 3

单细胞mRNA差异显示实验

            实验方法原理 ##流程图 试剂、试剂盒 溶液和缓冲液 仪器、耗材

单细胞mRNA差异显示实验

目前有几种方法可以显示生理刺激下组织样本中未知基因的表达水平变化。然而, 很多组织内的细胞又存在形态和功能上的异质性,因此常常需要从单个细胞水平研究基因表达的差异。现在,我们介绍一种新方法,它常规用来在单细胞水平考察未知基因的差异性表达。现代神经科学研究技术作者:U.Windhorst & H. J

酸性磷酸酶的简介

  酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)广泛存在于体内各组织、细胞和体液中。血液中的酸性磷酸酶的组织来源是前列腺、肝、脾、肾、红细胞、白细胞、血小板,以前列腺含量最为丰富。正常男性血清中酸性磷酸酶1/3~1/2来自于前列腺,女性血清中的酸性磷酸酶主要来自肝脏、红细胞和血小板。酸性磷

酸性磷酸酶的测定

实验方法原理 正磷酸单酯磷酸水解酶(最适酸度)。最适 pH 在 5 左右,描述 σ-磷酸硝基苯的碱性磷酸试验系统可以用于酸性情况。邻磷酸羧基苯+H2O → 水杨酸+Pi实验材料 酶样品试剂、试剂盒 乙酸缓冲液σ-磷酸硝基苯仪器、耗材 分光光度计实验步骤 25℃时,持续 3 min0.1 ml 酶样品

mRNA-显示蛋白的筛选与扩增实验

实验方法原理 实验材料 纯化的 mRNA 显示蛋白试剂、试剂盒 NaOHHClNaClMgCl2 乙醇1-丁醇苯酚 氯仿 异戊醇EDTAPCR 缓冲液ATP 琼脂糖ATP-适配体筛选结合缓冲液ATP-适配体筛选洗脱缓冲液鲑精 DNABSA3'引物5'引物Taq DNA 聚合酶仪器、耗

mRNA-显示蛋白的筛选与扩增实验

实验材料纯化的 mRNA 显示蛋白试剂、试剂盒NaOHHClNaClMgCl2乙醇1-丁醇苯酚 氯仿 异戊醇EDTAPCR 缓冲液ATP 琼脂糖ATP-适配体筛选结合缓冲液ATP-适配体筛选洗脱缓冲液鲑精 DNABSA3'引物5'引物Taq DNA 聚合酶仪器、耗材凝胶过滤柱实验步骤

mRNA-显示蛋白的筛选与扩增实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 纯化的 mRNA 显示蛋白

酸性磷酸酶染色

  经染色后,细胞浆内可见棕色或棕黑色颗粒或片状沉淀,为阳性反应。  中性粒细胞,单核细胞、T-淋巴细胞、浆细胞、网状细胞、组织细胞(包括吞噬细胞、多毛细胞、组织嗜碱细胞)呈阳性反应。  红细胞系列、巨核细胞及血小板等一般为阴性反应。B-淋巴细胞、非T-非B淋巴细胞亦呈阴性。  【临床意义】  用以

动物实验显示眼球表面也有细菌

  一项新的小鼠研究发现,眼球表面并不像以前认为的那样是无菌环境,而是存在一种细菌,并且这种细菌能帮助杀灭外来致病菌。   据美国《免疫学杂志》11日发表的新研究,至少有一种叫乳腺炎棒状杆菌的细菌能长期生活在小鼠眼球表面。负责研究的美国国家卫生研究院下属国家眼科研究所免疫学家蕾切尔·卡斯皮在一份声明