细菌细胞的制备实验实验——核糖体及多核糖体的分离
实验材料细胞试剂、试剂盒蔗糖溶液高盐蔗糖铺垫液蔗糖铺垫缓冲液重悬缓冲液实验步骤1. 为从剩余的细胞组分中分离核糖体，将不含细胞碎片的粗制裂解液以 1：1 的比例铺到 1.1 mol/L 的蔗糖溶液之上。于 4℃ 在Beckinan 50.2 Ti 恒定角度转头中离心，这一过程包括长时间的离心以使 70S 核糖体沉降，同时分离 30S 和 50S 核糖体亚基；较低的离心速度用于初步将 70S 核糖体沉淀出来，而 50S 或 30S 亚基则不沉淀。(1) 真细菌核糖体高盐蔗糖铺垫液：20 mmol/L Tris-HCl，pH 7.550 mmol/L MgOAc100 mmol/L NH4Cl1 mmol/L DTT0.5 mmol/L EDTA1.1 mmol/L 蔗糖以 100000 g 离心 16 小时来沉降 70S 核糖体，可以更换蔗糖铺垫液 2 至 3 次直到获得干净的沉淀物。对于产甲烷菌（mefftancgem)，盐杆菌......阅读全文
细菌细胞壁的染色实验
细菌细胞壁很薄，革兰氏阳性菌的细胞壁为20~30 nm，革兰氏阴性菌的细胞壁为10~13 nm。组成细菌细胞壁的主要化学成分是肽聚糖，它与染料结合的能力差，不易着色，在细菌的染色过程中，一般情况染料都是通过细胞壁的渗透、扩散等作用而进入细胞，细胞壁本身并未染色。实验方法原理根据细菌细胞在高渗溶液中或
细菌细胞壁的染色实验
实验方法原理 根据细菌细胞在高渗溶液中或用乙醚蒸气处理后，会产生质壁分离这一现象，经染色后也可在普通光学显微镜下区分细胞壁和细胞质膜。实验材料 巨大芽孢杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒 结晶紫水溶液单宁酸（鞣酸）水溶液磷钼酸水溶液甲基绿水溶液NaCl结晶紫水溶液Bouin氏固定液硫堇水溶液乙醚仪器、耗材
细菌细胞壁的染色实验
实验目的 学习掌握细菌细胞壁的染色法。 实验原理 细菌细胞壁很薄，组成细菌细胞壁的主要化学成分是肽聚糖，它与染料结合的能力差，不易着色，因此，欲通过染色来观察细胞壁，必须设法使细胞壁能着色，而细胞质则不易着色，常用的方法有单宁酸法和磷钼酸法。单宁酸和磷钼酸都是起媒染作用，它们使细胞
大鼠肝细胞分离实验
实验方法原理 经肝门静脉或肝门静脉分支插管，用无钙缓冲液灌洗肝 15 min，再用酶溶液灌洗 15 min。收集和洗涤细胞，计数有活力的肝细胞。试剂、试剂盒 L-15 Leibovitz 培养液Ham F12 培养液胞培养液HMM SF无钙 HEPES 缓冲液胶原蛋白酶液5% 戊巴比妥钠肝素仪器、耗
大鼠肝细胞分离实验
实验方法原理经肝门静脉或肝门静脉分支插管，用无钙缓冲液灌洗肝 15 min，再用酶溶液灌洗 15 min。收集和洗涤细胞，计数有活力的肝细胞。试剂、试剂盒L-15 Leibovitz 培养液Ham F12 培养液胞培养液HMM SF无钙 HEPES 缓冲液胶原蛋白酶液5% 戊巴比妥钠肝素仪器、耗材聚
外周血单个核细胞的分离实验
实验方法原理 体外测定免疫细胞的数量和功能常需将某种免疫细胞首先分离出来。本实验是采用密度梯度离心法分离单个核细胞（mononuclear cell）。单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞（monocyte）。 血液中各种细胞的大小和比重不同，因此，可用不同比重（密度）的分离液使不同比重的细胞在
外周血单个核细胞的分离实验
实验方法原理体外测定免疫细胞的数量和功能常需将某种免疫细胞首先分离出来。本实验是采用密度梯度离心法分离单个核细胞（mononuclear cell）。单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞（monocyte）。 血液中各种细胞的大小和比重不同，因此，可用不同比重（密度）的分离液使不同比重的细胞在离心沉降过
小鼠单个核细胞的分离实验
