分离和培养人角膜内皮细胞实验

实验方法原理 实验材料 完整的人角膜试剂、试剂盒 CMF-SalineG胰蛋白酶 EDTADMEM F-12 GASPDMEM F-12 2FB:DMEM:Ham’sF-12 1:1 含2%FBSCMF GASP仪器、耗材 手术刀或单刃安全刀片弯虹膜剪 11cm(4-3 8 in.)Jeweler’s慑子 10cm(4 in.)角膜剪 19mm刃 尖头Colibri缝线钳0.1 mm实验步骤 (a)用PBSA将角膜清洗3次,每次5 min。(b)剪除残留的巩膜,结膜和虹膜。(c)加人2 ml 1.2 U/ml中性蛋白酶II,4℃过夜,轻微搅动。(d)将加人中性蛋白酶II的角膜放人4℃摇床摇30 min。(e)用DMEM/F-12/GASP清洗角膜。(f)解剖显微镜下,小心去除小梁网,剥离内皮层并用胰蛋白酶/EDTA消化37℃,30 min。(g)加入同等体积的DMEM/F-12/2FB并拍散细胞。(h)离心400g,10 min......阅读全文

分离和培养人角膜内皮细胞实验——分离人角膜内皮细胞

实验材料完整的人角膜试剂、试剂盒CMF-SalineG胰蛋白酶 EDTADMEM F-12 GASPDMEM F-12 2FB:DMEM:Ham’sF-12 1:1 含2%FBSCMF GASP仪器、耗材手术刀或单刃安全刀片弯虹膜剪 11cm(4-3 8 in.)Jeweler’s慑子 10cm(4

分离和培养人角膜内皮细胞实验

分离人角膜内皮细胞角膜内皮细胞的常规培养培养内皮细胞球实验方法原理实验材料完整的人角膜试剂、试剂盒CMF-SalineG 胰蛋白酶 EDTA DMEM F-12 GASP DMEM F-12 2FB:DMEM:Ham’sF-12 1:1 含2%FBS CMF GASP仪器、耗材手术刀或单刃安全刀片

分离和培养人角膜内皮细胞实验

分离人角膜内皮细胞角膜内皮细胞的常规培养培养内皮细胞球实验方法原理实验材料完整的人角膜                                                                                      试剂、试剂盒CMF-SalineG    

分离和培养人角膜内皮细胞实验

实验方法原理 实验材料 完整的人角膜试剂、试剂盒 CMF-SalineG胰蛋白酶 EDTADMEM F-12 GASPDMEM F-12 2FB:DMEM:Ham’sF-12 1:1 含2%FBSCMF GASP仪器、耗材 手术刀或单刃安全刀片弯虹膜剪 11cm(4-3 8 in.)Jeweler’

分离和培养人角膜内皮细胞实验—角膜内皮细胞常规培养

实验材料角膜内皮细胞试剂、试剂盒CECM胰蛋白酶 EDTA仪器、耗材6孔板实验步骤(a)将细胞接种于包被有FNC的6孔板中。(b)每3天换液一次。(c)当细胞90%汇合时用胰蛋白酶消化传代。

分离和培养人角膜内皮细胞实验——培养内皮细胞球

实验材料角膜内皮细胞试剂、试剂盒ESM胰蛋白酶 EDTA仪器、耗材未经组织培养处理的24孔板实验步骤(a)胰蛋白酶消化细。(b)将分离出的细胞用培养基以10个细胞/μL的密度重悬,并接种于未经组织培养处理的24孔板中。(c)7天后用胰蛋白酶消化细胞并离心收集细胞,继续接种。

培养人角膜间质干细胞实验

实验方法原理实验材料完整的人角膜                                                                                      试剂、试剂盒CMF-SaIineG                              

培养人角膜间质干细胞实验

实验方法原理实验材料完整的人角膜试剂、试剂盒CMF-SaIineG 中性蛋白酶II L型胶原酶 1mg ml在DMEM F-12 GASP中 CMF-SaIineG配制的TrypLEExpress或0.25%膜蛋白酶 DMEM  F-12 GASP DMEM F-12 2FB GASP:DMEM F

培养人角膜间质干细胞实验

实验材料完整的人角膜试剂、试剂盒CMF-SaIineG中性蛋白酶IIL型胶原酶 1mg ml在DMEM F-12 GASP中CMF-SaIineG配制的TrypLEExpress或0.25%膜蛋白酶DMEM F-12 GASPDMEM F-12 2FB GASP:DMEM F-12 GASP含2%F

