平滑肌细胞的分离和培养

实验材料0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液试剂、试剂盒平滑肌培养液仪器、耗材Petri培养皿手术刀和10号手术刀片解剖剪组织镊实验步骤1. 从小牛取胸主动脉。2. 将胸主动脉浸入 Hanks 液。3. 分离细胞之前将动脉放在冰上。4. 将动脉放入 150 mm × 25 mm Petri 培养皿。5. 用解剖剪沿长轴剪开动脉。6. 用手术刀片轻刮动脉内腔面,以除去内皮细胞。7. 将动脉的中膜与内膜和外膜分离。8. 将中膜切成约 1 cm2 大小的组织块。9. 将中膜组织块放入 60 mm × 15 mm Petri 培养皿,内膜侧朝下。10. 让组织块贴壁约 10 min。11. 直接在组织块上注 1 ml SMCM(平滑肌培养液(smooth muscle cell medium,SMCM):DMEM 添加 20 % FBS,100 U/ml 青霉素和 100 μg/ml 链霉素)。12. 将组织块放入湿润的培养箱,......阅读全文

从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞

在添加 20 %(fetal bovine serum,FBS)的 Ham’s F12 培养中,原代细胞容易生长。在不改变培养条件的情况下,这些细胞增殖和分化,融合形成多个细胞核的肌管。这证明培养的细胞具有成肌性。实验方法原理在添加 20 %(fetal bovine serum,FBS)的 Ham

从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞

实验方法原理 在添加 20 %(fetal bovine serum,FBS)的 Ham’s F12 培养中,原代细胞容易生长。在不改变培养条件的情况下,这些细胞增殖和分化,融合形成多个细胞核的肌管。这证明培养的细胞具有成肌性。实验材料 D-PBSA试剂、试剂盒 转运培养液生长培养液链酶菌蛋白酶液仪

细胞技术专题:兔膀胱平滑肌细胞培养实验(一)

兔膀胱平滑肌细胞培养可以:(1)分离得到高纯度兔膀胱平滑肌细胞;(2)进行细胞学鉴定研究;(3)用于细胞学其他研究。实验方法酶分离法 实验方法原理运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下

细胞技术专题:兔膀胱平滑肌细胞培养实验(三)

 收起  注意事项1. 应严格无菌操作。2. 仔细彻底剥除膀胱黏膜、黏膜下及浆膜层,是确保获的大量高质单个膀胱平滑肌细胞的基础。3. 膀胱平滑肌组织应尽量减碎以确保充分消化。4. 严格控制胶原酶和胰蛋白酶的浓度和消化时间,见消化液混浊、组织块呈絮状,或在倒置显微镜下见消化液中有较多单个细胞或细胞小

人脐动脉平滑肌细胞培养实验——贴块法

实验方法原理运用贴块法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液胰蛋白酶胶原酶弹性蛋白酶DMEM仪器、耗材眼科剪滴管离心机培养皿CO2培养箱实验步骤一、实验步骤1.  要用胎牛血清。开始用的是小牛血清,所以总是不

细胞技术专题:人脐动脉平滑肌细胞培养实验

人脐动脉平滑肌细胞培养可以:(1)获得人脐动脉平滑肌细胞;(2)作为重大动脉疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法消化法 贴块法 实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。 实

细胞技术专题:兔膀胱平滑肌细胞培养实验(二)

二、结果 两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24 小时均可见膀胱平滑肌细胞贴壁生长,正常兔 7 天左右、而梗阻兔则需10~12 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。均传代顺利,传代后约正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。本组中均传至第8 代,经第8

胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法

胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法有贴块法(explant)和酶解离法(enzyme disperse)。下面一起来看下这两种方法。1、贴块法方法:动物经颈动脉放血后,在无菌操作下迅速取出胸腹主动脉段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3次,将凝块洗干净后剥除外膜的纤维脂肪层,然后纵行切开血

平滑肌细胞的功能分类介绍

  尽管体内各器官所含平滑肌在功能特性上判别很大,但一般可分为两大类:一类称为多单位(multi-unit)平滑肌,其中所含各平滑肌细胞在活动时各自独立,类似骨骼肌细胞,如竖毛肌、虹膜肌、瞬膜肌(猫)、以及大血管平滑肌等,它们各细胞的活动受外来神经支配或受扩散到各细胞的激素的影响;另一类称为单位(s

