酵母菌随即孢子分析实验
将减数分裂产物从子囊中释放出来，通过超声破裂，直接铺在琼脂平板上，孢子菌落可以通过影印平板法来筛选目的基因型。实验材料酵母菌试剂、试剂盒2-疏基乙醇乙醇酵母裂解液仪器、耗材超声发生器探头离心机实验步骤1. 制备可供剖分四分体用的细胞。如果孢子在平板上形成，可用牙签挑起孢子放入装有5 ml 水的50 ml 烧瓶中；如果孢子在液体培养基中形成，可将1 ml 培养液加入5 ml 水中。然后加入0.5 ml 酵母裂解酶-20T溶液和10 μl 2-巯基乙醇，于30℃摇床缓缓摇动下培养过夜。 2. 加入5 ml 1.5%NP-40溶液，将混合悬液移到一支一次性的15 ml 试管中，冰浴15 min。 3. 超声波处理之前要清洁超声探头。先用清水洗，再用乙醇冲洗，然后将超声探头插入装有混合悬液的试管，并尽可能地插到液体中，但不要触到管底或管壁。以50%~70%的满功率超声30 s，置冰......阅读全文
酵母菌基因克隆实验——互补法
实验材料酵母菌实验步骤1. 用含LEU 2作为选择标志的酵母菌DNA文库转化lea 2 cdc 101-1酵母菌株，在23℃培养，依据插入片段的大小，筛选2 000~20 000个Leu+转化体。 2. 影印平板转化体，将其转印到预热的选择性平板，并于37℃培养筛选互补温感突变的表型。过夜培养之
酵母菌RNA制备实验—poly（A）+法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒酚氯仿异戊醇仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤一、热酸酚方案（基本方案1）1. TES及酸酚溶液的体积增加到4 ml。2. 操作时使用50 ml 聚丙烯离心管。3. 将得到大约10 mg RNA。 二、玻璃珠方案（备择方案1）1. 将体积增加到15 ml
生物素酰化探针的制备实验——随即寡核苷酸引物合成法
实验材料DNA试剂、试剂盒dNTP生物素klenow酶TEEDTALiCl乙醇仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1. 在1. 5 ml 离心管中加入500 ng~2 μg 模板DNA，加水至总体积为34 μl。 2. 在沸水中变性DNA 5 min 置于冰浴5 min，稍加旋离。3. 按顺序加入下
大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ－Klenow片段实验—随即寡核苷酸引物介导
实验方法原理此法是一种用以产生高放射比活、放射标记均匀分布的04八片段的切口平移方法。实验材料DNA试剂、试剂盒TEdNTP仪器、耗材水浴锅实验步骤1. 用合适的限制性内切酶消化DNA，DNA片段经电泳纯化或乙醇沉淀，用TE缓冲液重悬。 2. 在冰浴中混合下列物质：（1）2.5 μl 0.5mm
酵母菌菌株的保存与复苏实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 甘油DMSO仪器、耗材 冻存管实验步骤 1. 配制30%的甘油溶液，在每个15 mm×45 mm，4 ml 的带盖的冻存管中加入1 ml 甘油溶液，轻轻拧上螺盖，高压灭菌15 min。 2. 为了在冻存管中配制冻存菌液，加入1 ml 对数后期或静止早期的培养液，混匀
酵母菌菌株的保存与复苏实验
酵母菌菌株可于-70℃保存在15%甘油中（可存活5年以上），或于4℃保存在添加马铃薯淀粉的丰富培养基斜面上（可存活1~2年）。实验材料酵母菌试剂、试剂盒甘油DMSO仪器、耗材冻存管实验步骤1. 配制30%的甘油溶液，在每个15 mm×45 mm，4 ml 的带盖的冻存管中加入1 ml 甘油溶液，轻
隐孢子虫的实验诊断都有哪些？
病原学诊断肠内感染患者的诊断关键依靠粪便中找到卵囊。粪便(水样或糊状便为好)直接涂片染色，检出卵囊即可确诊。肠外感染的诊断通常需要活检，但胆汁、痰液及支气管灌洗液染色也有一定的帮助。急性患者类便中卵囊数量多，易检出慢性患者及隐性感染者，其粪便标本可先采用浓集技术处理，然后再染色镜检，以提高检出率。常
隐孢子虫形态学观察实验
实验方法原理 本虫是艾滋病患者慢性消耗性腹泻的重要病原，广泛寄生于人和其他哺乳动物。卵囊经粪便排出。卵囊椭圆形或圆形，大小 4～6 um，成熟卵囊内含 4个裸露的子孢子和一团残留体。传播途径和方式尚缺乏充分证据。诊断用三步粪检法：1. 湿片碘染法：隐孢子虫卵囊不着色，酵母及其他粪内异物染黄色；2.
