病毒透射电镜病毒标本制备实验——负染色技术
实验方法原理病毒研究中用磷钨酸染色后发现在黑色背景中病毒粒子如同一个亮晶晶的「空洞」。尔后用磷钨酸对飞噬菌体染色也见到同样的现象，即将这种现象称为「负染色」。负染色是一种反衬染色，即高密度物质如重金属磷钨酸、醋酸铀等在透射电镜下形成黑色的背景反衬低密度的标本如病毒为白色透亮，从而清楚地显示出被衬物的细节结构。实验材料病毒试剂、试剂盒负染色液仪器、耗材透射电镜实验步骤负染色法主要有两种：(1) 悬滴法：用一根细滴管或结核菌素注射器吸一滴标本悬液滴在有膜的铜网上，如带膜铜网已从滤纸上取下，则此铜网很可能被吸到加标本的吸管头上或注射器针头上，铜网上也可能被翻转而污染，故采用悬滴法时，应将带膜铜网粘附于滤纸上，切不可取下。铜网滴上标本后静置片刻，然后用滤纸从铜网边上吸去多余的标本悬液，未待标本干燥即滴上负染色液。染色 1~2 min, 用滤纸吸去多余染液，再用蒸馏水滴在铜网上洗 1~2次，再用滤纸吸去水分，待干后用电镜观察。(2) 漂浮......阅读全文
体外培养细胞的染色体标本制备实验
实验材料细胞实验步骤1． 体外培养的细胞，在倒置镜下观察到有较多的分裂细胞（传代后24h，圆形发亮的细胞）时，加入秋水仙素溶液，终浓度为0.3μg/ml培养液； 2． 继续培养3h； 3． 胰酶消化收集细胞至离心管； 4． 离心1000转/min，离心10min，去上清； 5． Hanks液洗，离心
染色体GTG标本制备
一、原理 非显带染色体除可根据形态分辨部分染色体，其他多数染色体难以确认，而显带技术则可使染色体纵向长度上出现不同带纹，以辨认全部染色体。GTG即G带，Trypsin（胰酶），Giemsa的简写。Giemsa染料是噻嗪--曙红染料，染色体的着色有赖于在原位形成噻嗪--曙红（2∶1）的沉淀物。着
染色体CBG标本制备
一、原理 异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的，因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近，或在染色体臂上呈现“团块”，这些染色质主要由C显带技术呈现，故称为C带。CBG即C带、Ba(OH)2、Giemsa的简写。C带的根本特征是选择性地从染色体臂抽取DNA，但在C带区有很强抗性，仍保留大
病毒－DNA－的提取实验——拭子标本中病毒－DNA－的提取
实验材料拭子标本试剂、试剂盒TE 缓冲液裂解液蛋白酶K仪器、耗材离心机棉签实验步骤预操作：将采有口腔、鼻腔或生殖道等处分泌物标本的棉签置于 2 ml 生理盐水中，洗下标本。若标本在 4 h 内处理，可置于室温保存，否则需 4℃保存。1. 将生理盐水中的标本以 2 000 r/min 离心 5 min
细菌透射电镜样品制备实验滴液法＋负染法
实验方法原理由于生物样品主要由碳、氢、氧、氮等元素组成，散射电子的能力很低，在电镜下反差小。所以在进行电镜的生物样品制备时通常还须采用重金属盐染色或金属喷镀等方法来增加样品的反差，提高观察效果。负染色法就是用电子密度高，本身不显示结构且与样品几乎不反应的物质（如磷钨酸钠或磷钨酸钾）来对样品进行「染色
细菌透射电镜样品制备实验——滴液法＋负染法
透射电镜样品的制备方法很多。其中滴液法，或在滴液法基础上发展出来的其他类似方法如直接贴印法、喷雾法等主要被用于观察病毒粒子细菌的形态及生物大分子等。由于生物样品散射电子的能力很低，所以通常还须采用重金属盐染色或金属喷镀等方法来增加样品的反差，提高观察效果。负染色法由于操作简单，目前在进行透射电镜生物
MVA－病毒储液制备实验——免疫染色法滴度测定
实验方法原理MVA 病毒滴度通常是用免疫染色法进行测定，因为 MVA 不能在 CEF 或 BHK-21 细胞中形成噬斑。实验材料CEF 或 BHK-21 细胞MVA病毒储液试剂、试剂盒MEM-10 和 MEM-2.5 完全培养基1:1 丙酮／甲醇PBS（含和不含3% FBS两种）PBS／H2O2兔抗
绒毛标本分裂中期染色体涂片制备实验
实验材料 绒毛样本试剂、试剂盒 HBSS胰酶 EDTA HBSS 溶液胶原蛋白酶溶液完全培养基秋水仙胺 枸橼酸钠甲醛 冰乙酸仪器、耗材 无菌 Watchmaker 精细镊冷试管摇床试管混合器Sorvall GLC-2B 离心设备HL-4转子和6个 15ml 离心管塑料培养皿倒置显微镜或解剖显微镜热气
