病毒透射电镜病毒标本制备实验——负染色技术
实验方法原理病毒研究中用磷钨酸染色后发现在黑色背景中病毒粒子如同一个亮晶晶的「空洞」。尔后用磷钨酸对飞噬菌体染色也见到同样的现象，即将这种现象称为「负染色」。负染色是一种反衬染色，即高密度物质如重金属磷钨酸、醋酸铀等在透射电镜下形成黑色的背景反衬低密度的标本如病毒为白色透亮，从而清楚地显示出被衬物的细节结构。实验材料病毒试剂、试剂盒负染色液仪器、耗材透射电镜实验步骤负染色法主要有两种：(1) 悬滴法：用一根细滴管或结核菌素注射器吸一滴标本悬液滴在有膜的铜网上，如带膜铜网已从滤纸上取下，则此铜网很可能被吸到加标本的吸管头上或注射器针头上，铜网上也可能被翻转而污染，故采用悬滴法时，应将带膜铜网粘附于滤纸上，切不可取下。铜网滴上标本后静置片刻，然后用滤纸从铜网边上吸去多余的标本悬液，未待标本干燥即滴上负染色液。染色 1~2 min, 用滤纸吸去多余染液，再用蒸馏水滴在铜网上洗 1~2次，再用滤纸吸去水分，待干后用电镜观察。(2) 漂浮......阅读全文
羊水细胞染色体标本的制备
一、原理 人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养，但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞，依据其外形和生长特征可区分为以下三类：上皮细胞（E）、成纤维细胞（F）和羊水细胞（AF）。E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长，所以在培养过程中的生长期最短。AF细
羊水细胞染色体标本的制备
一、原理人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养，但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞，依据其外形和生长特征可区分为以下三类：上皮细胞（E）、成纤维细胞（F）和羊水细胞（AF）。E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长，所以在培养过程中的生长期最短。AF细胞在再培
新型冠状病毒肺炎病例标本采集与实验室检测技术指南
为指导各级疾控部门和其他相关机构开展新型冠状病毒肺炎病例标本采集与实验室检测工作，特制定本技术指南。 一、标本采集（一）采集对象。新型冠状病毒肺炎疑似病例和聚集性病例，需要进行新型冠状病毒感染诊断或鉴别诊断者，或其他需要进一步筛查检测的环境或生物材料。（二）标本采集要求。1.从事新型冠状病毒检测标本
电镜样品科普贴：常见样品制备技术
电镜样品制备技术较复杂，种类也较多，分为普通样品制备技术和特殊样品制备技术。这里简单介绍几种常用的样品制备技术。 1、超薄切片技术 超薄切片技术（ultramicrotomy）是透射电镜样品制备方法中最基本的一种。由于电子束穿透能力的限制透射电镜观察的样品必须很薄，普通光镜切片厚度约3～5µ
非标记抗体免疫电镜实验技术
实验概要本文介绍了非标记抗体免疫电镜实验技术的具体操作方法。实验原理标记抗体法虽然具有许多优点，但也存在一些难以克服的问题，如标记抗体的分子增大，对细胞膜和组织的穿透力减弱；化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响；结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合，影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的
非标记抗体免疫电镜实验技术
实验概要本文介绍了非标记抗体免疫电镜实验技术的具体操作方法。实验原理标记抗体法虽然具有许多优点，但也存在一些难以克服的问题，如标记抗体的分子增大，对细胞膜和组织的穿透力减弱；化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响；结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合，影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的
病毒包装技术8——病毒包装实验经验总结介绍
锐赛小课堂常识篇0703-115 病毒包装实验经验总结 第一，细胞状态、载体系统、目的基因对病毒包装影响(基因大小、序列情况、蛋白功能毒性等）是三个主要影响病毒质量的因素。 第二，细胞状态需要有丰富的细胞培养经验来判断，比如包装或转染感染前一定要重视细胞干净细微污染与否、饱满立