基 本 方 案 从 脾 脏 、胸腺和淋巴结制备细胞悬液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培养基新鲜分离的小鼠器官： < 6 周龄的小鼠胸腺； 6 周 至 6 个月龄的小鼠脾脏和淋巴结60 mmX 15 mm 培养皿剪 刀 和 镊 子（保 存 在 7 0 % 乙醇的烧杯中）装 有 19 G 针
小鼠单个核细胞的分离实验
实验步骤基 本 方 案 从 脾 脏 、胸腺和淋巴结制备细胞悬液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培养基新鲜分离的小鼠器官： < 6 周龄的小鼠胸腺； 6 周 至 6 个月龄的小鼠脾脏和淋巴结60 mmX 15 mm 培养皿剪 刀 和 镊 子（保 存 在 7 0 % 乙醇的烧杯中）装 有 19
细菌透射电镜样品制备实验
实验方法原理 由于生物样品主要由碳、氢、氧、氮等元素组成，散射电子的能力很低，在电镜下反差小。所以在进行电镜的生物样品制备时通常还须采用重金属盐染色或金属喷镀等方法来增加样品的反差，提高观察效果。负染色法就是用电子密度高，本身不显示结构且与样品几乎不反应的物质（如磷钨酸钠或磷钨酸钾）来对样品进行「染
细菌中制备基因组DNA实验
小量制备 氯化铯法 实验方法原理 提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS（十二烷基硫酸钠）和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质，再用酚和氯仿
细菌中制备基因组DNA实验
实验方法原理 提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS（十二烷基硫酸钠）和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质，再用酚和氯仿/异戊醇抽提分离蛋白质，得到的DNA溶液经乙醇沉淀使DNA从溶液中析出。实验材料 细菌试剂、试剂盒 TE氯化铯溴化乙锭NaCl乙醇CTAB仪器、耗材 离心机摇床实验步骤 1
细胞膜的制备方法实验
从悬浮细胞中制备细胞膜 从组织培养皿中的汇合或部分汇合细胞中分离顶层膜、基底膜或中间膜 从生长于微载体上的细胞中分离细胞膜 实验材料
细胞膜的制备方法实验
从悬浮细胞中制备细胞膜从组织培养皿中的汇合或部分汇合细胞中分离顶层膜、基底膜或中间膜从生长于微载体上的细胞中分离细胞膜实验材料胶原酶 试剂、试剂盒EDTA
白细胞介素2的制备及鉴定实验
实验概要本实验制备了白细胞介素2(IL2)，并进行了鉴定实验。IL2是Th细胞受有丝分裂原或特异性抗原刺激后，并在白细胞介素1的辅助下，产生的一种可溶性糖蛋白。IL2是体内重要的广谱免疫增强因子，临床上常用于治疗免疫缺陷病及肿瘤等。实验步骤1. 制备粗制IL2无菌采血，肝素抗凝，用RPMI1640按
质粒DNA导入细菌细胞实验
CaCl2转化法 一步法制备和转化感受态细菌实验 电转化法 实验材料 菌落 质粒DNA
质粒DNA导入细菌细胞实验
实验材料 菌落质粒DNA试剂、试剂盒 CaCl2仪器、耗材 培养基平板实验步骤 1. 接种一个单菌落于50 ml LB培养液中，于37°C中速摇床培养过夜（250 r/min)。2. 往一个2 L的烧瓶中加人400 ml LB培养液，再加入4 ml过夜培养液，于37°C摇床（250 r/min）
细胞核的分级分离实验
实验材料小白鼠试剂、试剂盒蔗糖氯化钙溶液甲苯胺兰染液詹纳斯绿B染液NaCl溶液仪器、耗材玻璃匀浆器离心机天平光学显微镜载玻片盖玻片离心管滴管量筒烧杯玻璃漏斗解剖剪镊子实验步骤1. 用颈椎脱位的方法处死小白鼠后，迅速剖开腹部取出肝脏，剪成小块（去除结缔组织）尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯中，反复
淋巴细胞的分离和激化实验
