正常角膜缘干细胞的免疫染色实验

正常角膜缘干细胞的免疫染色试剂和材料:1. 一抗:(1) ABCG2-----------------小鼠单克隆BXP-21---------1:100(2) 连接蛋白-43-----------兔多克隆CX43-------------1:100(3) 细胞角蛋白3(K3)-----小鼠单克隆AE5----------- 1:500(4) 细胞角蛋白12(K12)---兔多克隆J7-------------- 1:2002. 二抗;(1) 抗小鼠IgG-------------Alexa-488----------------1:2500(2) 抗兔IgG---------------Alexa-546----------------1:15003. 封闭抗体:PBSA配制的10%热灭活羊血清;4. Trion X-100;5.......阅读全文

重组MVA活体免疫染色实验

基本方案             实验方法原理 活体免疫染色可用于检测改造的痘苗病毒Ankara (MVA),因为MVA不能形成分开的、易辨认的噬斑,并且这种技术不需要利用筛选的标记

重组MVA活体免疫染色实验

实验方法原理 活体免疫染色可用于检测改造的痘苗病毒Ankara (MVA),因为MVA不能形成分开的、易辨认的噬斑,并且这种技术不需要利用筛选的标记基因。实验材料 汇片生长的CEF细胞试剂、试剂盒 完全 MEM-2、MEM-2.5 和 MEM-10 培养基转染细胞裂解液干冰/乙醇抗外源基因表达蛋白一

重组MVA活体免疫染色实验

实验方法原理活体免疫染色可用于检测改造的痘苗病毒Ankara (MVA),因为MVA不能形成分开的、易辨认的噬斑,并且这种技术不需要利用筛选的标记基因。实验材料汇片生长的CEF细胞试剂、试剂盒完全 MEM-2、MEM-2.5 和 MEM-10 培养基转染细胞裂解液干冰/乙醇抗外源基因表达蛋白一抗辣根

免疫染色法检定蛋白质

实验概要转印到纸上的蛋白质抗原,可与其专一性抗体结合,再以二次抗体-酶结合体(2nd Ab-HRP) 或Protein A-HRP 呈色;可在一群转印色带中,专一性地挑出目标蛋白质,是最有用的检定工具。主要试剂1. 抗体溶液:可用传统抗血清或单株抗体,其最适使用浓度,随抗体效价不同而异,以下为一般适

免疫染色法检定蛋白质

实验概要转印到纸上的蛋白质抗原,可与其专一性抗体结合,再以二次抗体-酶结合体(2nd Ab-HRP) 或Protein A-HRP 呈色;可在一群转印色带中,专一性地挑出目标蛋白质,是最有用的检定工具。主要试剂1. 抗体溶液:可用传统抗血清或单株抗体,其最适使用浓度,随抗体效价不同而异,以下为一般适

正常角膜缘干细胞的免疫染色

正常角膜缘干细胞的免疫染色试剂和材料:1.一抗:(1)ABCG2-----------------小鼠单克隆BXP-21---------1:100(2)连接蛋白-43-----------兔多克隆CX43-------------1:100(3)细胞角蛋白3(K3)-----小鼠单克隆AE5---

骨组织βgal免疫染色实验技术方法

ß-gal Staining:Reagents:0.1M Phosphate Buffer (pH 7.3):0.1M Sodium Phosphate monobasic115ml0.1M sodium phosphate dibasic385mlTotal Volume500 mlFix sol

荧光免疫染色和DAPI染色实验步骤

免疫染色实验方法和步骤免疫染色(immunol staining)包括免疫荧光(immunol fluorescence)、免疫组化(immunol histochemistry)、免疫细胞化学(immunol cytochemistry)等,可以参考如下步骤进行操作。 1. 样品准备(Sample

正常角膜缘干细胞的免疫染色实验

正常角膜缘干细胞的免疫染色试剂和材料:1. 一抗:(1) ABCG2-----------------小鼠单克隆BXP-21---------1:100(2) 连接蛋白-43-----------兔多克隆CX43-------------1:100(3) 细胞角蛋白3(K3)-----小鼠单克隆AE

细胞免疫染色和免疫组化有什么区别

如果你的片子和操作过程都是一样,而一组没信号、另一组却有信号,那出现差异的原因就应该是一抗的反应过程(不知你的显色过程是怎样的);而你要是能确定看到的结果不是基因表达的实际情况,即你所说的非特异染色,那就应该是抗体的原因,单就非特异染色而言,可能是你的抗体稀释度不够,可以尝试倍增稀释比,最好是查询使

