利用双杂交差异互作筛选以分离功能突变体实验
大多数生物学过程是以蛋白质间相互作用的方式进行的，并且已经发展出许多生化分析方法来探查这些相互作用。双杂交系统是一种以酵母为基础的遗传学分析技术，它提供了一种简便而灵敏的方法用于检测两个蛋白质间潜在的相互作用。它是建立在真核生物某些转录激活因子是调节子的基础上。实验材料酵母菌株Y187Y190质粒pDAbl89pDAb1PAIP70PJT20试剂、试剂盒AIP1 PCR 产物仪器、耗材YPDSC-trp 平板无菌绒布实验步骤展开......阅读全文
利用双杂交差异互作筛选以分离功能突变体实验
大多数生物学过程是以蛋白质间相互作用的方式进行的，并且已经发展出许多生化分析方法来探查这些相互作用。双杂交系统是一种以酵母为基础的遗传学分析技术，它提供了一种简便而灵敏的方法用于检测两个蛋白质间潜在的相互作用。它是建立在真核生物某些转录激活因子是调节子的基础上。实验材料酵母菌株Y187Y190质粒p
基因的分离独立分配和互作实验
实验方法原理：孟德尔定律包括“分离定律”及“独立分配定律”。根据分离规律，位于一对同源染色体上的一对等位基因在减数分裂形成配子时，要彼此发生分离，互不干扰地分到不同的配子中去。因此对于一对基因的杂合体，在完全显性条件下，其自交子代和测交子代的表现型分离比例分别为3:1和1:1。独立分配规律（自由组合
基因的分离独立分配和互作实验
实验方法原理孟德尔定律包括“分离定律”及“独立分配定律”。根据分离规律，位于一对同源染色体上的一对等位基因在减数分裂形成配子时，要彼此发生分离，互不干扰地分到不同的配子中去。因此对于一对基因的杂合体，在完全显性条件下，其自交子代和测交子代的表现型分离比例分别为3:1和1:1。独立分配规律（自由组合规
利用双杂交系统相互作用阱／筛选特定蛋白肽适配体实验
实验材料DNA酵母株试剂、试剂盒PCR 引物聚乙二醇甘油存储液Tris·ClX-gal 平板完全极限（CM） 缺失成分培养基和平板仪器、耗材30℃ 和 42℃ 培养箱或水浴实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 使用标准的亚克隆技术，将编码诱饵蛋白的 DNA 插入 PEG20
玉米转录因子ZmMADS47和籽粒转录因子Opaque2互作可协同调...
玉米转录因子ZmMADS47和籽粒转录因子Opaque2互作可协同调控醇溶蛋白的表达玉米（Zea mays）原产于墨西哥和中美洲地区，是一种由古印第安人（Indians）在数千年前利用野生墨西哥类蜀黍（Euchlaenamexicana）（现存在于墨西哥和尼加拉瓜）杂交而来的品种。但是，作为一类
玉米转录因子ZmMADS47和籽粒转录因子Opaque2－调控醇溶蛋白
玉米（Zea mays）原产于墨西哥和中美洲地区，是一种由古印第安人（Indians）在数千年前利用野生墨西哥类蜀黍（Euchlaenamexicana）（现存在于墨西哥和尼加拉瓜）杂交而来的品种。但是，作为一类重要的粮食作物，天然玉米籽粒在其营养价值上却有着重要的缺陷。根据已有
玉米转录因子和籽粒重要转录因子互作协同调控醇溶蛋白
玉米（Zea mays）原产于墨西哥和中美洲地区，是一种由古印第安人（Indians）在数千年前利用野生墨西哥类蜀黍（Euchlaenamexicana）（现存在于墨西哥和尼加拉瓜）杂交而来的品种。但是，作为一类重要的粮食作物，天然玉米籽粒在其营养价值上却有着重要的缺陷。根据已有的文献报道，玉米籽粒
酵母双杂交系统的发展和应用
随着对多种重要生物的大规模基因组测序工作的完成，基因工程领域又迎来了一个新的时代---功能基因组时代。它的任务就是对基因组中包含的全部基因的功能加以认识。生物体系的运作与蛋白质之间的互相作用密不可分，例如：DNA合成、基因转录激活、蛋白质翻译、修饰和定位以及信息传导等重要的生物过程均涉及到蛋白质复合
酵母双杂交系统简介
酵母双杂交系统酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的，研究活细胞内蛋白质相互作用，对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到，它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术。大量的研究文献表明，酵母双杂交技术既可以用来研究哺乳动物基因组编码的蛋白质之间的互作，也可
用插入诱变法分离突变体实验
实验材料酵母菌株BY4741试剂、试剂盒T4 DNA连接酶缓冲液Taq DNA 聚合酶仪器、耗材YPD平板锥形瓶SC-leu平板RNase A实验步骤展
黑暗中，植物感光的“眼睛”有用吗
因为一次偶然的发现，曾德圣开始了长达6年的科研“长跑”。近日，付出终于有了回报。在导师刘宏涛教授的带领下，在深圳大学从事博士后研究工作的曾德圣，以第一作者的身份在《细胞》发表研究。从2017年进入中国科学院大学硕博连读到在深圳大学深造，这是曾德圣7年研究生涯里发表的第一篇文章。该研究揭示了植物中蓝光
利用双杂交系统相互作用阱／筛选特定蛋白的肽适配体...
