细胞毒性T淋巴细胞的诱导及检测
实验步骤基 本 方 案 1 从 C TL 前体中诱导细胞毒性注意：反应细胞应根据抗原的种类选择是否需要进行体内致敏。材 料反应细胞来源：未致敏的或者体内致敏的小鼠脾脏细胞（见辅助方案 1 和 2致敏培养基刺激细胞来源：未修饰或半抗原修饰的小鼠脾脏细胞（见辅助方案 3)R P M I -1 0 完全培养基H B S S 溶 解 的 0.5m g / m l 丝裂霉素 C (避光保存）刀豆蛋白 A (选用）：以 or 甲基-D -甘露糖苷中和后加上清至培养细胞中IL-2 (选用）带有旋盖的 15 ml —次性聚苯乙烯圆锥管（如 Falcon)2 4 孔平底微量滴定板， 2m l 容积，带 盖 子（如 Costar)注 ：实验小鼠应避免影响实验结果的感染，如 m y c o p l a s m a 和 免 疫 抑 制 性 病 毒（如基本方案 2 络释放法分析 CTL 活性材 料辅 助 方 案 1 次要组织相容性抗原的小鼠体内应答为在体......阅读全文
细－胞－毒－性－T－淋－巴－细－胞－的－诱－导－及－检－测
实验步骤基 本 方 案 1 从 C TL 前体中诱导细胞毒性注意：反应细胞应根据抗原的种类选择是否需要进行体内致敏。材 料反应细胞来源：未致敏的或者体内致敏的小鼠脾脏细胞（见辅助方案 1 和 2致敏培养基刺激细胞来源：未修饰或半抗原修饰的小鼠脾脏细胞（见辅助方案 3)R P M I -1 0 完全培
流－式－细－胞－仪－检－测－全－血－的－人－淋－巴－细－胞
实验步骤基本方案材 料（打 V 项 目 见 附 录 1)全血，通 常 用 E D T A 抗凝P B S ，有 或 无 0.1% (m /V ) 叠氮钠，过滤除菌单 克 隆 抗 体（标记的，未标记的或生物素化的），通过滴定确定最佳工作浓度间 标 二 抗（仅用于未标记的一抗）F T T C 标记的链霉
α、－β和－γ干－扰－素－诱－导－的－抗－病－毒－活－性－的－检－测
实验步骤基 本 方 案 小 鼠 干 扰 素 诱 导 的 抗 病 毒 活 性 的 检 测材 料干扰素敏感的 L 929 成纤维细胞E M E M 培 养 基（Eagle 氏最低要求培养基）胰酶消化液检 测 样 品（具干扰素活性的血清或培养上清）小鼠干扰素的参照标准品 α -干扰素、β-干扰素、 γ-干
抗－体－的－体－内－诱－导－和－检－测
实验步骤基 本 方案 1 蛋白质或多糖抗原体内法诱导抗体的产生材 料人外周血类毒素混合物： 25Lf U/ml 白 喉 类 毒 素（Connaught Laboratories 或 State Laboratoriy Institute of Massachusetts) 与 IOLf U/ml 破
ELISPOT方－法－检－测－分－泌－细－胞－因－子－的－细－胞
实验步骤基本方案材 料包被缓冲液洗液：含 0.25% (v/v) Tween 20 的 PBS 溶液阻断缓冲液：含 5 % (m/V) BSA 或 FCS 的 PBS 溶液VRPMMO 完全培养基（或其他适宜培养基）分泌细胞因子的细胞（小鼠或人的）丝裂原，抗原或其他促细胞因子分泌的刺激物带有标记物的
淋－巴－细－胞－活－化－过－程－中－肌－醇－磷－脂－周－转－的－分－析
实验步骤基 本 方 案 1 通 过 道 威 克 斯（DOWEX) 离 子 交 换 层 析 分 析 [3H] 肌醇磷酸材料备 选 方 案 通 过 HPLC 方 法 分 析 [3H] 肌醇磷酸附加材料[3 H ] InsP 样 本（见基本方案，步 骤 6) 和标准品除 气 的 H PLC 级水2mol/
巨－噬－细－胞－抗－肿－瘤－活－性－的－检－测
实验步骤基本方案 [111In] 释放法检测巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤作用材 料辅助方案 [111In ] 标记肿瘤靶细胞材 料展开