实验动物组织标本的制备实验
实验材料 家兔豚鼠白鼠试剂、试剂盒 营养液仪器、耗材 注射器线浴槽实验步骤 通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物，禁食24 小时。击头致昏，以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔，取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧（或95%O2+5%CO2
病毒免疫荧光实验_荧光抗体的制备
实验材料荧光色素试剂、试剂盒抗体实验步骤荧光色素的选择 可以产生明亮荧光的染料物质，称荧光色素 (fluorochrome) 。目前常用的荧光色素有以下几种：(1) 异硫氰酸荧光素 (Fluorescein isothiocyanate, FITC): 在碱性条件下， FITC 的异硫氰酸基在水溶液
病毒包装技术——病毒与非病毒载体
基于转化医学的研究理念，锐赛知道，每一项临床疾病的致病源头或表象最初都是由个体体内某个基因的突变导致了。所以每一项临床疾病的研究，整体课题项目开展的最初源头也必须从一个基因开始。锐赛在多年的转化医学研究中，在于各个临床医师的整体项目合作中，探讨得出的不仅是转化医学临床研究课题的整体思路，一般实验方向
负链RNA病毒复制的主要步骤
有些ssRNA病毒，它们的遗传物质为正链RNA，可以行使mRNA的功能。一旦病毒颗粒中的RNA进入寄主细胞，就直接作为mRNA，翻译出所编码的蛋白质，其中包括衣壳蛋白和病毒的RNA聚合酶。然后在病毒RdRp（RNA指导的RNA聚合酶，即RNA复制酶）的作用下复制病毒RNA。RdRp同时具有解旋酶的功
动物染色体标本的制备与观察
实验原理凡细胞处于活跃增殖状态，或者经过各种处理后，细胞就可进入分裂的任何动物组织，均可用于染色体分析。在正常动物体内，骨髓是处于不断分裂的组织之一。给动物注射一定剂量的秋水仙碱即可使许多处于分裂的细胞停滞于中期，然后采用常规空气干燥法制备染色体，即可得到大量可分析的染色体标本。本方法简便、可靠，不
骨髓细胞染色体标本的制备
一、原理骨髓染色体标本制备通常用于白血病患者，特别是慢性或急性粒细胞性白血病，因为骨髓反映粒系统细胞增生情况，这些病人不宜用外周血。即使是淋巴细胞性白血病，也不主张用外周血，因为加PHA刺激外周血培养，只能获得正常淋巴细胞分裂相，并不能反映那些病理淋巴细胞的染色体改变。骨髓细胞属不断增殖的细胞，培养
制备细菌染色标本时，应该注意哪些环节
1，接种环需以无菌操作，载玻片要洁净无油迹，滴生理盐水和取菌不宜过多，涂片要涂抹均匀，不宜过厚；2，干燥是室温干燥；3，热固定温度不宜过高，以玻片背面不烫手为宜，否则会改变甚至破坏细胞形态；4，染色时滴加染液覆盖上菌体薄膜即可；5，染色过程中，不可使染液干涸。
制备细菌染色标本时,应注意哪些问题
1.首先挑取一环(接种环)生理盐水于玻片上.2.再挑一点菌落(量要少,看你键盘上小键盘上的"."那么大就够了)3.先在玻片上生理盐水附近磨菌落,把菌落都磨到玻片上,再将生理盐水拉进来,与菌落混合涂匀.****如果直接放到生理盐水里,很可能菌落整块从环上脱落就不容易涂开了.4.涂好后,在酒精灯火焰上来
动物染色体标本的制备与观察
实验概要本实验介绍了动物染色体标本（cell chromosome）制备的原理及操作步骤。实验原理凡细胞处于活跃增殖状态，或者经过各种处理后，细胞就可进入分裂的任何动物组织，均可用于染色体分析。在正常动物体内，骨髓是处于不断分裂的组织之一。给动物注射一定剂量的秋水仙碱即可使许多处于分裂的细胞停滞于中
杆状病毒储液制备实验——从单层培养中制备
实验材料单层培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒（野生型的或重组）试剂、试剂盒含10％胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1
杆状病毒储液制备实验——从悬浮培养中制备
实验材料悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒（野生型的或重组）试剂、试剂盒含10％胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1
洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察实验_压片法
