培养人角膜间质干细胞实验
实验材料完整的人角膜试剂、试剂盒CMF-SaIineG中性蛋白酶IIL型胶原酶 1mg ml在DMEM F-12 GASP中CMF-SaIineG配制的TrypLEExpress或0.25%膜蛋白酶DMEM F-12 GASPDMEM F-12 2FB GASP:DMEM F-12 GASP含2%FBSCMF GASP仪器、耗材3.5cm塑料组织培养皿或6孔板手术刀或单刃的安全刀片细胞滤网70μm血液尼龙过滤网塑料刮片 “CellLifter”或“CellScraper”弯虹膜剪 11cm(4-3 8in.)Jeweler’s镊 10cm(4in.)角膜剪 19mm刀刃 尖头Colibri缝线钳 0.1mm实验步骤(a)用CMF-SalineG清洗角膜3×5 min。(b)剪除残留的巩膜，结膜和虹膜。(c)加人2ml 1.2U中性蛋白酶II，4℃摇床摇动过夜。(d)将加入中性蛋白酶II的角膜4℃摇30 min。(e)用DMEM/......阅读全文
培养人角膜间质干细胞实验
实验材料 完整的人角膜 试剂、试剂盒 CMF-SaIineG中性蛋白酶IIL型胶原酶 1mg ml在DMEM F-12 GASP中CMF-SaIineG配制的TrypLEExpress或0.25%膜蛋白酶DMEM F-12 GASPDMEM F-12 2FB GASP:DME
培养人角膜间质干细胞实验
实验方法原理实验材料完整的人角膜试剂、试剂盒CMF-SaIineG 中性蛋白酶II L型胶原酶 1mg ml在DMEM F-12 GASP中 CMF-SaIineG配制的TrypLEExpress或0.25%膜蛋白酶 DMEM F-12 GASP DMEM F-12 2FB GASP:DMEM F
培养人角膜间质干细胞实验
实验方法原理实验材料完整的人角膜 试剂、试剂盒CMF-SaIineG
分离和培养人角膜内皮细胞实验
实验方法原理 实验材料 完整的人角膜试剂、试剂盒 CMF-SalineG胰蛋白酶 EDTADMEM F-12 GASPDMEM F-12 2FB:DMEM:Ham’sF-12 1:1 含2%FBSCMF GASP仪器、耗材 手术刀或单刃安全刀片弯虹膜剪 11cm(4-3 8 in.)Jeweler’
分离和培养人角膜内皮细胞实验
分离人角膜内皮细胞角膜内皮细胞的常规培养培养内皮细胞球实验方法原理实验材料完整的人角膜 试剂、试剂盒CMF-SalineG
分离和培养人角膜内皮细胞实验
分离人角膜内皮细胞角膜内皮细胞的常规培养培养内皮细胞球实验方法原理实验材料完整的人角膜试剂、试剂盒CMF-SalineG 胰蛋白酶 EDTA DMEM F-12 GASP DMEM F-12 2FB:DMEM:Ham’sF-12 1:1 含2%FBS CMF GASP仪器、耗材手术刀或单刃安全刀片
分离和培养人角膜内皮细胞实验—角膜内皮细胞常规培养
实验材料角膜内皮细胞试剂、试剂盒CECM胰蛋白酶 EDTA仪器、耗材6孔板实验步骤(a)将细胞接种于包被有FNC的6孔板中。(b)每3天换液一次。(c)当细胞90%汇合时用胰蛋白酶消化传代。
分离和培养人角膜内皮细胞实验——分离人角膜内皮细胞
实验材料完整的人角膜试剂、试剂盒CMF-SalineG胰蛋白酶 EDTADMEM F-12 GASPDMEM F-12 2FB:DMEM:Ham’sF-12 1:1 含2%FBSCMF GASP仪器、耗材手术刀或单刃安全刀片弯虹膜剪 11cm(4-3 8 in.)Jeweler’s慑子 10cm(4
利用Hoechst－33342外流性质分选原代角膜间质干细胞
