细胞表面抗原检测实验_免疫荧光抗体法

细胞表面有糖蛋白,这种蛋白质上有多糖,起到识别作用,当无法识别的糖蛋白进入血液就会引起身体的免疫反应引来严重后果,直接输血才会引起,如果喝就不会,因为胃都将其降解成氨基酸了,进入身体合成自身蛋白质就不会有事故。实验方法原理用人结肠癌细胞为免疫原,免疫小鼠,制得鼠抗人结肠癌细胞表面抗原(Ag)的单克隆抗体 IgG(第一抗体),二者可以发生特异性的抗原抗体反应,形成抗原抗体复合物,再加入市售(也可自制)的荧光标记的羊抗鼠IgG抗体(第二抗体),可以与复合物进一步发生抗原抗体反应(二次抗体反应),这样就可以在光显微镜下观察到这种抗原在结肠癌细胞表面的存在。实验材料HeLa细胞试剂、试剂盒1640培养液小牛血清甲醛固定液PBS液体石蜡仪器、耗材盖片载片培养瓶培养皿滤纸镊子吸管倒置显微镜荧光显微镜微量加样器实验步骤1. 将培养瓶中的结肠癌细胞接种到装有盖片的培养皿中,培养2~3天。2. 在倒置镜下观察到盖片上的细胞......阅读全文

免疫学实验免疫组织化学染色法介绍

免疫组织化学染色法介绍:  免疫组织化学染色法是指在抗体上结合萤光或可呈色的化学物质,利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应,检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在,此方式不只可以用来测知抗原的表现量也可观察抗原所表现的位置。只要是能够让抗体结合的物质,也就是具有抗原性的物质包括蛋白质、核酸、多

免疫荧光技术(immunofluorescence-technique)1

免疫荧光技术(immunofluorescence technique)是一种以荧光物作为标记物的免疫分析技术,荧光物质分子在特定条件下吸收激发光的能量后,分子呈激发态而极不稳定,其迅速回到基态时,可以电磁辐射形式释放出所有的光能,发射出波长较照射光长的荧光。用荧光素与已知的抗体(或抗原,较少用

抗胰岛细胞抗体检测及其临床价值

  参考值:正常人血清抗胰岛细胞抗体为阴性。  临床意义:  (1)诊断胰岛素依赖性糖尿病。胰岛素依赖理性糖尿病患者,检出率达60%~70%。常在临床发病前期即可测出,数周后降低。起病后3年检出率约20%。  (2)作为糖尿病的分型指标。IDDM患者发病时的阳性率为65%~85%,而NIDDM患者发

抗胰岛细胞抗体检测及其临床价值

  参考值:正常人血清抗胰岛细胞抗体为阴性。  临床意义:  (1)诊断胰岛素依赖性糖尿病。胰岛素依赖性糖尿病患者,检出率达60%~70%。常在临床发病前期即可测出,数周后降低。起病后3年检出率约20%。  (2)作为糖尿病的分型指标。IDDM患者发病时的阳性率为65%~85%,而NIDDM患者发病

抗胰岛细胞抗体检测及其临床价值

  参考值:正常人血清抗胰岛细胞抗体为阴性。  临床意义:  (1)诊断胰岛素依赖性糖尿病。胰岛素依赖性糖尿病患者,检出率达60%~70%。常在临床发病前期即可测出,数周后降低。起病后3年检出率约20%。  (2)作为糖尿病的分型指标。IDDM患者发病时的阳性率为65%~85%,而NIDDM患者发病

流式细胞计量术(基于荧光的蛋白质分析)实验

活细胞表面抗原的荧光染色(直接免疫荧光) 活细胞表面抗原的荧光染色(间接免疫荧光)             实验材料 细胞

流式细胞计量术(基于荧光的蛋白质分析)实验

活细胞表面抗原的荧光染色(直接免疫荧光) 活细胞表面抗原的荧光染色(间接免疫荧光)             实验材料 细胞

免疫荧光标记为什么不直接标记一抗而标记二抗

因为一种一抗只识别一种底物,如果每种一抗都需要荧光标记,那这样成本很高。而二抗既可以和一抗结合,又带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗,提高了通用性。一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体,即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。一抗二抗都是一种可以特异结