实验方法原理有丝分裂是细胞均等增殖的过程，是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中，细胞内每条染色体都能复制一份，然后分配到子细胞中，因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的，在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。 分生组织→固定→解离→染色→压片→观察（间期、早期、中
基因扩增技术的标本制备
在将Taq DNA聚合酶引入PCR反应，并使之达到自动化之后，PCR反应已变得十分的简单了。但是PCR样品的采集及制备却并非同样简单，而且，许多PCR的失败都归因于标本的制备不当。用于PCR的标本必须经适当处理后才能使用，因为标本中的许多杂质能抑制Taq DNA聚合酶的活性。另外，处理标本可使待扩增
痘苗病毒储液制备
实验材料悬浮培养的 HeLa S3 细胞痘苗病毒试剂、试剂盒完全 MEM-10 和 MEM-2.50.25 mg ml 胰酶仪器、耗材Sorvall H-6000A 转子150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤1. 用血细胞计数器对悬浮培养的 HeLa S3 细胞进行细胞计数。2. 将 5×
痘苗病毒储液制备
基本方案 噬斑分析测定滴度 实验方法原理 实验材料 悬浮培养的 HeLa S3
痘苗病毒储液制备
实验方法原理 实验材料 悬浮培养的 HeLa S3 细胞痘苗病毒试剂、试剂盒 完全 MEM-10 和 MEM-2.50.25 mg ml 胰酶仪器、耗材 Sorvall H-6000A 转子150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤 1. 用血细胞计数器对悬浮培养的 HeLa S3 细胞进行细
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备
实验概要本文介绍了人外周血染色体制备和体外培养细胞染色体标本制备的原理、操作流程及注意事项。实验原理人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下，人外周血小淋巴细胞都处在G1期（或G0期），但在体外给予一定的条件，进行培养，经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种
假包膜型反转录病毒载体的制备实验
实验材料反转录病毒载体质粒试剂、试剂盒293GP 和 NIH3T3 细胞的培养物仪器、耗材超速离心机细胞培养皿聚丙烯管灭菌无热原的注射器式滤器超干净的离心管宽嘴离心瓶超速离心机G S A 转子实验步骤展开
杆状病毒毒种贮液的制备实验
杆状病毒是一类具有囊膜包裹的双链环状DNA病毒，其基因组大小为80~180 kb，在自然界中以节肢动物作为专一性宿主进行感染和传播。实验材料杆状病毒试剂、试剂盒胎牛血清重组病毒仪器、耗材培养箱培养瓶转子实验步骤从单层培养中制备： 1a. 以毎瓶1.8×107 Sf9细胞的密度，将细胞接种于两个15
病毒包装技术1——病毒与非病毒载体介绍
基于转化医学的研究理念，锐赛知道，每一项临床疾病的致病源头或表象最初都是由个体体内某个基因的突变导致了。所以每一项临床疾病的研究，整体课题项目开展的最初源头也必须从一个基因开始。 锐赛在多年的转化医学研究中，在于各个临床医师的整体项目合作中，探讨得出的不仅是转化医学临床研究课题的整体思路，
细菌透射电镜样品制备实验
实验方法原理 由于生物样品主要由碳、氢、氧、氮等元素组成，散射电子的能力很低，在电镜下反差小。所以在进行电镜的生物样品制备时通常还须采用重金属盐染色或金属喷镀等方法来增加样品的反差，提高观察效果。负染色法就是用电子密度高，本身不显示结构且与样品几乎不反应的物质（如磷钨酸钠或磷钨酸钾）来对样品进行「染
核酸透射电镜样品制备实验
核酸样品 实验方法原理 很多球状蛋白均能在水溶液或盐溶液的表面形成不溶的变性薄膜，在适当的条件下这一薄膜可以成为单分子层，由伸展的肽链构成为一个分子网。当核酸
核酸透射电镜样品制备实验
实验方法原理很多球状蛋白均能在水溶液或盐溶液的表面形成不溶的变性薄膜，在适当的条件下这一薄膜可以成为单分子层，由伸展的肽链构成为一个分子网。当核酸分子与该蛋白质单分子膜作用时会由于蛋白质的氨基酸碱性侧链基团的作用，使得核酸从三维空间结构的溶液构型吸附于肽链网而转化为二维空间的构型，并从形态到结构均能