DNA裂解分析实验_个体核的PI荧光
实验材料悬浮细胞试剂、试剂盒低渗荧光染料溶液仪器、耗材组织培养板实验步骤1. 在 96 孔圆底组织培养板中加入 100 μl 悬浮细胞，200 g 离心 5 分钟。2. 吸出上清，用 250 μl 低渗荧光染料溶液溶解沉淀细胞，用移液管辅助混匀细胞。3. 样品移至 FACS 微管，旋转搅拌，冰上避光孵育至少 30 分钟，用流式细胞计量仪读取 PI 荧光。测得凋亡细胞核百分率结果。展开......阅读全文
DNA裂解分析实验_个体核的PI荧光
实验材料悬浮细胞试剂、试剂盒低渗荧光染料溶液仪器、耗材组织培养板实验步骤1. 在 96 孔圆底组织培养板中加入 100 μl 悬浮细胞，200 g 离心 5 分钟。2. 吸出上清，用 250 μl 低渗荧光染料溶液溶解沉淀细胞，用移液管辅助混匀细胞。3. 样品移至 FACS 微管，旋转搅拌，冰上避光
DNA裂解分析实验_个体核的PI荧光
实验材料悬浮细胞试剂、试剂盒低渗荧光染料溶液仪器、耗材组织培养板实验步骤1. 在 96 孔圆底组织培养板中加入 100 μl 悬浮细胞，200 g 离心 5 分钟。2. 吸出上清，用 250 μl 低渗荧光染料溶液溶解沉淀细胞，用移液管辅助混匀细胞。3. 样品移至 FACS 微管，旋转搅拌，冰上避光
DNA裂解分析实验_乙醇固定后PI染色
实验材料细胞试剂、试剂盒EDTA-PBS洗涤缓冲液乙醇RNA 酶PI 溶液仪器、耗材流式细胞计量术实验步骤1. 在 5 mmol/L EDTA-PBS 中洗 1X106 细胞，重悬于 300 μl 洗涤缓冲液中。加 700 μl 100% 的冰冷乙醇，滴加，并轻微搅拌。旋转搅拌混匀。2. 14000
DNA裂解分析实验
琼脂糖凝胶电泳 个体核的PI荧光 乙醇固定后PI染色 JAM分析 实验材料 细胞
DNA裂解分析实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 溶解缓冲液RNA 酶A T1 混合液蛋白酶 KDNA 加样缓冲液仪器、耗材 Eppendorf 管移液管琼脂糖凝胶实验步骤 1. 将 5X105 细胞移入无菌的 1.5 ml Eppendorf 管中，4℃ 2000 r/min 离心 5 分钟，弃上清。2. 加入 20
DNA裂解分析实验
琼脂糖凝胶电泳 个体核的PI荧光 乙醇固定后PI染色 JAM分析 实验材料 细胞
DNA裂解分析实验_JAM分析
实验材料细胞试剂、试剂盒胸腺嘧啶脱氧核苷HBSSPBSEDTA仪器、耗材新鲜培养基组织培养板实验步骤1. 实验前一天，将细胞接种于新鲜培养基。对数生长期细胞可更好地渗入 [3H]-胸腺嘧啶脱氧核苷。2. 收获细胞，在新鲜培养基中以 1X106 细胞/ml 重悬，用 5 μCi/ml [3H]-胸腺嘧
DNA裂解分析实验_琼脂糖凝胶电泳
实验材料细胞试剂、试剂盒溶解缓冲液RNA 酶A T1 混合液蛋白酶 KDNA 加样缓冲液仪器、耗材Eppendorf 管移液管琼脂糖凝胶实验步骤1. 将 5X105 细胞移入无菌的 1.5 ml Eppendorf 管中，4℃ 2000 r/min 离心 5 分钟，弃上清。2. 加入 20 μl 溶
SDS裂解法提取质粒DNA实验
实验方法原理 这种温和的方法（改进自 Godson and Vapnek 1973 ) 在处理大质粒（>15 kb ) 时较碱裂解法和煮沸法好。但温和的代价是产量低：有相当数量的质粒 DNA 混于细胞渣滓中，在操作的早期步骤中丢失。试剂、试剂盒 抗生素氯霉素氯仿EDTA乙醇NaClSDSSTETri
SDS裂解法提取质粒DNA实验
这种温和的方法（改进自 Godson and Vapnek 1973 ) 在处理大质粒（>15 kb ) 时较碱裂解法和煮沸法好。但温和的代价是产量低：有相当数量的质粒 DNA 混于细胞渣滓中，在操作的早期步骤中丢失。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理这种温和的方法（改进自
SDS裂解法提取质粒DNA实验
实验方法原理 这种温和的方法（改进自 Godson and Vapnek 1973 ) 在处理大质粒（>15 kb ) 时较碱裂解法和煮沸法好。但温和的代价是产量低：有相当数量的质粒 DNA 混于细胞渣滓中，在操作的早期步骤中丢失。
单细胞凝胶电泳标准操作
实验原理在细胞核中，DNA是环状附着在核基质上，细胞裂解过程中，核基质被溶解、抽提，DNA的结构则未发生变化。如果DNA链上存在缺口，则使DNA超螺旋变的松弛，DNA环向外展，同时由于暴露了阴电荷，在电场力的作用下，松动的DNA环向阳极迁移，但是由于这种松动的DNA环一端仍附着于核DNA，其迁移距离
单细胞凝胶电泳标准操作
实验原理 在细胞核中，DNA是环状附着在核基质上，细胞裂解过程中，核基质被溶解、抽提，DNA的结构则未发生变化。如果DNA链上存在缺口，则使DNA超螺旋变的松弛，DNA环向外展，同时由于暴露了阴电荷，在电场力的作用下，松动的DNA环向阳极迁移，但是由于这种松动的DNA环一端仍附着于核DNA
单细胞凝胶电泳标准操作
实验原理在细胞核中，DNA是环状附着在核基质上，细胞裂解过程中，核基质被溶解、抽提，DNA的结构则未发生变化。如果DNA链上存在缺口，则使DNA超螺旋变的松弛，DNA环向外展，同时由于暴露了阴电荷，在电场力的作用下，松动的DNA环向阳极迁移，但是由于这种松动的DNA环一端仍附着于核DNA，其迁移距离
单细胞凝胶电泳标准操作
实验概要本实验介绍了单细胞凝胶电泳标准操作流程。实验原理在细胞核中，DNA是环状附着在核基质上，细胞裂解过程中，核基质被溶解、抽提，DNA的结构则未发生变化。如果DNA链上存在缺口，则使DNA超螺旋变的松弛，DNA环向外展，同时由于暴露了阴电荷，在电场力的作用下，松动的DNA环向阳极迁移，但是由于这