平滑肌细胞的收缩原理介绍

  平滑肌纤维和横纹肌一样是以“肌丝滑动”原理进行收缩的。由于每个收缩单位是由粗肌丝(肌球蛋白)和细肌丝(肌动蛋白)组成,它们的一端借细肌丝附着于肌膜的内面,这些附着点呈螺旋形。肌丝单位大致与平滑肌长轴平行,但有一定的倾斜度。粗肌丝没M线,表面的横桥有半数沿着相反方向摆动,所以当肌纤维收缩时,不但细

关于平滑肌细胞的形态介绍

  细动脉、小动脉、小静脉的管壁有平滑肌细胞:细动脉壁的平滑肌细胞多为一层。位于基底膜之外,而小动脉的平滑肌细胞呈二层或多层排列。位于内弹力板之外。典型的细静脉壁有一尚未发育成熟的平滑肌细胞:血管平滑肌细胞因部位不同(大动脉,肠系膜动脉,门静脉等)而有很大区别。  血管平滑肌细胞一般呈长梭形。其大小

从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验

分离培养细胞             实验方法原理 骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下,成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞,分

从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验

实验方法原理 在添加 20%(fetal bovine serum, FBS) 的 Ham's F12 培养中,原代细胞容易生长。在不改变培养条件的情况下,这些细胞增殖和分化,融合形成多个细胞核的肌管。这证明培养的细胞具有成肌性。试剂、试剂盒 Ham F12FBSD-PBSA仪器、耗材 手术

从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验

分离培养细胞             实验方法原理 骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下,成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞,分

大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验_贴块法

大鼠主动脉平滑肌细胞培养可用于:(1)获得大鼠主动脉平滑肌细胞;(2)用于血管疾病研究;(3)用于动脉疾病研究。实验方法原理运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料SD大鼠试剂、试剂盒PBSFBSDME

关于平滑肌细胞的器官分布介绍

  平滑肌广泛分布于人体消化道、呼吸道以及血管和泌尿、生殖等系统;它和骨骼肌不同,不是每条肌纤维(即肌细胞)的两端都通过肌腱同骨骼相连;平滑肌细胞互相连接,形成管状结构或中空器官;在功能上可以通过缩短和产生张力使器官发生运动和变形,也可产生连续收缩或紧张性收缩,使器官对抗所加负荷而保持原有的形状,前

简述平滑肌细胞的超微结构

  平滑肌纤维表面为肌膜,肌膜向下凹陷形成数量众多的小凹(caveola)。这些小凹相当于横纹肌的横小管。肌浆网发育很差,呈小管状,位于肌膜下与小凹相邻近。核两端的肌浆内含有线粒体、高尔基复合体和少量粗面内质网以及较多的游离核糖体,偶见脂滴。平滑肌的细胞骨架系统比较发达,主要由密斑、密体和中间丝组成

平滑肌细胞的光镜结构介绍

  平滑肌纤维呈长梭形,无横纹。平滑肌受自主神经支配,为不随意肌。该肌收缩缓慢、持久。细胞核一个,呈长椭圆形或杆状,位于中央,收缩时核可扭曲呈螺旋形,核两端的肌浆较丰富。平滑肌纤维大小不一,一般长200μm,直径8μm;小血管壁平滑肌短至20μm,而妊娠子宫平滑肌可长达500μm。平滑肌主要分布于血

关于平滑肌细胞的基本信息介绍

  平滑肌分布于一些内脏器官,在器官内多平行排列,组成平滑肌束或层构成管道或有腔器官的壁,如胃肠道、呼吸道、泌尿生殖道、血管和淋巴管的肌层,以及存在于某些实质器官的被膜内。平滑肌细胞具有2个基本特征:缺乏骨骼肌和心肌细胞所具有的横纹(这是平滑肌名称的由来)。  平滑肌(细胞)虽有如斧足类的闭壳肌和足

关于平滑肌细胞的活动控制调节介绍

  和平滑肌本身的特性具有多样性一样,它们活动所受的调控也是多种多样的,不象骨骼肌那样单纯。大多数平滑肌接受神经支配,包括来自自主神经系统的外来神经支配,其中除小动脉一般只接受交感系统一种外来神经支配外,其他器官的平滑肌通常接受交感和副交感两种神经支配。平滑肌组织、特别是消化管平滑肌肌层中还有内在神