细胞骨架观察实验—抗管蛋白免疫染色法

实验方法原理细胞骨架微管的主要成分主要为管蛋白(Tublin),用免疫荧光法能显出其清晰结构。实验材料细胞试剂、试剂盒PBS丙酮甲醛仪器、耗材碟皿恒温箱实验步骤1.  细胞培养用支持物细胞培养法,把细胞培养在小盖片上;2.  漂洗用镊子挟出小盖片,在温PBS中漂洗3 次,每次30 秒;3.  固定在

MVA-病毒储液制备实验——免疫染色法滴度测定

实验方法原理MVA 病毒滴度通常是用免疫染色法进行测定,因为 MVA 不能在 CEF 或 BHK-21 细胞中形成噬斑。实验材料CEF 或 BHK-21 细胞MVA病毒储液试剂、试剂盒MEM-10 和 MEM-2.5 完全培养基1:1 丙酮/甲醇PBS(含和不含3% FBS两种)PBS/H2O2兔抗

应用-APAAP-免疫染色和原位杂交进行序列的-MAC-分析实验

实验方法原理实验材料用于分析的空气干燥的细胞铺试剂、试剂盒甲醛缓冲的丙酮固定剂PBSFBS兔抗鼠Ig抗血清溶液APAAP 底物溶液5 % 的吉姆萨染液乙醇甲醇 冰乙酸固定剂生物素或地高辛标记的重复序列探针Harris苏木素染液氨水溶液仪器、耗材Coplin 缸封片媒介细胞离心涂片器过滤器保湿盒过滤膜

双酶双底物的双重免疫染色—多种组织抗原配对的双重酶

改良的 EnVision-HRP/AP 双酶双底物的双重免疫染色(间接法)——Ki-67-CK20 等多种组织抗原配对的双重酶实验步骤1. 恒冷切片或石蜡切片,厚 4~6 μm,常规处理。2. 0.1%NaN3+0.3%H2O2/TBS(50 mmol/L,pH 7.8)或 0.3%H2O2/甲醇,

双酶双底物的双重免疫染色—淋巴瘤轻链κ、λ的双重酶标记

实验步骤1. 石蜡切片常规脱蜡至水(若用含汞固定液固定的组织,则需用内含 0.5% 碘的乙醇溶液脱汞 5 min,乙醇浓度为 70%,经自来水洗后以 2.5% 硫代硫酸钠浸洗 1 min,水洗)。2. 0.3%H2O2 甲醇液浸泡切片 30 min,自来水洗,蒸馏水洗,入 PBS(0.01mol/L

放射自显影术与染色技术联合使用相关内容

  用放射自显影能够研究的任何细胞特征或抗原物质定位也可以用放射自显影和免疫染色联合进行研究。特别之处是同时进行抗原定位研究,操作过程直截了当。细胞用适当的方法进行放射性标记,接着进行固定和按所选用的免疫染色法进行染色(注意:此时样品和洗涤后的溶液应该作为放射性物品处理)。然后对细胞样品进行放射自显

免疫标记电镜技术标本制备的要求

  为保持组织的抗原性,固定剂不宜过强。  1.包埋前染色  优点是切片染色前不经过锇酸固定、脱水及树脂包埋等过程,抗原未被破坏,易于获得良好的免疫反应。特别适用于含抗原量较少的组织。  2.包埋后染色  优点是超微结构保存较好,方法简便,阳性结构有高度的可重复性,能在同一张切片上进行多重免疫染色。

关于病毒血清学检测—凝集实验的介绍

  凝集实验:颗粒性抗原与相应抗体结合后发生凝集的血清学试验。抗原与抗体复合物在电解质作用下,经过一定时间,形成肉眼可见的凝集团块。临床常用于鉴定菌种和梅毒感染的确认。6.病毒蛋白检测  病毒侵入宿主细胞后可合成自身结构蛋白与非结构蛋白,也可与宿主细胞发生相互作用而上调或下调宿主蛋白的表达,除直接检