实验概要本实验从全血中收集富含白细胞的血浆，然后通过Ficoll-Hypaque离心，沉淀细胞悬于含不同细胞分裂剂的培养基中，刺激细胞生长。主要试剂1. PBS（Dulbecco）： 0.10g/L 无水CaCl2 0.20g/L KCl 0.20g/L KHPO4 0.10
细胞核的分级分离实验
实验材料 小白鼠试剂、试剂盒 蔗糖氯化钙溶液甲苯胺兰染液詹纳斯绿B染液NaCl溶液仪器、耗材 玻璃匀浆器离心机天平光学显微镜载玻片盖玻片离心管滴管量筒烧杯玻璃漏斗解剖剪镊子实验步骤 1. 用颈椎脱位的方法处死小白鼠后，迅速剖开腹部取出肝脏，剪成小块（去除结缔组织）尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯
细胞核的分级分离实验
实验材料小白鼠 试剂、试剂盒蔗糖 氯化钙溶液
淋巴细胞的分离和激化实验
实验试剂1. PBS（Dulbecco）： 0.10g/L 无水CaCl2 0.20g/L KCl 0.20g/L KHPO4 0.10g/L MgCl2.6H2O 8.00g/L NaCl 2.16g/L NaH2PO4.7H2O 调pH至7.42. 生长培养基：
淋巴细胞的分离和激化实验
实验试剂1. PBS（Dulbecco）： 0.10g/L 无水CaCl2 0.20g/L KCl 0.20g/L KHPO4 0.10g/L MgCl2.6H2O 8.00g/L NaCl 2.16g/L NaH2PO4.7H2O 调pH至7.42. 生长培养基：
成年大鼠心室肌肉细胞的分离和培养实验_分离ARVM细胞
实验材料鼠试剂、试剂盒KH 缓冲液混合气体仪器、耗材对流工作台或层流式超净台乙醚罩冷凝器循环水浴和水浴摇床圈型架蠕动泵台式医用离心机无菌烧杯ColorpHast pH 试纸实验步骤一、ARVM 细胞分离的准备工作1. 准备如下设备及器材：对流工作台或层流式超净台乙醚罩冷凝器循环水浴和水浴摇床带夹的圈
方案23.7－胰腺上皮细胞分离及培养实验
实验方法原理 从豚鼠胰腺组织分离细胞，用纱布或尼龙网过滤细胞悬液，将过滤的细胞悬液轻轻加于 BSA 液上面。通过 3 次连续离心和混悬细胞，使呈团状的细胞分散。然后，将细胞接种于涂有胶原蛋白的培养器皿。
细菌透射电镜样品制备实验固定
实验方法原理为了保持菌体的原有形状，常用戊二醛、甲醛、锇酸蒸气等试剂小心固定后再进行染色。实验材料菌悬液试剂、试剂盒固定液（如 pH 7.20.15％ 的戊二醛磷酸缓冲液）戊二醛无菌水2％ 的磷钨酸钠水溶液仪器、耗材冰箱无菌毛细吸管无菌滤纸实验步骤1. 将用无菌水制备好的菌悬液经过滤，然后向滤液中加
细菌透射电镜样品制备实验——－固定
实验方法原理为了保持菌体的原有形状，常用戊二醛、甲醛、锇酸蒸气等试剂小心固定后再进行染色。实验材料菌悬液试剂、试剂盒固定液（如 pH 7.20.15％ 的戊二醛磷酸缓冲液）戊二醛无菌水2％ 的磷钨酸钠水溶液仪器、耗材冰箱无菌毛细吸管无菌滤纸实验步骤1. 将用无菌水制备好的菌悬液经过滤，然后向滤液中加
正常细胞常规核型的标本制备实验
微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析 实验方法原理 采用微量全血培养人体外
正常细胞常规核型的标本制备实验
微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析 实验方法原理 采用微量全血培养人体外
正常细胞常规核型的标本制备实验
微量全血培养人淋巴细胞染色体标本制备肿瘤细胞的染色体标本制备人体染色体常规核型的分析实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞，在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素，破坏细胞纺锤体的形成，使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞，低渗处理，使细胞胀大，染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