动物细胞与胚胎工程实验常用培养液配制与检测实验
动物细胞与胚胎工程实验常用培养液配制与检测,可用于(1)动物细胞的培养(2)胚胎工程的发展(3)分子生物学的研究。溶液配制法实验方法原理动物细胞工程的主要操作对象是离体条件下动物有机体的各部分组织、器官或细胞,这些用来进行离体培养的组织或器官称为外植体;动物胚胎工程的主要操作对象是配子和胚胎。要满足操作对象在离体条件下正常生存和生长发育,就必须为其提供适宜生长发育的良好营养条件,即培养液条件。动物的组织、细胞或配子、胚胎在营养代谢、生长发育等多方面相比较,存在着诸多差异,营养需求也不尽相同。所以在进行动物组织、细胞及配子、胚胎的离体操作或培养时,需要配制不同的操作液或培养液。因此,了解培养液的组成与掌握其配制方法是细胞与胚胎工程研究与实验的一项基本任务。由于动物细胞与胚胎工程操作对象的特点,常用操作液及培养液一般配制为液体状态。操作液及培养液中一些成分在溶液中不稳定,配制时一般先将液体的最基本成分配成基础液,使用前将这些成分作为......阅读全文
动物细胞与胚胎工程实验常用培养液配制与检测实验
动物细胞与胚胎工程实验常用培养液配制与检测,可用于(1)动物细胞的培养(2)胚胎工程的发展(3)分子生物学的研究。溶液配制法实验方法原理动物细胞工程的主要操作对象是离体条件下动物有机体的各部分组织、器官或细胞,这些用来进行离体培养的组织或器官称为外植体;动物胚胎工程的主要操作对象是配子和胚胎。要满足
动物细胞与胚胎工程实验常用培养液配制与检测
实验方法原理 动物细胞工程的主要操作对象是离体条件下动物有机体的各部分组织、器官或细胞,这些用来进行离体培养的组织或器官称为外植体;动物胚胎工程的主要操作对象是配子和胚胎。要满足操作对象在离体条件下正常生存和生长发育,就必须为其提供适宜生长发育的良好营养条件,即培养液条件。动物的组织、细胞或配子、胚
细胞培养常用设备及实验技巧(四)配制与消毒
器材与试剂: 干粉型培养基、胰蛋白酶、青霉素、链霉素、纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。具体步骤: 一. 水的制备:细胞培养用水**非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水 。二.PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):1
合成培养基配制实验——合成培养液的配制
合成培养基是根据研究和了解细胞所需成分基础上配制而成的。目的在于创制出与体内相似的生存环境。合成培养基有固定的组成成分,利于控制实验条件标准化。内容来源:组织培养和分子细胞学技术。(北京出版社)实验方法原理干粉型培养基是用球磨机或喷雾法将各种培养液成分混合后制成,具有性质稳定、便于贮存和运输、使用方
细胞培养液的配制与消毒
器材与试剂:干粉型培养基、胰蛋白酶,青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。具体步骤:一. 水的制备:细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水二.PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):1.溶
实验室溶液配制方法与技巧
液体溶液配制可以说是实验室分析人员最基础的一门技术,也是每天工作中的必选项。液体溶液的配置包括溶质的计算、移液、定容等基础操作,还包括一些混合溶液的前后加入顺序及利用一些试剂自身的化学性质,掌握了溶液配制的技巧,可以大大缩短配置时间,提高实验效率。 我们都知道,溶液是由至少
组织培养常用液的配制实验—pH调整液的配制实验
pH调整液的配制实验试剂、试剂盒NaHCO3HEPES实验步骤一、NaHCO3液1. 常用的浓度有7.4%、5.6%、3.7%三种,配制时,用三蒸馏水溶解后,过滤除菌,分装小瓶,盖紧瓶塞,4 ℃冰箱或室温下保存。2. 或用10 磅10 分钟高压蒸气灭菌亦可;可能有部分NaHCO3被破坏,但操作简
实验室常用的VOCs前处理与检测技术
除样品采集外,VOCs的检测技术的重点还在于样品的前处理和检测技术。而检测技术的日新月益对VOCs的检测、监控、减排有很大的促进作用。本次为您介绍实验室常用的VOCs检测技术。 样品预处理 VOCs的样品预处理方式: 溶剂解析法、低温预浓缩-热解吸法、固相微萃取法等。 1.1溶剂解吸法
组织培养常用液的配制实验
胰蛋白酶溶液的配制法 pH调整液的配制实验 实验方法原理 胰蛋白酶主要采自牛或猪的胰脏,是一种黄白色粉末,易潮解,应放置冷暗干燥处保存。主要作用是使
组织培养常用液的配制实验
实验方法原理 胰蛋白酶主要采自牛或猪的胰脏,是一种黄白色粉末,易潮解,应放置冷暗干燥处保存。主要作用是使细胞间的蛋白质水解,使细胞相互离散。胰蛋白酶的活力是用解离酪蛋白的能力表示的。实验材料 胰蛋白酶试剂、试剂盒 D-HanksDulbeccoNaHCO3仪器、耗材 滤纸玻璃棒实验步骤 1. 将D
常用染料和试剂的配制与使用
1. 碘-硫酸法 植物细胞细胞壁的主要成分是纤维素,纤维素被硫酸水解后,遇碘呈蓝色反应。因此用碘-硫酸法可鉴定细胞壁的成分。 试剂配制方法: 1% 碘液 将1.5 克碘化钾溶于100 毫升的蒸馏水中,待完全溶解后,加入1 克碘,震荡溶解。 66.5% 硫酸 7 份
常用染料和试剂的配制与使用
1. 碘-硫酸法植物细胞细胞壁的主要成分是纤维素,纤维素被硫酸水解后,遇碘呈蓝色反应。因此用碘-硫酸法可鉴定细胞壁的成分。试剂配制方法:1% 碘液 将1.5 克碘化钾溶于100 毫升的蒸馏水中,待完全溶解后,加入1 克碘,震荡溶解。66.5% 硫酸 7 份浓硫酸加入3 份蒸馏水配制而成。配制时要将浓
实验室检验检测设备生物化学实验常用试剂的配制方法
1、0.5mol/L氢氧化钠溶液 □组份浓度 0.5mol/L □配制量 2L □配置方法 1.准确称取氢氧化钠40g。 2.用去离子水溶解并稀释至2L。2、0.5mol/L盐酸溶液 □组份浓度 0.5mol/L □配制量 2L □配置方法 1.准确量取盐酸83.4mL。 2.用去离子水稀释至2L。
实验常用试剂的制备与储藏(三)