日本团队成功培养人类角膜内皮细胞并移植成功

  美国医学杂志《The New England Journal of Medicine》近日发表了一篇论文,介绍了日本京都府立医科大学的研究团队利用从志愿者提取的角膜内皮细胞,成功治愈了“水泡性角膜症”。   “水泡性角膜症”是一种严重影响患者生活质量的难治眼疾。覆盖于角膜最内层的角膜内皮细胞,对

日本团队成功培养人类角膜内皮细胞并移植成功

  美国医学杂志《The New England Journal of Medicine》近日发表了一篇论文,介绍了日本京都府立医科大学的研究团队利用从志愿者提取的角膜内皮细胞,成功治愈了“水泡性角膜症”。图片来源于网络  “水泡性角膜症”是一种严重影响患者生活质量的难治眼疾。覆盖于角膜最内层的角膜

血管内皮细胞的分离和培养_分离小鼠心脏内皮细胞

实验方法原理本方法是由 Marelli-Berg 等 [ 2000 ] 的方法改写的。实验材料小鼠心脏胶原蛋白酶A无关对照抗体大鼠抗小鼠内皮糖蛋白(endoglin)(CD105)抗体山羊抗大鼠IgG微珠试剂、试剂盒MCEC生长培养液非内皮细胞培养液HBSS PSHHSS FBCMF胰蛋白酶和EDT

血管内皮细胞的分离和培养_分离人心脏内皮细胞(HCEC)

实验方法原理根据 McDouall 等 [ 1996 ] 的方法可以分离人的 CEC。实验材料Ⅱ型胶原蛋白酶试剂、试剂盒HCEC生长培养液仪器、耗材磁珠实验步骤1. 按分离小鼠心脏内皮细胞的步骤操作。2. 在步骤 7 用 Ⅱ 型胶原蛋白酶(1 mg/ml)消化组织。3. 按照方案23.28C 的步骤

血管内皮细胞的分离和培养_分离人脐静脉内皮细胞

实验方法原理本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改写的。实验材料D-PBSA胰蛋白酶EDTA人脐带胶原蛋内酶H冷的新生小牛血试剂、试剂盒Hank平衡盐溶液HBSS PSG70%乙醇HUVRC生长培养液仪器、耗材培养瓶手术刀和22号刀片手术针20ml注射器鳄鱼夹动脉夹尖头剪棉纸铝箔塑料

血管内皮细胞的分离和培养_分离牛主动脉内皮细胞

实验方法原理本方法是由 Bravery 等 [ 1995 ] 的方法改写的。实验材料HBSS PSGA新鲜猪主动脉胶原蛋白酶HFBS试剂、试剂盒PAEC生长培养液实验步骤1. 将铝箔铺在软木板上。2. 将主动脉(新鲜猪主动脉:如条件允许,需无菌取材。放入 HBSS/PSGA 中转运)放于 70 %

正常角膜内皮细胞培养

正常角膜内皮细胞培养实验材料:1. 角膜材料:可以取自人眼、兔眼或者牛眼,人眼材料最好来自胎儿;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 特殊器械:虹膜恢复器;4. 消毒液:1:5000的升汞溶液与100IU/ml的庆大霉

血管内皮细胞的分离和培养

实验方法原理 本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改写的。实验材料 D-PBSA胰蛋白酶EDTA人脐带胶原蛋内酶H冷的新生小牛血试剂、试剂盒 Hank平衡盐溶液HBSS PSG70%乙醇HUVRC生长培养液仪器、耗材 培养瓶手术刀和22号刀片手术针20ml注射器鳄鱼夹动脉夹尖头剪棉纸

血管内皮细胞的分离和培养

分离人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分离牛主动脉内皮细胞(PAECs)分离小鼠心脏内皮细胞(MCECs)分离人心脏内皮细胞(HCEC)实验方法原理本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改写的。实验材料D-PBSA                                    

正常人角膜上皮细胞和干细胞的分离实验

实验材料:1. 完整的人角膜;2. GMF-Saline G;3. 中性蛋白酶Ⅱ,1.2U/ml(用DMEM/F12/GASP稀释2.4U中性蛋白酶Ⅱ);4. 胰蛋白酶/EDTA;5. DMEM/F12/GASP;6. DEME/F12/2FB/GASP:DMEM/F12/GASP含2%FBS;7.