SH30370.03胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法

Hyclone标准胎牛血清FBS SH30370.03胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法有贴块法(explant)和酶解离法(enzyme disperse)。下面一起来看下这两种方法。1、贴块法方法:动物经颈动脉放血后,在无菌操作下迅速取出胸腹主动脉段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3

一分钟带你了解动脉平滑肌细胞的原代培养流程

 动脉平滑肌细胞又叫平滑肌纤维,系构成平滑肌的纤维状长细胞。在制作切片标本时,如肌细胞收缩则可变粗,核也随之变粗,甚至可出现螺旋形的扭曲。平滑肌细胞外面包有1层肌膜。每个平滑肌细胞周围有少量纤细的胶质纤维、弹力纤维及网状纤维,包绕于肌膜的表面。    动脉平滑肌细胞培养:取5kg左右实验兔,于无菌条

厌氧菌的分离和培养

1 目的1.1 了解厌氧微生物的生长特性1.2 观察厌氧微生物(双歧杆菌)的形态特征1.3 掌握厌氧微生物的滚管分离、培养与计数技术 2 原理目前培养厌氧微生物的简便而又有效的技术包括有:厌氧箱培养技术;厌氧罐培养技术;厌氧袋培养技术;亨盖特厌氧滚管技术.这里介绍的是亨盖特厌氧滚管技术.亨盖特厌氧滚

人血管平滑肌细胞的贴壁生长和悬浮生长细胞处理方法

 贴壁生长的细胞:  1、贴壁生长的细胞用T25细胞培养瓶发货,收到细胞后,拆开自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒。   2、消毒后用显微镜观察细胞状态,并拍下细胞照片。   3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。   4、平衡后将T25瓶中培养基吸出用

人PBMC分离和培养

1、将静脉血20ml用ACD抗凝剂以容积比血:抗凝剂=9:1抗凝处理2、按血:分离液=1:2注入国产淋巴细胞分离液上层,400g 20℃离心30分钟3、交接层重浮于4倍体积的RPMI1640并通过离心法200g,10min洗三次4、获得细胞可做分选或其他实验。体会:1、实验中我用过肝素方法抗凝,但效

新生大鼠心脏细胞的分离和培养实验_分离及培养程序

实验材料Sprague Dawley 幼鼠试剂、试剂盒胰酶液乙醇仪器、耗材搅拌台烧杯实验步骤组织消化和分离细胞1. 在细胞操作间内,放一个加热搅拌台,上放一个装有 100 ml 灭菌水的容量 600 ml 的烧杯,加热至 37℃。2. 准备胰酶液。用水浴或温箱使胰酶液温度保持在 37℃。3. 做一个

细菌的分离培养、纯培养和生化试验

一、目的掌握细菌  培养、纯培养与基本微生物操作技能,了解生化试验原理、方法和意义。二、实验内容(一)细菌的分离培养:倾注法和划线法(倾注法:此法很少应用)本次试验采用前一种方法)划线法:融化普通琼脂  培养基,倒平板,杂检。取1号菌如图1之一方法划线,37℃培养24h。(二) 钓菌和纯培养:观察菌

细菌的分离培养、纯培养和生化试验

一、目的 掌握细菌  培养、纯培养与基本微生物操作技能,了解生化试验原理、方法和意义。 二、实验内容(一)细菌的分离培养:倾注法和划线法(倾注法:此法很少应用)本次试验采用前一种方法)划线法: 融化普通琼脂  培养基,倒平板,杂检。取1号菌如图1之一方法划线,37℃培养24h。

骨骼肌细胞培养

  1.杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5厘米小块。  2.用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过,合成培养基加10%小牛血清培养,为促进分化可加1%的胎汁。  3.细胞接种量为2×106/皿,接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化。明胶制备比较简单,

小鼠角质细胞的分离和培养

实验概要本实验是根据Hennings等(1980)的方法改进而来的。该方案也适用于原代大鼠角质细胞的分离。主要试剂HBSS: NaCl 8g/L KCl 400mg/L KH2PO4 60mg/L 无水Na2PO4 47.86mg/L 无水葡萄糖 1000mg/L NaHCO3 350mg/L实验