NK/L－A－K－细－胞－杀－伤－活－性－的－检－测
实验步骤基 本 方案 51C r 释 放 法检 测 NK/LA K 细胞杀伤活性材 料展
B－细－胞－分－泌－抗－体－的－检－测
实验步骤基 本 方案材 料外周 血 单 个 核 细 胞（P B M C ; 单 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培养基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 养 板（Costar)1 . 计 数 PBMC (附录 3A ) ， 用 RPMI-5 完全培养基调整浓度至 4 X 10
BrdU－检－测－丁－细－胞－和－B－细胞增殖
实验步骤基本方案材 料实验动物0.8m g / m l B r d U (Sigma) 水 溶 液（口 服用）或 4m g / m l B r d U P B S 溶 液（注射用)P B S ， p H 7. 40.15mo l / L 冰冷的 NaCl冰 冷 的 9 5 % 乙醇多聚甲醛固定液D
巨－噬－细－胞－一－氧－化－氮－的－检－测
实验步骤基本方案材料展开
小－鼠－巨－噬－细－胞－的－表－型－检－测
实验步骤基 本 方 案 直 标 法 检 测 小 鼠 巨 噬 细 胞 的 表 型材料Sorvall RT 6000B 离心机I . 准 备 4 只 12m m X 75m m 试管，将试管编号为 1〜4。每 管 中 加 入 2 X IO7个细胞/ml细胞悬液 50ul。2.每管加入 3 mg/ml 阻
B－细－胞－功－能－的－增－殖－检－测－方－法
实验步骤基 本 方 案 抗 I g M 与 L P S 刺激的 B 细胞增殖材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)纯化的静息 B 细 胞（单 元 2. 5)，采 用 Percoll 梯度离心制备V D M E M -10 完全培养基山羊抗 IgM (JacksonImmunoresearch) 或
PCR－检－测－细－胞－因－子－m－R－N－A－的表达
实验步骤基 本 方 案 定 量 IL -2 mRNA表达水平材 料内参照：转 录 质 粒 载 体（含有临床生物检测标本相关的c D N A )胍盐溶液50 U/ul RNasin5 X 反转录酶缓冲液0.5m g / m l olig (d T )16l m g /m l 乙酰化的B S A4d N
α、β和γ干扰素诱导的抗病毒活性的检测
基 本 方 案 小 鼠 干 扰 素 诱 导 的 抗 病 毒 活 性 的 检 测材 料干扰素敏感的 L 929 成纤维细胞E M E M 培 养 基（Eagle 氏最低要求培养基）胰酶消化液检 测 样 品（具干扰素活性的血清或培养上清）小鼠干扰素的参照标准品 α -干扰素、β-干扰素、 γ-干 扰 素
P－C－R－检－测－小－鼠－T－细－胞－受－体－表－达
实验步骤 基本方案 I P C R 分析小鼠 T C R 基因表达材 料正常小鼠的组织匀浆或者是 H B S S 制备的单个细胞悬液（IO4〜IO7) (附 录 1)无菌水展开
293T－细－胞－包－装－和－扩－增－反－转－录－病－毒
实验步骤基 本 方 案 1 磷酸钥/DNA 沉 淀瞬时转染 Phoenix 反转录包裝细胞展
巨－噬－细－胞－吞－噬－功－能－和－杀－伤－功－能－的－检－测
实验步骤基本方案1 巨噬细胞吞噬功能的检测材 料单核/巨噬细胞：如巨噬细胞株、小鼠腹腔巨噬细胞[单元6.1，需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸盐肉汤]，或 人 P B M C (单 元 8.1)平衡盐溶液（balanced salt solution， BSS)细菌（如单核
