外周血和脐带血中分离单个核细胞—FicollHypaque梯度离心法
外周血单个核细胞可应用于： （1）免疫学（包括自身免疫性疾病），传染病，血液系统恶性肿瘤，疫苗开发，移植免疫学研究； （2）预测药物和异生素免疫抑制作用； （3）高通量筛选本实验来自「精编免疫学实验指南」作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，实验方法原理FicoH-Hypaque（又称淋巴细胞分层液）梯度离心法是一种单次密度梯度离心分离法。实验采用FicoH-Hypaque分层液。蔗糖聚合物称聚蔗糖（商品名为Ficoll），分子量为40kD，具有高密度、低渗透压、无毒性的特点。高浓度的Ficoll溶液粘性高，易使细胞聚集，使用60g/L的低浓度Ficoll溶液，添加泛影葡胺（urografin）（国外常用商品Isopaque或Hypaque，故又称Ficoll-Hypaque分层液），可配制成密度合适分层液。因为人的红细胞密度为1.093，粒细胞密度为1.092，单个核细胞在1.076——1.090之间，所以密度为1.077±......阅读全文
血细胞分离培养方法和步骤2
收集浑浊带分离获得的淋巴细胞，用无钙、镁离子的PBS洗3次后，再用培养基洗1次后计数，分瓶培养。此法分离获得淋巴细胞纯度高。分离液的制备：9% Ficoll（20℃下相对密度约1.020）24份与33.4%泛影葡胺（用泛影钠或Conray400也可，在20℃下相对密度约1.200）10份混合后，
从单个核细胞中分离T细胞（玫瑰花结形成试验、尼龙毛、...
从单个核细胞中分离T细胞一、用玫瑰花结形成试验分离E＋细胞1．制备AET-绵羊红细胞1）在刻度离心管中，用无菌的含5％小牛血清的Hanks液洗涤绵羊红细胞3次，每次离心500×g 10分钟。2）吸净上清液，测量红细胞比容。轻击试管分散红细胞，加入4倍红细胞比容量、新鲜制备的AET溶液，混匀。室温中反
正常人外周血白细胞和红细胞的分离
实验概要正常人外周血红细胞与白细胞的比例约为6000～1000:1，两类细胞的沉降速度不同，可进行正常人外周血白细胞分离。利用高分子量的聚合物促使红细胞凝聚成串钱状，从而加速红细胞沉降，使之与白细胞分离。常用的高分子聚合物有明胶、右旋糖酐、聚乙烯吡咯烷酮（PVP)及甲基纤维素等。本实验对正常人外周血
淋巴细胞分离液的分离原理
外周血中单个核细胞和单核细胞，其体积、形态和密度与其他细胞不同。淋巴细胞分离液是一种密度介于1.075∽1.090之间而近似于等渗的溶液，用它做密度梯度离心，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。
免疫细胞的分离
免疫细胞的分离： （1）外周血单个核细胞的分离 外周血中单个核细胞（淋巴细胞和单核细胞）的比重与红细胞、多核白细胞及血小板不同，介于1.075-1.090之间，因而可利用一种比重介于1.075-1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心，使一定比重的细胞按相应密度梯度分布而加以分离。常用的
超速离心分离技术密度梯度离心法
密度梯度区带离心法是将样品加在惰性梯度介质中进行离心沉降或沉降平衡，在一定的离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上，形成不同区带的分离方法。此方法主要依据颗粒与介质间的密度差（ρ－ρ０）不同进行分离的。适用于那些沉降系数相差不大而密度值却有明显差别的颗粒，也就是那些Ｓ值相近而ρ值相远的颗粒。惰性梯
利用碘克沙醇梯度溶液分离动物细胞核
实验概要本实验使用碘克沙醇密度梯度溶液从动物肝脏中分离纯化了动物细胞核。主要试剂1. OptiPrepTM(600g碘克沙醇，ρ=1.32g/ml)；2. OptiPrepTM稀释剂(OptiPrepTM diluent，OD)：150mmol/L KCl、30mmol/L MgCl2、120mmo
实验室离心机常用的几种离心方法