利用双杂交系统相互作用阱／筛选特定蛋白的肽适配体实验实验方法原理 实验材料 DNA酵母株试剂、试剂盒 PCR 引物聚乙二醇甘油存储液Tris·ClX-gal 平板完全极限（CM） 缺失成分培养基和平板仪器、耗材 30℃ 和 42℃ 培养箱或水浴实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其
动植物营养互作提高活性物质生物利用度获揭示
广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所畜禽加工研究团队在动植物营养互作提高活性物质生物利用度研究方面取得新进展。相关研究发表于Food Research International。程镜蓉副研究员、研究生沈双伟为该论文共同第一作者，刘学铭研究员为通讯作者。虾青素是一种强抗氧化剂，具有抗氧化、抗炎和抗
遗传所在植物microRNA生物生成机制研究中获进展
MicroRNA(miRNA)是一类真核生物中广泛存在的内源非编码小分子RNA。它主要通过碱基互补配对的形式在转录后水平上负调控靶mRNA，从而广泛地参与动植物各种生物学过程的调控。在植物miRNA生成通路中一些主要因子的功能已经被鉴定，其中Dicer-Like 1(DCL1)是主要负责切割
国内颠覆性突破－新型高通量药物筛选NanoSPR分子互作平台
2022年9月1日，Advanced Functional Materials杂志以“An Nanoplasmonic Portable Molecular Interaction Platform for High-Throughput Drug Screening”为题在线发表了华中科技大学
分子互作方法之BIAcore！
BIAcore是一种基于光学表面等离子共振(Surface Plasmon Resonance，简称SPR）原理的用于分子互作分析的常用方法。因为其准确性高、重复性好、应用广泛，目前SPR原理用于药物分析的方法已经被录入中国、美国、日本的药典，基于BIAcore方法的文献也已经超过了15000篇。那
分子互作仪选择宝典
在现代生物学、医学及转化医学、药物学等研究中，随着功能基因组研究的深入，生物大小分子的生物学功能研究占具着非常重要的地位；生物大小分子的相互作用分析成为目前分子功能学研究中不可缺少的重要手段，因此一个好的分子互作研究工具，无疑将对我们的科研起到极大的促进作用。目前研究分子互作的检测技术层出不穷，从传
武汉植物园在莲开花调控的分子机制研究中获进展
莲（荷花）是我国传统名花之一，颇具观赏价值。开花这一生物学行为是营养生长转向生殖生长的重要标志，开花时间也是决定莲观赏价值的重要因素。前期不同发育时期莲花芽的比较转录组数据表明，FT基因是关键的差异表达基因，暗示其在莲开花调控中的重要作用。然而，NnFT基因的功能及其调控开花的分子机制尚不清楚。
我所利用类器官芯片实现人体肝脏胰岛互作仿生模拟
近日，我所微流控芯片研究组（1807组）秦建华研究员团队利用类器官芯片，建立了人诱导多能干细胞（hiPSC）来源的肝-胰岛类器官互作体系，在体外模拟人体肝脏-胰岛轴及其在生理和病理条件下的糖刺激响应，为糖尿病等复杂代谢性疾病研究和新药发现等提供了新策略和新技术。 糖尿病是一种以慢性高血糖为主要特征
微生物所在植物MAPK信号转导机制研究中取得新进展
丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase, MAPK)是真核生物整合胞外信号与细胞反应的重要信号枢纽。MAPK在跨膜受体的下游，通过磷酸化不同底物蛋白来激发特异的基因表达和细胞反应。因此，MAPK底物蛋白的研究将加深研究人员对植物感受外界信号后启动特异
分子植物卓越中心揭示新的RdDM通路的分子机制