二.电泳缓冲液、染料和凝胶加样液 电泳缓冲液 50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液 5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液 染料 1%溴酚蓝(bromophenol blue) 加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。 1%二甲苯青FF(xylene
实验常用试剂的制备与储藏(二)
100×Denhardt试剂(Denhardt's regent) 依照上表称取各组分,溶于水中定容。过滤除菌及杂质,分装成小份于-20℃贮存。 10×标准DNA连接酶缓冲液(standard DNA ligase buffer)(粘端、平端连接) 将配制好的缓冲
实验常用试剂的制备与储藏(一)
一.常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺(amm
实验常用试剂的制备与储藏(四)
三.常用培养基 LB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中: 如果需要用1N NaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。 SOB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中: 用水补足体积到1L。分成100
MTT法实验原理与MTT-溶液的配制方法
通常,此法中的mtt浓度为5mg/ml。因此,可以称取mtt0.5克,溶于100ml的磷酸缓冲液(pbs)或无酚红的培养基中,用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌,放4℃避光保存即可。在配制和保存的过程中,容器最好用铝箔纸包住。需要注意的是,mtt法只能用来检测细胞相对数和相对活力,但不能测定细
MTT法实验原理与MTT溶液的配制方法
通常,此法中的mtt浓度为5mg/ml。因此,可以称取mtt0.5克,溶于100ml的磷酸缓冲液(pbs)或无酚红的培养基中,用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌,放4℃避光保存即可。在配制和保存的过程中,容器最好用铝箔纸包住。需要注意的是,mtt法只能用来检测细胞相对数和相对活力,但不能测定细
MTT法实验原理与MTT溶液的配制方法
通常,此法中的mtt浓度为5mg/ml。因此,可以称取mtt0.5克,溶于100ml的磷酸缓冲液(pbs)或无酚红的培养基中,用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌,放4℃避光保存即可。在配制和保存的过程中,容器最好用铝箔纸包住。需要注意的是,mtt法只能用来检测细胞相对数和相对活力,但不能测定细
实验室试剂管理与溶液配制管理规定
1)化学药品贮存 1.1 较大量的化学药品放置于药品贮存室中,分类放置。 1.2 贮存室避免阳光直接照射,以免因温度过高使试剂变质。 1.3 贮存室应干燥通风,避免烟火。 2) 试剂溶液贮存 2.1 所有试剂、溶液以及样品的包装瓶上都必须有标签,标签要完整、清晰、绝对不允许容器内装入与
MTT法实验原理与MTT-溶液的配制方法
原理:活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物甲臜,并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种功能。DMSO能溶解沉积在细胞中蓝紫色结晶物,溶液颜色深浅与所含的formazan量成正比。再用酶标仪测定OD值。
实验室常用贮存液的配制参数
1.30%丙烯酰胺溶液 【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温。 【注意】丙烯酰胺具有很强的神
实验室常用贮存液的配制一
1.30%丙烯酰胺溶液『配制方法』将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中. 加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml.用0.45μm孔径滤器过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温.→〖注意〗丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤
实验室常用贮存液的配制二
18.1mol/L MgCl2溶液『配制方法』在800ml水中溶解203.4g MgCl2•6H2O,用水定容至1L,分装成小份并高压灭菌备用. →〖注意〗MgCl2极易潮解,应选购小瓶(如100g)试剂,启用新瓶后勿长期存放.19.β-巯基乙醇(BME)溶液『配制方法』一般得到的是14.4mol/
实验室常用贮存液的配制二
18.1mol/L MgCl2溶液 『配制方法』在800ml水中溶解203.4g MgCl2•6H2O,用水定容至1L,分装成小份并高压灭菌备用. →〖注意〗MgCl2极易潮解,应选购小瓶(如100g)试剂,启用新瓶后勿长期存放. 19.β-巯基乙醇(BME)溶液
动物细胞工程常用技术手段
动物细胞工程常用技术手段:动物细胞培养、动物细胞融合、胚胎移植、单克隆抗体、核移植等。其中,动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
实验室常用的提纯与分离方法
提纯是指将混合物净化除去其杂质,得到混合物中的主体物质,提纯后的杂质不必考虑其化学成分和物理状态。混合物的分离方法有许多种,但根据其分离本质可分为两大类: 1、化学分离法 2、物理分离法 下面就混合物化学分离及提纯方法归纳如下:分离与提纯的原则 1.引入的试剂一般只跟杂质反应;
实验常用试剂的几种制备与储藏方法
一.常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺(Spermidine):溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸
人胚胎干细胞系:衍生与培养实验
细 胞 培 养 基 成 分 小 鼠 胚 胎 饲 养 细 胞(MEF) 的 制 备 人 胚 胎 干 细 胞 系 的 建 立 h E S 细 胞 的 手 工 传 代 采 用 玻 璃 化 方 法 冻 存 h E S 细胞 通 过 焚 光