绒毛标本分裂中期染色体涂片制备实验
实验材料绒毛样本试剂、试剂盒HBSS胰酶 EDTA HBSS 溶液胶原蛋白酶溶液完全培养基秋水仙胺枸橼酸钠甲醛 冰乙酸仪器、耗材无菌 Watchmaker 精细镊冷试管摇床试管混合器Sorvall GLC-2B 离心设备HL-4转子和6个 15ml 离心管塑料培养皿倒置显微镜或解剖显微镜热气增湿器空
杆状病毒储液制备实验
基本方案 从悬浮培养中制备 基本方案 从单层培养中制备 噬斑试验测定滴度 实验方法原理 实验材料
杆状病毒储液制备实验
实验方法原理 实验材料 悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒（野生型的或重组）试剂、试剂盒 含10％胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材 150 mm 培养瓶 27℃ 培养箱 倒置显微镜 带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机 带螺口盖的冻存管 液氮罐 500 ml 旋转细
反转录病毒载体的制备实验
实验材料二个反转录病毒包装细胞株反转录病毒载体包含选择性标记试剂、试剂盒PBS细胞染色液组织培养皿仪器、耗材完全的 Dulbecco 改良 Eagle 培养基低蛋白质结合的纤维素乙酸盐注射器式滤器克隆形成环实验步骤展开
胸腹水染色体标本制备
某些肿瘤细胞可脱落入胸腹水中，并继续生长、增值。因此，由胸腹水细胞可制备较好的染色体标本。胸腹水细胞染色体分析对恶性肿瘤具有辅助诊断的价值。如分裂相多，异倍性，有结构畸变，常支持阳性诊断。二、用品和试剂同外周血染色体制备。三、操作步骤1. 新鲜胸腹水20-40毫升，以1000rpm离心10分钟。弃去
动物染色体标本的制备
秋水仙素阻断细胞分裂法 实验材料 蟾蜍 试剂、试剂盒 秋水仙素 生理盐水 甲醇 冰醋
水稻根尖染色体标本制备
实验概要 水稻根尖染色体标本制备实验步骤1.取材： 选取水稻种子，充分浸种后，将它们摆在铺有滤纸的培养皿内，在约28℃条件下发芽培养，当胚根长至1～1.5cm时，剪下备用。2.预处理 压片法：采用0.1％秋水仙素处理2h左右 去壁低渗法可采用以下四种方法处理
水稻根尖染色体标本制备
1.取材： 选取水稻种子，充分浸种后，将它们摆在铺有滤纸的培养皿内，在约28℃条件下发芽培养，当胚根长至1～1.5cm时，剪下备用。2.预处理 压片法：采用0.1％秋水仙素处理2h左右去壁低渗法可采用以下四种方法处理处理方法 0.002mol/L8-羟基喹啉 α－溴萘饱和溶液 低温（－4℃） 卡诺氏
染色体提前凝集标本制备
实验方法原理 七十年代初，由于发现M期细胞内有某种促进染色体凝集因子，它无种属特异性，所以在细胞融合和染色体技术的基础上，建立了制备染色体提前凝集标本的方法。即让M期细胞与间期（I期）细胞融合，从而诱导I期细胞染色质提前浓缩成染色体。形成的这种染色体称提前凝集的染色体(PrematurelyCond
动物染色体标本的制备
秋水仙素阻断细胞分裂法 实验材料 蟾蜍 试剂、试剂盒 秋水仙素 生理盐水 甲醇 冰醋
动物染色体标本的制备
一、实验目的1. 了解染色体标本制备的基本原理2. 掌握滴片法制备染色体标本的一般步骤二、实验原理每一物种的细胞一般都具有一定数目、形状和大小的染色体，在秋水仙素的作用下可使分裂细胞阻断在中期，此时染色体形态最典型，然后通过低渗、固定、染色等步骤，便可在显微镜下呈现出其形态。三、实验用品器具：显微镜
胸腹水染色体标本制备
一、原理 某些肿瘤细胞可脱落入胸腹水中，并继续生长、增值。因此，由胸腹水细胞可制备较好的染色体标本。胸腹水细胞染色体分析对恶性肿瘤具有辅助诊断的价值。如分裂相多，异倍性，有结构畸变，常支持阳性诊断。二、用品和试剂 同外周血染色体制备。三、操作步骤 l．新鲜胸腹水20—40毫升，以1
病毒包装技术——病毒包装实验经验总结