DNA甲基化是一种保守的表观遗传修饰，对基因表达和基因组稳定性具有重要意义。RNA介导的DNA甲基化（植物RdDM途径）是植物小RNA参与表观调控的重要方式，其需要两个植物特有的RNA聚合酶——Pol IV（大亚基NRPD1为催化核心）和Pol V（大亚基NRPE1为催化核心）以及大量的辅助蛋白
植物所等阐明水稻胚乳中清蛋白积累的分子机制
禾本科植物胚乳累积的淀粉和贮藏蛋白是人类重要的食物来源。根据在不同溶剂中的溶解度不同，水稻胚乳贮藏蛋白可分为谷蛋白、醇溶蛋白、清蛋白和球蛋白。其中清蛋白是水稻胚乳中丰富的水溶性蛋白，也是主要的致敏蛋白，人们对其积累调控机制尚不清楚。此前研究结果表明水稻胚乳特异性表达的转录因子NAC20和NAC2
我所利用单细胞分泌分析技术解析神经免疫细胞互作网络
近日，我所单细胞分析研究组（1820组）陆瑶研究员团队利用单细胞多种类分泌因子检测技术，实现了对神经—免疫细胞互作网络的解析。 随着全球人口逐步进入老龄化阶段，神经退行性疾病正成为威胁人类健康的重大疾病之一。与神经退行性疾病直接相关的是神经细胞，但神经细胞并不是孤立存在的，神经细胞需要通过物理接触
酵母双杂交实验
实验概要本实验构建了Bait载体和prey载体，酵母双杂交后，应用CPRG法定量测试了蛋白质相互作用。实验步骤1. Bait载体的构建将高保真PCR扩增的OsCCTlb(引物为OsCCT1bEcoRI5'和OsCCTlbXhoI3')和OsCNTlb(引物为OsCNTlb Eco
基因分离克隆的方法
1 基因芯片技术分离目的基因生物芯片是高密度固定在固相支持介质上的生物信息分子的微列阵。列阵中每个分子的序列及位置都是已知的，并按预先设定好的顺序点阵。基因芯片是生物芯片的一种，其上固定的是核算类物质，主要用于DNA、RNA分析。分为DNA芯片和微点阵两种。分离目的基因是是指从基因组中发现或找出某个
研究揭示叶绿体稳定性调控水稻产量和品质新机制
叶绿体发育调控模块 中国农科院供图 近日，中国水稻研究所水稻功能基因组学创新团队研究揭示，一个富含甘氨酸的蛋白LSL1参与调控叶绿体氧化还原稳态机制，进而影响水稻的产量与品质。相关研究成果发表于《中国科学—生命科学》（Science China-Life Sciences）。
基因工程操作技术及原理之基因克隆
1．克隆已知序列的基因根据已知基因的序列设计引物(primer)，利用PCR方法克隆基因。即使不同种属之间，基因编码区序列的同源性高于非编码区的序列。在某种植物的同源基因被克隆的条件下，可先构建eDNA文库或基因组文库，然后以该基因(或部分序列)为探针来筛选目的基因的克隆。2．功能克隆根据基因的产物
基因工程操作技术及原理之基因克隆
1．克隆已知序列的基因 根据已知基因的序列设计引物(primer)，利用PCR方法克隆基因。即使不同种属之间，基因编码区序列的同源性高于非编码区的序列。在某种植物的同源基因被克隆的条件下，可先构建eDNA文库或基因组文库，然后以该基因(或部分序列)为探针来筛选目的基因的克隆。 2．功能克隆 根据基
利用细胞的功能和小鼠的表型筛选
利用细胞的功能筛选与典型的受体-配体成键化验相比, 使用细胞的功能筛选有几个优点. 它可以识别拮抗肌和主缩肌的不同成键方式, 这通过测键能是分不开的. 同时, 在多步信号传递中有能筛选大量靶蛋白的优点. 由于有关于细胞的化合物吸收, 新陈代谢, 排泄, 以及细胞毒素等的信息, 可以忽略体外筛
利用细胞的功能和小鼠的表型筛选
利用细胞的功能筛选与典型的受体-配体成键化验相比, 使用细胞的功能筛选有几个优点. 它可以识别拮抗肌和主缩肌的不同成键方式, 这通过测键能是分不开的. 同时, 在多步信号传递中有能筛选大量靶蛋白的优点. 由于有关于细胞的化合物吸收, 新陈代谢, 排泄, 以及细胞毒素等的信息, 可以忽略体外筛选后的额