目前，实验室常用的离心方法有下面几种：(1)差速离心法(又称分步离心法) 采用不同的离心速度和离心时间,使沉降速度不同的颗粒分步离心的方法,称为差速离心。操作时,将含有两种不同颗粒的混悬液,以常速离心，使大的颗粒下沉，将上清液倾倒于另一离心管中，再加大离心力，离心一定时间，分离小的颗粒，反复多次分离
小鼠脾脏有多少pbmc
5 millions/20millions小鼠外周血单个核细胞采用密度梯度离心法结合差速贴壁法分离自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中首次
Percoll非连续性密度梯度离心法单核细胞的分离实验
基本原理：本文分离单核细胞所用方法是Percoll非连续性密度梯度离心法，主要是根据不同细胞间密度的差别进行细胞分离。此法易操作，且使用通常的实验设备即可完成。试剂与器材·外周血单个核细胞·PBS 1×和PBS 10×（无Ca2+、Mg2+），含0.5mM EDTA·胎牛血清（56℃，30分钟加热灭
大鼠外周血淋巴细胞分离液
【检验方法】全过程样本、试剂及实验环境均需在20±2℃的条件下进行。首先取抗凝血按体积比 1:1的比例与样本稀释液（产品编号：2010C1119）混匀，根据稀释后的样本量大小，分以下两种情况：情况 A：稀释后的血液样本量小于 5ml时，实验方法如下：1.取一支15ml离心管，先加入与稀释后样本等量的
淋巴细胞分离液的原理及使用注意事项
淋巴细胞分离液是一种根据细胞密度差异，借助离心产生的重力加速度，进行细胞的分离纯化的常用试剂。可用于体外分离外周淋巴血细胞，也可以从其他来源中分离单核细胞，包括脐带血细胞和骨髓细胞，适用于从血液及组织匀浆中分离所需细胞，在医疗和医学生物中广泛应用。其他人及动物多种比重细胞分离液。 淋巴细胞分离液的原
细胞分离纯化技术
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞 实验方法原理 常用来分离人外周血单个
细胞分离纯化技术
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞 实验方法原理 常用来分离人外周血单个
脾脏单个核细胞悬液如何制备
(1)大鼠断颈处死后，无菌取脾置于消毒平皿中称重;(2)超净工作台上置10cm直径无菌平皿，加入5～10ml D-hanks平衡液 ，置一80目的不锈钢筛于平皿中，脾脏置于筛网中，用剪刀剪碎脾，用5ml玻璃注射器针芯轻轻捻磨脾脏，使分散的细胞滤过金属网进入平皿的液体中， D-hanks冲洗一次；(3
超速离心分离技术密度梯度离心法介绍
密度梯度离心法 密度梯度区带离心法是将样品加在惰性梯度介质中进行离心沉降或沉降平衡，在一定的离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上，形成不同区带的分离方法。此方法主要依据颗粒与介质间的密度差（ρ－ρ０）不同进行分离的。适用于那些沉降系数相差不大而密度值却有明显差别的颗粒，也就是那些Ｓ值相近而ρ值相
从全血里纯化单个核细胞（人、大鼠和小鼠）
所需仪器：XL03RH型控温离心机（低速冷冻离心机，可使用24*15ml离心管，水平转子）；抽血注射器（大小与抽血体积相一致）试剂：Optiprep；Tricine-缓冲盐溶液（TBS,仅小鼠血）0.85%（质量浓度）NaCl，10mmol/L Tricine-NaOH（ph = 7.4）。 方法：
台式大容量离心机分离细胞的梯度介质和梯度类型
台式大容量离心机分离细胞的梯度介质受很多条件的制约，理想的梯度介质应满足以下条件：1、对细胞无毒。2、能形成具有足够密度的等渗介质。3、不渗入细胞。4、分级分离后容易从细胞中除去。5、形成梯度的粘度低。目前，用来分离细胞的梯度介质主要有Percoll、Nycodenz、Metrizamide、Fic
台式大容量离心机分离细胞的梯度介质和梯度类型
台式大容量离心机分离细胞的梯度介质受很多条件的制约，理想的梯度介质应满足以下条件： 1、对细胞无毒。 2、能形成具有足够密度的等渗介质。 3、不渗入细胞。 4、分级分离后容易从细胞中除去。 5、形成梯度的粘度低。 目前，用来分离细胞的梯度介质主要有Percoll、Nycode
骨髓外周血有核细胞定量的测定