细胞凋亡的几种检测方法介绍
一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色，荧光显微镜观察：活细胞核 呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色：如果细胞膜 不
细胞凋亡的几种检测方法
一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙（AO)染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色：如果细胞膜不完整
细胞凋亡的几种检测方法
一、形态学观察方法 1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙（AO)染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。 3、台盼蓝染
细胞凋亡的几种检测方法
一、形态学观察方法 1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙（AO)染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。 3、台盼蓝
细胞凋亡的几种检测方法
一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色，荧光显微镜观察：活细胞核 呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色：如果细胞膜 不
细胞凋亡的几种检测方法
一、形态学观察方法 1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙（AO）染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。 3、台盼蓝染色：如果
纯化DNA实验_纯化质粒（碱裂解法）
实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒LB葡萄糖缓冲液乙酸钾仪器、耗材离心管实验步骤1. 单个大肠杆菌克隆接种到 2 ml 含适当抗生素的 LB 中。37℃ 剧烈振荡孵育 5~8 小时。或者可以培养过夜使饱和。2. 倒 1.5 ml 培养液到已作标记的微量离心管中。把剩下的培养液存放在 4℃。3. 在微量离心
质粒DNA大量制备实验——碱裂解法
用碱和SDS处理可以大规模的细菌培养物中分离质粒DNA，所获得的质粒则可通过柱层析或CsCl- 溴化乙锭梯度离心进一步纯化。了解质粒的特性及其在分子生物学研究中的作用；掌握质粒DNA分离和纯化的原理；学习碱裂解法和煮沸法分离质粒DNA的方法。实验方法原理这一方案科能是最常用的质粒制备方法，该法不仅相
单细胞凝胶电泳标准操作规程(本室SOP)
原理：在细胞核中，DNA是环状附着在核基质上，细胞裂解过程中，核基质被溶解、抽提，DNA的结构则未发生变化。如果DNA链上存在缺口，则使DNA超螺旋变的松弛，DNA环向外展，同时由于暴露了阴电荷，在电场力的作用下，松动的DNA环向阳极迁移，但是由于这种松动的DNA环一端仍附着于核DNA，其迁移距离受
煮沸裂解法制备质粒DNA实验——煮沸裂解法大量制备质粒DNA
实验方法原理经 Triton X-100、溶菌酶和加热处理可从大量（500 ml ) 细菌培养物中分离质粒 DNA，所获得的质粒通过柱层析或 CsCl-溴化乙锭梯度离心可进一步纯化。试剂、试剂盒抗生素乙醇异丙醇乙酸钠STETTE溶菌酶仪器、耗材LB、YT 或 Terrific 培养液沸水浴实验步骤一
煮沸裂解法制备质粒DNA实验——煮沸裂解法小量制备质粒DNA
这个方法 [ 根据 Holmes 和 Quigley 的方法（1981) 修订而成 ] 是将细菌悬浮于含有 Triton X-100 和能消化细胞壁的溶菌酶的缓冲液中，然后加热到 100℃ 使其裂解。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等实验方法原理经 Triton X-100、溶菌酶和加热处
细胞凋亡检测实验
荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法） TUNEL法 Caspase-3活性检测法
细胞凋亡检测实验
荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法） TUNEL法 Caspase-3活性检测法
细胞活力分析仪的原理
ChemoMetec A/S的NucleoCounter是内置的荧光显微镜设计，检测与细胞核酸结合的荧光染料PI的信号。NucleoCounter分析的结果是总细胞浓度或死细胞浓度，取决于样品的处理。 ◇碘化丙啶 碘化丙啶（PI）是一种荧光分子和高选择性DNA染料，PI可与双链DNA（dsD
细胞凋亡通路和细胞凋亡检测的几种检测方法
一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察：细胞凋亡后呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。细胞凋亡|后（细胞凋亡,细胞凋亡通路，细胞凋亡检测）核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