免疫电镜技术(immunoelectronmicroscopy)的染色方法

免疫电镜技术与光镜免疫细胞化学染色方法的基本原理和试剂准备基本相同,相关内容可参考本书第四章,这里仅介绍免疫电镜的几种染色方法,包括包埋前染色、包埋后染色和冰冻超薄切片免疫染色三种。1.包埋前染色 包埋前染色即在进行常规电镜包埋处理前先行免疫组织化学染色,然后于解剖显微镜下将免疫反应阳性部位取出

一步法TUNEL细胞凋亡检测技巧及常见问题分析

1. 对于贴壁细胞或细胞涂片: a. PBS或HBSS洗涤一次。b. 如果细胞贴得不牢,可以干燥样品使细胞贴得更牢。c. 用碧云天生产的免疫染色固定液或4%多聚甲醛固定细胞30分钟。d. 用PBS或HBSS洗涤一次。e. 加入碧云天生产的免疫染色强力通透液或含0.3% Triton X-100的PB

电子显微镜免疫细胞化学技术1

免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细胞超微结构水平研究抗原抗体反应提供了可能。在此基础上,相继发展了杂交抗体

免疫细胞电镜技术

免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细胞超微结构水平研究抗原 抗体反应提供了可能。在此基础上,相继发展了杂交抗

电子显微镜免疫细胞化学技术1

免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细胞超微结构水平研究抗原抗体反应提供了可能。在此基础上,相继发展了杂交抗体

概述脊索瘤的分类

  病理分型:  1、普通型  又称典型型,最常见,占总数80%~85%。瘤内无软骨或其他间充质成分。多见于40~50岁患者,小于20岁者少见。无性别差异。在病理上可有几种生长方式,但片状生长为其特征,由空泡状上皮细胞和黏液基质组成。细胞角蛋白和上皮膜抗原的免疫染色阳性,电镜见核粒。这些特征有助于本

利用DeaLT技术揭示成人心肌细胞再生的来源(三)

相反,在阳性对照实验中,TA肌损伤模型中他莫昔芬诱导后可以很容易地检测到tdTomato+ZsGreen-肌细胞(箭头,图3M),而假手术组没有。图3.综合上述结果,第2种策略使用Tnnt2-Cre;R26-DreER;IR3也显示出与策略1一致的结果:非心肌细胞在胚胎心脏和成体骨骼肌中转化为肌细胞

CD3-CD8-计数高预后佳:急性粒细胞白血病新标志物

急性粒细胞白血病因其异质性在治疗方面要求个体化,细胞遗传学及分子遗传学为判断预后及指导个体化治疗提供了依据,但仍有部分患者缺乏此类标志,为个体化治疗带来困难。近年来,有报道称肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)可以独立判断预后,澳大利亚 Ling 医生研究了白血病浸润性淋巴细胞(LIL)在细胞遗传学正常 A

免疫铁蛋白电镜技术

1.基本原理 铁蛋白的分子量460kD,为一种含铁(约占23%)的蛋白质。直径10―12nm。目前常用的间接免疫染色技术是应用低分子量的双功能试剂将第二抗体与铁蛋白相连,制备标记抗体。此复合物既保留了抗体的免疫活性,又因铁蛋白含有2000―3000个铁原子的致密铁离子核心,形成四个圆形致密区,所以

脑内脊索瘤的病理分型

  脑内脊索瘤的病理分型一般分为普通型、软骨样脊索瘤、间质型。  普通型脑内脊索瘤  又称典型型,最常见。 占总数80%~85%。瘤内无软骨或其他间充质成分。多见于40~50岁患者,小于20岁者少见。无性别差异。在病理上可有几种生长方式,但片状生长为其特征,由空泡状上皮细胞和黏液基质组成。细胞角蛋白

双重染色抗体的选择

用未偶联一抗进行细胞培养物或组织切片的双重免疫染色要求一抗来源于不同物种并且二抗分别识别其中之一,二抗说明书应描述其与其它物种来源的免疫球蛋有否有交叉吸附。

病毒血清学检测实验方法

  1.病毒中和实验  是指病毒在活体内或细胞培养中被特异性抗体中和而失去感染性的一种试验。可用来检查患病后或人工免疫后机体血清中抗体的增长情况,也可用来鉴定病毒或研究其抗原结构。病毒中和实验可以在细胞培养、鸡胚或动物上进行,一般将抗体做稀释,与一定量的病毒混合,然后检测其在细胞培养、鸡胚或动物上的