【参考值】 正常人骨髓有核细胞测定值： 骨髓有核细胞总数：18.0～21.0×109/kg 骨髓有核红细胞数：3.4～4.1×109/kg 骨髓有核粒细胞数：9.0～13×109/kg 骨髓巨核细胞数：0.006～0.016×109/kg 正常人外周血粒细胞数及半衰期更新率： 外周血
脐血脐带中干细胞分离实验
非限制性体干细胞（unrestricted somatic stem cells，USSCs)的分离 脐血来源胚胎样干细胞（cord blood-derived embryonic-like stem cells，CBEs)的分离 脐血来源多能前体细胞（cor
脐带间充质干细胞原代分离
实验概要本实验方法介绍了脐带间充质干细胞原代分离的操作步骤。主要试剂所用试剂盒：猪脐带间充质干细胞分离和培养试剂盒 货号：PUMS-000-001人脐带间充质干细胞分离和培养试剂盒 货号：HUMS-000-001规格：5次
脐血脐带中干细胞分离实验
非限制性体干细胞（unrestricted somatic stem cells，USSCs)的分离脐血来源胚胎样干细胞（cord blood-derived embryonic-like stem cells，CBEs)的分离脐血来源多能前体细胞（cord blood-derived multip
脐血脐带中干细胞分离实验
实验方法原理 实验材料 脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒 灭菌起始培养基扩增培养基0.05%的胰蛋白酶含EDTAPBSA仪器、耗材 T25培养瓶实验步骤 (a)制备和分离脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)。(b)如果使用冻存的CB-MNCs,复苏的细胞可以用于培养，不需要其他分
原代细胞培养经典案例和细胞药筛介绍（一）
威斯腾生物经过10多年的发展，获得了上百种细胞株和四十余钟原代细胞培养经验，并建立了庞大的细胞库及原代培养资料库；细胞平台有资深实验员、规范的SOP操作文件，万级净化细胞房，这些条件为保质保量完成每个客户的实验提供了保障。 同时，威斯腾生物结合多年原代及传代细胞培养经验，结合平台已有的技术优势，建立
对外周血中人自然杀伤（NK）细胞群的表型表征分析
概述：制定 10 色免疫表型 Panel，以鉴定人自然杀伤细胞（NK）。用于量化 NK 细胞群子集的设门策略。介绍：NK 细胞属于固有免疫系统的一部分，并与肿瘤监测和病毒感染细胞的杀伤相关。最近，有研究表明，NK 细胞在自身免疫病方面也发挥着作用，其方式为调节适应性免疫反应，即 T 细胞，或
人外周血B、T淋巴细胞的分离方法
目前常用Ficoll密度梯度离心法直接分离和纯化外周血单个核细胞。方法: 1. 在短中管中加入适量淋巴细胞分离液。 2. 取肝素抗凝静脉血与等量Hank's液或RPMI1640充分混匀，用滴管沿管壁缓慢叠加于分层液面上，注意保持清楚的界面。水平离心2000rpm×20分钟。 3. 离心
CIK/DCCIK及其在细胞治疗上的应用（二）
【细胞制备】 1．外周血单个核细胞的采集 1.1 用血细胞分离机采集患者自身的外周血单个核细胞50-100mL； 1.2 淋巴细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化单个核细胞(PBMC)； 1.3 无血清培养液洗涤2次，获得纯度在90%以上的PBMC。 2．CIK细胞的培养及鉴定 2.1 将PBMC按1
血细胞的分离方法1
血细胞由红细胞,白细胞,血小板等组成.实验中常用白细胞来做研究,如炎症渗出,细胞迁移,识别等都涉及到白细胞.白细胞又分为:粒细胞,淋巴细胞,单核细胞等.它们具有不同的功能.实验中常需要分离血细胞方能进行。这里主要论述人外周白细胞的分离，主要是中性粒细胞（Neutrophil），淋巴细胞（Lympho
PNAS突破：单个细胞核转录组测序
研究人员成功地从单个脑细胞细胞核中分离出全部的信使RNA并对其进行了测序。这项发表在《美国科学院院刊》(PNAS)上的新研究，将帮助研究人员更好地了解一些器官在健康和疾病状态下的功能机制，为开发出个体化治疗提供了又一块跳板。 动物和植物中的大多数细胞都包含有一个细胞核，里面储存着细胞的DN