肉孢子虫形态学观察实验
实验方法原理寄生人体的肉孢子虫有猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis）粪便中的孢子囊呈椭圆形，无色透明，大小为13.6~16.4 um x 8.3～10.6 um，通常为单个，偶见未破裂的卵囊内含两个孢子囊。肌肉内的肉孢子囊呈圆柱形或纺锤形，大小差别很大，通常为1～5 cm x
肉孢子虫形态学观察实验
实验方法原理寄生人体的肉孢子虫有猪人肉孢子虫（Sarcocystis suihominis）粪便中的孢子囊呈椭圆形，无色透明，大小为13.6~16.4 um x 8.3～10.6 um，通常为单个，偶见未破裂的卵囊内含两个孢子囊。肌肉内的肉孢子囊呈圆柱形或纺锤形，大小差别很大，通常为1～5
隐孢子虫形态学观察实验
实验方法原理本虫是艾滋病患者慢性消耗性腹泻的重要病原，广泛寄生于人和其他哺乳动物。卵囊经粪便排出。卵囊椭圆形或圆形，大小 4～6 um，成熟卵囊内含 4个裸露的子孢子和一团残留体。传播途径和方式尚缺乏充分证据。诊断用三步粪检法：1. 湿片碘染法：隐孢子虫卵囊不着色，酵母及其他粪内异物染黄色；2.
PM2.5监测国标将出台－仪器采购随即开展
9日，北京市环保局发布消息表示，PM2.5监测国家技术标准将出台，一旦此项标准出台，即在全市开展此项监测，监测前将会采用招投标的方式采购相关的监测仪器。 北京市环境保护监测中心相关负责人9日表示，今年将致力建成PM2.5监测网络，公布PM2.5数据站点年内将增至30-35个。其中，以中心城
分析姜科植物孢子发育的状况
目前有关姜科植物大、小孢子发育方面的研究报道极少，仅见于豆蔻属的春砂仁、山姜属的小草蔻和姜花属的姜属的研究，文中涉及到的小孢子均由定量风流孢子捕捉器捕获所得。姜科植物花药壁发育属基本型，绒毡层为分泌型。小孢子母细胞减数分裂为连续型，成熟花粉为2．细胞或3．细胞花粉：胚珠倒生，厚珠心，双珠被。胚囊发育
酵母菌基因组DNA的提取实验
基本方案 实验材料 酵母菌 试剂、试剂盒
酵母菌基因组DNA的提取实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 SE缓冲液山梨醇EDTA溶菌酶PVP蛋白酶K缓冲液 Tris仪器、耗材 高速冷冻离心机台式离心机恒温水浴低温冰箱冷冻真空干燥器取液器电泳仪水平电泳槽紫外观测仪实验步骤 1. 1.5 ml 对数生长期细菌细胞。2. 离心，12 000 rpm，1-2 min。3.
酵母菌RNA制备实验—玻璃珠法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒酚氯仿异戊醇仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤1. 培养并收集酵母菌细胞，冷冻细胞沉淀。2. 用300 μl RNA缓冲液中重悬细胞沉淀。 3. 加1体积冷的酸洗玻璃珠（体积与约200 μl 水相等）、300 μl 的用RNA缓冲液平衡的25：24 ：1酚/
卡氏肺孢子虫的实验诊断方法
1.病原学诊断 可收集痰液或支气管分泌物涂片镜检，但阳性率很低，应用支气管冲洗术可提高检出率。也可进行经皮穿刺肺活检、支气管镜肺活检或开胸肺活检，这些方法虽可靠，但损伤大。2.免疫学诊断 常用方法为IFA、ELISA或补体结合试验。但由于大多数正常人都曾有过肺孢子虫隐性感染，血清中都有特异性抗体存在
白色念珠菌的实验室分离及注意事项
白色念珠菌即假丝酵母菌是假丝酵母菌病的病原菌。假丝酵母菌病在世界各地均有报告，发生于一切年龄、一切种族的男女中。因病原菌感染部位不同，可引起皮肤、黏膜、支气管或肺发生病变，有时甚至引起败血症、心内膜炎、脑膜炎或其它内脏的炎症。假丝酵母菌属包括白假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、伪热带假丝酵母菌、克柔假丝酵
菌株的构建和四分体孢子的分析—二倍体细胞的孢子形成
一种新的酵母菌株的构建方案分为几个不同的步骤：①二倍体的构建，在这里两个单倍体进行交配；②孢子形成，在这里二倍体细胞被诱导形成孢子；③四分体孢子的制备，在这里囊壁被从四分体孢子上除去；④四分体孢子的分离，在这里来自一个单独的四分体 抱子的四个单倍体抱子中的每一个都被明确地安置在一块平板上，并继续生长
孢子培养统计分析系统功能介绍