第一，细胞状态、载体系统、目的基因对病毒包装影响(基因大小、序列情况、蛋白功能毒性等）是三个主要影响病毒质量的因素。第二，细胞状态需要有丰富的细胞培养经验来判断，比如包装或转染感染前一定要重视细胞干净细微污染与否、饱满立体感是否好、铺板均匀细胞密度适中否等性状。另外转染时细胞的密度要十分注意，一般在
病毒免疫荧光实验_荧光抗体染色
实验材料细胞小玻片标本试剂、试剂盒荧光抗体实验步骤荧光抗体染色按不同反应机制，可有以下几种：1.直接法 用已知特异性病毒抗体与荧光素结合，制成荧光特异性抗体，直接与细胞或组织中相应病毒抗原结合，在荧光显微镜下即可见病毒或病毒抗原存在部位呈现特异性荧光。此法特异简便，但一种荧光抗体只能检查一种抗原，特
正常细胞常规核型的标本制备_肿瘤细胞染色体标本制备
实验方法原理利用肿瘤细胞无限繁殖的特点，掌握其体外生长动态，取处于对数生长期的细胞便可获得丰富的分裂相。肿瘤细胞染色体异常包括两个方面：1. 结构异常 即在肿瘤细胞常出现的染色体畸变，包括双着丝点染色体、环状染色体、断裂的染色体、染色体裂隙及微小体等。2. 数目异常 由于肿瘤细胞分裂失去应有
诺瓦克病毒实验室检测的标本类型
⑴粪便 诺如病毒检测首选粪便标本。每份标本5g或5ml以上，直接放置于清洁、无菌、干燥的密闭容器内。容器内不可加入任何保护剂、培养基、去污剂或金属离子，不可稀释。 ⑵肛拭子 肛拭子标本不能长期保存，且检出率低于粪便标本。肛拭子含粪便量很低时，如检测结果呈弱阳性，结果容易被误判，导致假阴性。
去壁低渗法制备植物染色体标本实验
一、实验目的： 1、掌屋植物染色体标本的去壁低渗方法 2、了解中期染色体的形态结构 二、实验原理： 植物细胞有很坚实的细胞壁，染色体很难像动物染色体那样平整地贴在载玻片上，可通过纤维素酶和果胶酶处理去掉细胞壁；用低渗溶液处理可以提高染色体的分散程度。陈瑞阳等（1979，19
洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察实验
实验方法原理 有丝分裂是细胞均等增殖的过程，是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中，细胞内每条染色体都能复制一份，然后分配到子细胞中，因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的，在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。分生组织→固定→解离→染色→压片→观察（间期、早期、中
去壁低渗法制备植物染色体标本实验
实验材料黑麦(Secalecereale)、大麦(Hordeumvulgare)种子或洋葱(Alliumcepa)鳞茎试剂、试剂盒对二氯苯饱和溶液甲醇冰醋酸70%酒精纤维素酶果胶酶Giemsa原液磷酸缓冲液(pH6.8～7.2)KCl仪器、耗材恒温培养箱显微镜载玻片酒精灯实验步骤1.取材:先将种子浸
应用细胞融合技术制备染色体提前凝集标本
一、原理 两个或两个以上的同种或不同种细胞可以在诱导物的作用下融合成一个细胞。 七十年代初，由于发现M期细胞内有某种促进染色体凝集因子，它无种属特异性，所以在细胞融合和染色体技术的基础上，建立了制备染色体提前凝集标本的方法。即让M期细胞与间期（I期）细胞融合，从而诱导I期细胞染色质提前
应用细胞融合技术制备染色体提前凝集标本
实验概要通过细胞融合技术，初步了解染色体提前凝集标本制备原理、方法及间期细胞三种时相的提前凝集染色体特点。实验原理在自然条件下或用人工的方法(物理、化学或生物)将两个或两个以上的同种或不同种细胞融合成一个细胞的过程称为细胞融合。七十年代初，由于发现M 期细胞内有某种促进染色体凝集因子，它无种属特异
正常细胞常规核型标本制备_人淋巴细胞染色体标本制备
实验方法原理在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素，破坏细胞纺锤体的形成，使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞，低渗处理，使细胞胀大，染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋白质，使染色体清晰且分散良好。再结合离心技术去掉红细胞碎片，然后采用空气干燥法制片获得中期染色体标本。实验材料HeLa细胞