利用Hoechst 33342外流性质分选原代角膜间质干细胞试剂和材料：1. 2—4代的间质细胞；2. HBSS/2FB；3. Hoechst 33342染料，1mg/ml水溶；4. 碘化丙啶（PI），2mg/ml水溶；5. 维拉帕米，500μg/ml水溶；6. DEME/2FB；7. 胰蛋白酶/T
利用Hoechst－33342外流性质分选原代角膜间质干细胞
利用Hoechst 33342外流性质分选原代角膜间质干细胞 试剂和材料： 1.2—4代的间质细胞； 2.H/2FB； 3.Hoechst 33342染料，1mg/ml水溶； 4.碘化丙啶（PI），2mg/ml水溶； 5.维拉帕米，500μg/ml水溶； 6.DEME
分离和培养人角膜内皮细胞实验——培养内皮细胞球
实验材料角膜内皮细胞试剂、试剂盒ESM胰蛋白酶 EDTA仪器、耗材未经组织培养处理的24孔板实验步骤(a)胰蛋白酶消化细。(b)将分离出的细胞用培养基以10个细胞/μL的密度重悬，并接种于未经组织培养处理的24孔板中。(c)7天后用胰蛋白酶消化细胞并离心收集细胞，继续接种。
如何高效培养人类多能干细胞？
人类多能干细胞(hPSCs)因其拥有分化为机体所有类型细胞的能力，使得hPSCs成为研究发育机制以及疾病机理最常用的工具，同时在再生医学以及疾病治疗领域也有非常广泛应用。人类多能干细胞因其来源不同又可分为胚胎干细胞（Embryonic stem cell，ESCs）和诱导多能干细胞（induce
如何高效培养人类多能干细胞
人类多能干细胞(hPSCs)因其拥有分化为机体所有类型细胞的能力，使得hPSCs成为研究发育机制以及疾病机理最常用的工具，同时在再生医学以及疾病治疗领域也有非常广泛应用。人类多能干细胞因其来源不同又可分为胚胎干细胞（Embryonic stem cell，ESCs）和诱导多能干细胞（induced
正常角膜缘干细胞的免疫染色实验
正常角膜缘干细胞的免疫染色试剂和材料：1. 一抗：（1） ABCG2-----------------小鼠单克隆BXP-21---------1：100（2） 连接蛋白-43-----------兔多克隆CX43-------------1：100（3） 细胞角蛋白3（K3）-----小鼠单克隆AE
日本团队成功培养人类角膜内皮细胞并移植成功
美国医学杂志《The New England Journal of Medicine》近日发表了一篇论文，介绍了日本京都府立医科大学的研究团队利用从志愿者提取的角膜内皮细胞，成功治愈了“水泡性角膜症”。 “水泡性角膜症”是一种严重影响患者生活质量的难治眼疾。覆盖于角膜最内层的角膜内皮细胞，对
日本团队成功培养人类角膜内皮细胞并移植成功
美国医学杂志《The New England Journal of Medicine》近日发表了一篇论文，介绍了日本京都府立医科大学的研究团队利用从志愿者提取的角膜内皮细胞，成功治愈了“水泡性角膜症”。图片来源于网络 “水泡性角膜症”是一种严重影响患者生活质量的难治眼疾。覆盖于角膜最内层的角膜
正常人原代角膜间质细胞的分离
正常人原代角膜间质细胞的分离 实验材料： 1.完整的人角膜； 2.GMF-Saline G； 3.中性蛋白酶Ⅱ；PriCellls原代细胞分离试剂盒 4.L型胶原酶，1mg/ml在DMEM/F12/GA中； 5.GMF-Saline G配制的TrypLE Expre或0.
正常人原代角膜间质细胞的分离
正常人原代角膜间质细胞的分离实验材料：1. 完整的人角膜；2. GMF-Saline G；3. 中性蛋白酶Ⅱ；PriCellls原代细胞分离试剂盒4. L型胶原酶，1mg/ml在DMEM/F12/GASP中；5. GMF-Saline G配制的TrypLE Express或0.25%胰蛋白酶；6.