在农业中，通过孢子捕捉和分析，可以预测病害的发生情况，避免由于农业病害严重发生造成的农业经济损失，是现代病虫害预测预警中重要的一项工作。而随着科技的发展以及孢子培养统计分析的需要，一款能够自动可自动完成气传病菌孢子的采集、培养、图像采集，并自动上传至服务器的孢子培养统计分析系统。以往传统的孢子捕捉器
酵母遗传学方法7：随机孢子分析
随机孢子分析1）孢子形成1．挑已形成孢子的二倍体单菌落接种在YPD平板上，尽可能把细胞涂薄一些，在30℃下培养12～16小时，超过16小时将明显降低孢子的形成率。2．上午，用一个无菌壳板钉取相当一火柴头量的细胞，转到含有2.5ml产孢培养基试管中，在25℃下旋转振荡培养。3．用光学显微镜检测孢子形成
酵母菌细胞的诱变实验——紫外光诱变
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD刀豆氨酸仪器、耗材紫外光杀菌灯紫外光放射量测定器实验步骤1. 将过夜培养的酵母菌培养液接种到5 ml YPD培养基中，于30℃培养。离心5~10 s，用1 ml 无菌水重悬沉淀细胞，重复洗涤1次，再用1 ml 无菌水重悬。 2. 检查细胞密度，记录数据后将细胞密度调
酵母菌细胞的诱变实验——甲乙硫醚诱变
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD磷酸钠缓冲液甲乙硫醚刀豆氨酸硫代硫酸钠仪器、耗材试管摇床离心机平板实验步骤1. 将过夜培养的待诱变酵母菌株转接于5 ml YPD培养基，于30℃继续培养。检查细胞密度，记录并调整到2×108细胞/ml。2. 转移1 ml 的菌悬液到无菌的离心管中。高速离心5~10
酵母菌RNA制备实验—热酸性酚抽提法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒TES酸性酚氯仿乙酸钠乙醇仪器、耗材离心管离心机摇床实验步骤1. 酵母细胞在10 ml 培养基中生长至指数中期（OD600=1.0）。 2. 将培养液转移到50 ml，离心管，于4℃，1 500 g 离心3 min。 3. 弃上清，菌体沉淀用1 ml 冰冷的水重悬，转
卡氏肺孢子虫形态学观察实验
实验方法原理卡氏肺孢子虫的大滋养体外形多变，长2~8μm，姬氏液染色后仅见深紫色的细胞核一个，胞质浅兰色。小滋养体大小为1~ 1.5μm，呈球形或阿米巴形。包囊前期，长 3～5μm，蛋圆形，有几条丝状伪足，一堆线粒体和1~8个胞核用相差显微镜可见包囊内有8个子孢子，经特殊染色可见核。实验步骤包囊：取
卡氏肺孢子虫的实验室诊断
1.病原学诊断可收集痰液或支气管分泌物涂片镜检，但阳性率很低，应用支气管冲洗术可提高检出率。也可进行经皮穿刺肺活检、支气管镜肺活检或开胸肺活检，这些方法虽可靠，但损伤大。2.免疫学诊断常用方法为IFA、ELISA或补体结合试验。但由于大多数正常人都曾有过肺孢子虫隐性感染，医学|教育网血清中都有特异性
诊断卡氏肺孢子虫的实验方法
1.病原学诊断 可收集痰液或支气管分泌物涂片镜检，但阳性率很低，应用支气管冲洗术可提高检出率。也可进行经皮穿刺肺活检、支气管镜肺活检或开胸肺活检，这些方法虽可靠，但损伤大。2.免疫学诊断 常用方法为IFA、ELISA或补体结合试验。但由于大多数正常人都曾有过肺孢子虫隐性感染，血清中都有特异性抗体存在
卡氏肺孢子虫形态学观察实验
实验方法原理卡氏肺孢子虫的大滋养体外形多变，长2~8μm，姬氏液染色后仅见深紫色的细胞核一个，胞质浅兰色。小滋养体大小为1~ 1.5μm，呈球形或阿米巴形。包囊前期，长 3～5μm，蛋圆形，有几条丝状伪足，一堆线粒体和1~8个胞核用相差显微镜可见包囊内有8个子孢子，经特殊染色可见核。实验步骤
卡氏肺孢子虫的诊断实验方法
1、病原学诊断 可收集痰液或支气管分泌物涂片镜检，但阳性率很低，应用支气管冲洗术可提高检出率。也可进行经皮穿刺肺活检、支气管镜肺活检或开胸肺活检，这些方法虽可靠，但损伤大。2、免疫学诊断 常用方法为IFA、ELISA或补体结合试验。但由于大多数正常人都曾有过肺孢子虫隐性感染，血清中都有特异性抗体存在
酵母菌和霉菌的形态观察
一、目的要求1、观察酵母菌、老菌的个全形态以及它们之间的区别。2、学会用水浸法观察酵母菌和霉菌的技术。3、了解酵母菌和霉菌细胞的构造和繁殖方式的特点。二、实验材料1、接种针、接种杯、酒精杯、载玻片、盖玻片、吸管。2、0.1%美蓝液、乳酸-石炭酸液（配方见附录）。3、菌种 啤酒酵母、假丝酵母、黑根霉、