干细胞的鉴定实验——流－式－细－胞－仪－检－测－分－析－技－术
实验步骤流 式 细 胞 仪 检 测 分 析 技 术实 验 材 料(1) 不同来源的干细胞，细胞数不少于 5xl0 5 个/管。(2) 荧光标记的抗体或抗体及荧光二抗。(3)PBS。实 验 步 骤(1) 将 细 胞 用 PBS 充分洗涤后重悬于 5000 PBS 中，如果细胞收集和鉴定不能同天完成，可
P－C－R－检－测－人－T－细－胞－受－体－基－因－的－表－达
实验步骤 基 本 方 案 PCR检 测 人 T 细胞受体基因的表达展
外－源－性－抗－原－向－T－细－胞－的－呈－递
实验步骤基本方案 一 种 抗 原 加 工 处 理 和 呈 递 的 检 测 体 系材 料具有增殖能力的（如转化的 B 细胞）或非增殖的且与 T 杂交瘤细胞 M H C 匹配的抗原呈递细胞（单 元 7.1)D M E M -1 0 完全培养基， 37°C对数生长期的 T 杂交瘤细胞抗原：溶解于水的蛋白质
H－I－V－的检测与分析——感染CD4+原代细胞系及H－I－V－的诱导
实验步骤感 染 CD4+ 原 代 细 胞 系 及 H I V 的诱导基本方案1 用 H IV 体 外 急 性 感 染CD4 + 原代细胞及细胞系表9.2.1列出了一些最常用于体外H I V 感 染 的 C D 4 + 靶细胞。用其他不同谱系的C D 4 + 细胞系也可获得相应的结果，还 有 一 些
T－细－胞－克－隆－的－建－立
实验步骤基本方案 1 产生和维持同种反应性 T h 和 CTL 克隆尽管同种反应性 T 细胞可以从未刺激的脾细胞或淋巴结细胞中产生，但如果细胞在初次混合淋巴细胞（M L C ) 中第一次被同种抗原刺激，反应细胞的得率会更高。见以下介绍。材 料同种反应性小鼠脾脏 T 细胞V H B S S (可选使用
蚕蛾性诱醇的定义
中文名称蚕蛾性诱醇英文名称bombykol定 义家蚕 (Bombyx mori) 雌蛾分泌的引诱异性的性信息素，其成分为反-10，反-12-十六碳二烯醇。应用学科昆虫学（一级学科），昆虫行为与信息化学（二级学科）
家蝇性诱剂的概念
中文名称家蝇性诱剂英文名称muscalure定 义雌性家蝇分泌的，能引诱雄性家蝇的性信息素，主要成分为顺-9-二十三碳烯。应用学科生态学（一级学科），化学生态学（二级学科）
什么是性诱剂？
中文名称性诱剂英文名称sex attractant定 义对成熟动物有性引诱作用的化学物质，包括性信息素和有相似作用的类似物。应用学科生态学（一级学科），化学生态学（二级学科）
小－鼠－巨－噬－细－胞－的－分－离
实验步骤基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离材料小鼠，洁 净 环 境 中 饲 养（最好置层流柜中饲养）7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 盐 肉 汤（Brewerthioglycollate medium，分离炎性腹腔巨嗤细
粉纹夜蛾性诱剂的概念
中文名称粉纹夜蛾性诱剂英文名称looplure定 义粉纹夜蛾雌蛾释放的，能引诱同种雄蛾交配的性信息素，含顺-7-十二碳烯基乙酸酯和十二烷基乙酸酯两种成分。应用学科生态学（一级学科），化学生态学（二级学科）
舞毒蛾性诱剂的概念
中文名称舞毒蛾性诱剂英文名称disparlure定 义舞毒蛾雌蛾释放的，能引诱同种雄蛾交配的性信息素，化学成分为(+)顺-7,8-环氧-2-甲基十八烷。应用学科生态学（一级学科），化学生态学（二级学科）
红铃虫性诱剂的概念
中文名称红铃虫性诱剂英文名称gossylure定 义红铃虫雌蛾释放的性信息素，含顺-7，顺-11-十六碳二烯基乙酸酯和顺-7，反-11-十六碳二烯基乙酸酯(1NA1C3 1)两种成分。应用学科生态学（一级学科），化学生态学（二级学科）