人角膜内皮细胞的小秘密

  人角膜内皮细胞主要功能:(1) 人角膜是无血管的组织,具有透明的特性和合成许多蛋白的功能。分三层细胞层,外层即是上皮细胞。(2) 角膜内皮细胞对角膜透明性有重要作用。(3) 角膜内皮细胞通过Na+-K+-ATP酶活性,维持角膜和房水内Na+梯度,防止水分渗入角膜内,维持角膜实质层相对脱水状态,维

人脐带静脉内皮细胞的分离培养与增殖实验

            实验方法原理 在体外,内皮细胞在内皮细胞生长因子存在的条件下可迅速增殖,并可传代,可作为内皮细胞增殖,细胞因子分泌、表型等研究的模型。 实验材料 胶原酶

人脐带静脉内皮细胞的分离培养与增殖实验

            实验方法原理 在体外,内皮细胞在内皮细胞生长因子存在的条件下可迅速增殖,并可传代,可作为内皮细胞增殖,细胞因子分泌、表型等研究的模型。 实验材料 胶原酶

人脐带静脉内皮细胞的分离培养与增殖实验

实验方法原理在体外,内皮细胞在内皮细胞生长因子存在的条件下可迅速增殖,并可传代,可作为内皮细胞增殖,细胞因子分泌、表型等研究的模型。实验材料胶原酶血清试剂、试剂盒Cord Buffor硫酸链霉素生埋盐水EDTA-Na明胶仪器、耗材插管止血钳注射器手套丝线饭盒匀浆机离心机振荡器培养瓶CO孵箱显微镜超净

日本专家:移植角膜内皮细胞可恢复视力

  日本京都府立医科大学、同志社大学和滋贺医科大学的研究人员12日宣布,他们在进行临床研究时,通过向大泡性角膜病变患者的角膜直接注入经过培养的异体角膜内皮细胞,成功恢复了患者的视力。  角膜是位于眼球前壁的一层透明膜,角膜内皮细胞位于角膜最内侧,能够调整水分,具有保持角膜透明性的作用。大泡

日本确认移植角膜内皮细胞安全有效

   英国《自然》杂志近日在线发表了一项癌症研究成果,欧洲科学家研发了一种全新机器学习程序,通过DNA甲基化数据——“甲基化指纹”技术可以改善脑肿瘤的诊断。   正确诊断肿瘤,对于癌症的治疗至关重要。但是,在已知的约100种肿瘤中,中枢神经系统肿瘤尤其难以准确鉴定出来。   为了解决这个问题,德

角膜内皮细胞计数仪的正常值

  除这些症状角膜炎:羞明、流泪、疼痛、眼睑闭锁、结膜潮红。外伤所致的则角膜表面粗糙不平,角膜混浊,有的较轻微,只是一层半透明的薄翳,有的较厚,呈不透明的白膜之外,都属正常范围。

角膜内皮细胞计数仪的临床意义

  异常结果:由于内皮功能自发性代偿失调,或角膜外伤,不适当的角膜放射状切开,白内障,青光眼等内眼手术后所造成的角膜内皮损伤,功能失调所致。  需要检查的人群:角膜内受伤患者。

日本确认移植角膜内皮细胞安全有效

  据新华社电 日本研究人员最新宣布,经过长期跟踪研究,他们确认了通过移植角膜内皮细胞治疗角膜病变的安全性和有效性。这一成果有望帮助解决角膜移植供体不足的问题。   角膜是位于眼球前壁的一层透明膜,角膜内皮细胞位于角膜最内侧,具有保持角膜透明性的作用。大泡性角膜病变是外伤等原因导致的角膜混浊疾病,

人脐静脉内皮细胞分离培养仪器试剂和操作步骤

溶液以及器材:1、用RPMI-1640配I型胶原酶 0.1g/100ml2、配三抗:青霉素:100ku/L链霉素:100ku/L庆大霉素:100ku/L3、培养液(M199+ECGS[3ug/ml]+15%胎牛血清)有EGF可以适当加点10ng/ml4、大瓶生理盐水5、广口瓶(脐带数+1)6、止血钳

正常人角膜上皮细胞和干细胞的分离

实验材料: 1.完整的人角膜; 2.GMF-Saline G; 3.中性蛋白酶Ⅱ,1.2U/ml(用DMEM/F12/GA稀释2.4U中性蛋白酶Ⅱ); 4.胰蛋白酶/EDTA; 5.DMEM/F12/GA; 6.DEME/F12/2FB/GA:DMEM/F12/GA含2%F;