细胞表面抗原的成因和Rh相关介绍

  成因  抗原是一种生物大分子,表面抗原是蛋白质,蛋白质是基因表达的产物,红细胞表面抗原是由一对等位基因控制的,这种等位基因有三种形态,一种是A基因,一种是B基因,一种是i基因,其中A和B基因都是显性,而i基因为隐性。i基因不能表达蛋白质。只要有A存在,就会产生A抗原,B也是一样。  Rh  红细

细胞表面抗原染色的组织样本制备方法

该方法适用于新鲜和冷冻标本1.将组织(10-20mm)切成1-2mm的碎片,用缓冲液或培养液浸湿。2.用1ml缓冲液或培养液预洗Medicon 二遍。3.将组织和1ml缓冲液或培养液放入到Medicon中,盖上盖子,将Medicon 插入到Medimachine中。4.降解组织。降解组织的时间长短依

关于免疫荧光技术的基本内容

  免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。  免疫

丁型病毒性肝炎的辅助检查及诊断

  辅助检查  丁型肝炎的特异性诊断方法为从肝脏和血清检测HDAg或HDV-RNA,或从血清检测抗-HD、抗-HDIgM,均做为诊 断的依据。  1、HDAg  用免疫酶法或放射免疫法检测血清HDAg,如为阳性,有助于早期诊断。慢性HDV感染时,由于血清中抗-HD滴度高,HDAg多以免疫复合物形成存

标本溶血对检测乙肝表面抗原的影响

在临床检测中,常常遇到溶血的标本。溶血对ELISA检测乙肝表面抗原(HBsAg)究竟是否有影响,各文献报道很不一致,本文对标本溶血的原因及其对ELISA检测乙肝表面抗原的影响进行简要的讨论。1 标本溶血的原因溶血是临床检验中最常见的一种干扰和影响因素。溶血可分为体内溶血和体外溶血 [1] 。体内溶血

酶联免疫吸附实验

间接细胞ELISA法检测抗细胞表面抗原的特异性抗体实验步骤本检测方法可用来筛选细胞表面抗原的特异性抗体(图 I.L 6)。注意:所有步骤必须在 4°C 、含 有 NaN3 的生理缓冲液中进行。附 加 材 料(其他材料见基本方案,带 V 项 目 见 附 录 1)未混合的细胞样品碱性磷酸酶标记抗体或 F

直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

1、接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的不同:直接免疫荧光的实验方案通常较短,因为它只需要一个标记步骤。间接免疫荧光使用偶联二抗检测一抗会增加额外的操作步骤。直接免疫荧光方法的实验方案步骤较少,更简单。间接免疫荧光方法中必须选择适当的二抗,增加了复杂度。这种情况在需要使用多个二抗的多色实验中尤为突出,

直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

1、接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的不同:直接免疫荧光的实验方案通常较短,因为它只需要一个标记步骤。间接免疫荧光使用偶联二抗检测一抗会增加额外的操作步骤。直接免疫荧光方法的实验方案步骤较少,更简单。间接免疫荧光方法中必须选择适当的二抗,增加了复杂度。这种情况在需要使用多个二抗的多色实验中尤为突出,

直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

1、接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的不同:直接免疫荧光的实验方案通常较短,因为它只需要一个标记步骤。间接免疫荧光使用偶联二抗检测一抗会增加额外的操作步骤。直接免疫荧光方法的实验方案步骤较少,更简单。间接免疫荧光方法中必须选择适当的二抗,增加了复杂度。这种情况在需要使用多个二抗的多色实验中尤为突出,

直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

1、接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的不同:直接免疫荧光的实验方案通常较短,因为它只需要一个标记步骤。间接免疫荧光使用偶联二抗检测一抗会增加额外的操作步骤。直接免疫荧光方法的实验方案步骤较少,更简单。间接免疫荧光方法中必须选择适当的二抗,增加了复杂度。这种情况在需要使用多个二抗的多色实验中尤为突出,

IHC/ICC/IF实验前需要知道的几个要点

IHC/ICC/IF ,傻傻分不清楚?它们都是用于定位检测抗原表达的免疫检测技术,由于技术相对简单且直观,在科研和临床上都得到了大量使用。但是影响最终检测效果的变量非常多;每一个具体的检测都会遇到多个需要调整的变量。具体到选择何种方法来保存组织样本;固定标本该用醇还是醛;如何选择最合适的一抗;抗原修

IHC/ICC/IF实验前需要知道的几个要点~!