角膜缘干细胞的概述发现
角膜缘干细胞的移植要通过手术，这就涉及了适应症、供体选择、手术的技巧以及术后的康复等问题。 1、适应征[3、19、21]：一般适应于广泛角膜缘纤维性血管向内生长者, 且已持久或复发达7个月～20年不等的角膜上皮疾病。(1) 中、重度化学烧伤或热烧伤； (2) 慢性接触性相关角膜上皮病； (3)
正常人角膜上皮细胞和干细胞的分离实验
实验材料：1. 完整的人角膜；2. GMF-Saline G；3. 中性蛋白酶Ⅱ，1.2U/ml（用DMEM/F12/GASP稀释2.4U中性蛋白酶Ⅱ）；4. 胰蛋白酶/EDTA；5. DMEM/F12/GASP；6. DEME/F12/2FB/GASP：DMEM/F12/GASP含2%FBS；7.
角膜缘干细胞的展望和问题
其中自体移植虽然有诸多优点，如移植成功率是最高的，没有排斥反应，组织来源方便等， 但仅能供单眼发病的病例, 手术取植片范围常常受限。我国每年所实施的角膜移植例数远不及每年递增的角膜病患者。 培养角膜缘干细胞是基于对角膜缘干细胞的深入认识和对传统方法的重大革新,具有良好的发展前景。 它的优点是
正常角膜缘干细胞的免疫染色
正常角膜缘干细胞的免疫染色试剂和材料：1.一抗：（1）ABCG2-----------------小鼠单克隆BXP-21---------1：100（2）连接蛋白-43-----------兔多克隆CX43-------------1：100（3）细胞角蛋白3（K3）-----小鼠单克隆AE5---
全球首个接受干细胞修复角膜的试验铺开
一位四十多岁的日本女性成为世界上第一个使用重编程干细胞修复角膜的人。日本大阪大学的眼科医生Kohji Nishida在8月29日的新闻发布会上表示，该女性患有一种疾病，该疾病使视力模糊，并可导致失明。 为了治疗这位女士，Nishida说他的团队用诱导多能干（iPS）细胞制作了角膜细胞片。这些是
使用CCCadvanced™FN1无异源耗材培养人多能干细胞（四）
Flow cytometry analysis of the quantitative expression of 3 key pluripotency-associated transcription factors (Nanog, OCT3/4 and SOX2) complemen
使用CCCadvanced™FN1无异源耗材培养人多能干细胞（三）
Figure 2: hiPSCs proliferation during long-term expansionA. Cumulative cell population doublings for hiPSCs cultured on the FN1 motifs surface as we
使用CCCadvanced™FN1无异源耗材培养人多能干细胞（一）
Ready-to-use Eppendorf CCCadvanced™ FN1 Motifs Surface for Xeno-Free Expansionof Human Pluripotent Stem CellsAurélie Tacheny¹, Silvia Tejerina¹, Wiâme
使用CCCadvanced™FN1无异源耗材培养人多能干细胞（二）
Materials and MethodsCell culture conditions and surface transitionCryopreserved hiPSCs (SC102A-1, SBI™, USA) were initially thawed and pre-cultivat
间质干细胞成脂和成骨诱导分化
成骨和成脂诱导是鉴定干细胞的一种重要的方法，也是zui常用、报道见得zui多的方法。成骨zui常用的染色方法是茜素红染色（碱性磷酸酶），成脂诱导zui常用是Oil Red O （油红O）染色法。下面介绍一下这两种染色方法的原理和步骤。成骨诱导分化茜素红染色方法和原理：茜素红又名茜素磺酸钠，茜素S，茜
用流式法（FACS)分离间质SP细胞实验
利用Hoechst33342外流性质分选角膜间质干细胞用ABCG2表达特性免疫分选角膜间质干细胞实验方法原理实验材料2〜4代的间质细胞 试剂、试剂盒HBSS 2FB
用流式法（FACS)分离间质SP细胞实验
利用Hoechst33342外流性质分选角膜间质干细胞 用ABCG2表达特性免疫分选角膜间质干细胞 实验方法原理