  IHC/ICC/IF ,傻傻分不清楚?它们都是用于定位检测抗原表达的免疫检测技术,由于技术相对简单且直观,在科研和临床上都得到了大量使用。但是影响最终检测效果的变量非常多;每一个具体的检测都会遇到多个需要调整的变量。具体到选择何种方法来保存组织样本;固定标本该用醇还是醛;如何选择最合适的一抗;抗

核蛋白的免疫荧光定位实验

实验方法原理:免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗体复合物带有荧光素,在荧光显微镜下,由于受高压汞灯光源的紫外光照射,荧光素发出明亮的荧光,这样就可以分辨出抗原(或抗体)的所在位置及其性质,并可利用荧光定量技术计算

病毒免疫荧光实验_​荧光抗体染色

实验材料细胞小玻片标本试剂、试剂盒荧光抗体实验步骤荧光抗体染色按不同反应机制,可有以下几种:1.直接法 用已知特异性病毒抗体与荧光素结合,制成荧光特异性抗体,直接与细胞或组织中相应病毒抗原结合,在荧光显微镜下即可见病毒或病毒抗原存在部位呈现特异性荧光。此法特异简便,但一种荧光抗体只能检查一种抗原,特

核蛋白的免疫荧光定位实验

免疫荧光技术又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种免疫荧光技术。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。实验方法免疫荧光定位法 实验方法原理 免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗

核蛋白的免疫荧光定位实验

核蛋白的免疫荧光定位可应用于:(1)定位细胞内核蛋白分布;(2)病毒研究。实验方法原理免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗体复合物带有荧光素,在荧光显微镜下,由于受高压汞灯光源的紫外光照射,荧光素发出明亮的荧光,这

免疫荧光实验的几个问题

1、问:做间接法免疫荧光染色,要怎么设置对照?参考见解:最好是同一视野在未用荧光激发下进行对照,看是否非特异性染色。(1)空白对照:如果你作的是石蜡切片的免疫组化,这一个对照必须有,目的是看自发荧光。脱蜡后直接在荧光显微镜下观察。(2)阴性对照:标本直接滴加二抗,呈阴性反应。(3)抗原对照:标本加同

核蛋白的免疫荧光定位实验

免疫荧光定位法             实验方法原理 免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗体复合

核蛋白的免疫荧光定位实验

实验方法原理 免疫荧光细胞化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗体复合物带有荧光素,在荧光显微镜下,由于受高压汞灯光源的紫外光照射,荧光素发出明亮的荧光,这样就可以分辨出抗原(或抗体)的所在位置及其性质,并可利用荧光定量技术计算

免疫学实验抗胰岛细胞抗体(ICA)介绍

  抗胰岛细胞抗体(ICA)介绍:  抗胰岛细胞抗体属器官特异型抗体,抗原为胰岛细胞浆成分或微粒体组分,主要为lgG类,是胰岛细胞中β细胞损伤的标志。抗胰岛细胞抗体常用间接免疫荧光法测定,荧光图形的特点是胰岛细胞胞质呈斑点状着染。  抗胰岛细胞抗体(ICA)正常值:  间接免疫荧光法:正常人血清抗胰

免疫学实验抗内皮细胞抗体介绍

抗内皮细胞抗体介绍:  系统性红斑狼疮是一种累及多器官系统的自身免疫性疾病,主要免疫学特征为免疫调节紊乱,除T淋巴细胞活化增加外,B淋巴细胞呈多克隆活化,使患者体内产生多种自身抗体,其中之一使为抗内皮细胞抗体(AECA)。AECA可与血管内皮细胞(EC)结合,通过补体介导或抗体依赖细胞毒性作用破坏E

免疫荧光组织(细胞)化学染色方法

免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:直接法基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。 试剂与仪器 磷酸盐