组织和胚胎固定及包埋实验
实验材料器官试剂、试剂盒多聚甲醛石蜡已传二甲苯仪器、耗材玻璃瓶培养箱巴斯德吸管包埋提环包埋模具实验步骤1. 将已解剖的器官或胚胎置于写有标签的20 ml 螺口玻璃小瓶中(经硅烷化处理的玻璃瓶专用于小量样品的处理),如入4℃新鲜配制的4%PFA,置4℃固定至所需时间止。 2. 于60℃烘箱中熔化石蜡。3. 固定完成后,倒去固定液(注意勿丢失样品),以50%乙醇替代。然后立即换新鲜的乙醇,在50%乙醇中脱水3次,室温放置每次20 min。继而以70%乙醇脱水3 次,室温每次20 min。(样品于70%乙醇中在4℃可存数日)。4. 室温下,置样品于95%乙醇2次,毎次20 min。5. 室温下,置样品于100%乙醇2次,每次20 min。 6. 以二甲苯换去100%乙醇,然后立即换以新鲜二甲苯,在二甲苯中放置2次,每次10 min。 ......阅读全文
组织和胚胎固定及包埋实验
实验材料器官试剂、试剂盒多聚甲醛石蜡已传二甲苯仪器、耗材玻璃瓶培养箱巴斯德吸管包埋提环包埋模具实验步骤1. 将已解剖的器官或胚胎置于写有标签的20 ml 螺口玻璃小瓶中(经硅烷化处理的玻璃瓶专用于小量样品的处理),如入4℃新鲜配制的4%PFA,置4℃固定至所需时间止。 2. 于60℃烘箱中熔化石
组织和胚胎固定及包埋实验
实验材料 器官试剂、试剂盒 多聚甲醛石蜡已传二甲苯仪器、耗材 玻璃瓶培养箱巴斯德吸管包埋提环包埋模具实验步骤 将已解剖的器官或胚胎置于写有标签的20 ml 螺口玻璃小瓶中(经硅烷化处理的玻璃瓶专用于小量样品的处理),如入4℃新鲜配制的4%PFA,置4℃固定至所需时间止。2. 于60℃烘箱中熔化
细胞固定切片和包埋实验
哺乳动物肌梭的初级终末—使 用 1 um 连续切片的光学显微镜研究实验实验材料猫 部分显露肌梭试剂、试剂盒二甲砷酸钠缓冲液戊二醛四氧化锇乙醇环氧乙烷甲苯胺蓝派罗宁仪器、耗材玻片实验步骤一、固定将取出的肌肉置于含 5% 戊二醛的 0.1mol/l 二甲砷酸钠缓冲液内,PH 值为 7.2, 原位固定 5
细胞固定切片和包埋实验
经验交流(0)实验材料猫 部分显露肌梭 试剂、试剂盒二甲砷酸钠缓冲液
细胞固定切片和包埋实验
哺乳动物肌梭的初级终末—使 用 1 um 连续切片的光学显微镜研究实验 实验材料 猫 部分显露肌梭
组织固定、包埋及切片实操指南
如何做出一张合格的组织切片? 一般要先取材→固定→透明→包埋→切片,最后进行染色组化等操作。本文着重叙述取材以后如何进行包埋和切片。 包埋可分为OCT包埋(冰冻切片)与石蜡包埋。 冰冻切片对于组织的抗原性保留比较好,但是形态保留比较差,一般用来做原位杂交ISH,免疫荧光IF。冰冻切片较厚一
从石蜡包埋固定的组织中制备-RNA-实验
实验材料 石蜡包埋的组织样品试剂、试剂盒 甲酰胺消化缓冲液乙醇肝糖异丙醇苯酚 氯仿蛋白酶 KTrizol二甲苯仪器、耗材 微量离心管恒温箱实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂去离子化的甲酰胺焦碳酸二乙酯(DEPC) 处理过的水消化缓冲液(lmol/L 异硫氰酸胍,25 mmol/Lβ-巯基乙醇
从石蜡包埋固定的组织中制备-RNA-实验
该方案是由 Godfrey 等改进 Fisher 的方案发表的。此前已有从固定组织中纯化 RNA 的方案发表。Ambion 和 Roche 发明了从石蜡包埋的组织中纯化 RNA 的商品化试剂盒。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。实验材料石蜡包埋的组织样品试剂、试剂盒甲酰胺
从石蜡包埋固定的组织中制备-RNA-实验
实验材料 石蜡包埋的组织样品 试剂、试剂盒 甲酰胺 消化缓冲液 乙醇 肝糖
组织石蜡包埋和切片技术
包埋剂embedding agent 在制作切片或超薄切片时,由于组织是柔软的,或局部的软硬不均,这样制作厚薄均匀的切片是困难的。所以有必要用一定物质浸透组织内部,整个组织一样硬化,以利于切成薄片,这种物质叫做包埋剂。一股用光学显微镜观察的切片,用石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等作包埋剂;电子显微镜则
从福尔马林固定、石蜡包埋的组织中提取RNA
试剂、试剂盒 R N A 消化液 β-巯基乙醇 蛋白酶 K(20 mg ml) 水平衡苯酚 氯仿 糖原 TE 缓冲液异丙醇无水乙醇乙醇 DEPC 水实验步骤 一 材料与设备1)RNA 消化液:每 100ml 包含 40ml 4mol/L 硫氰酸胍,3mllmol/L Tris-HC(PH7.6),2
从福尔马林固定、石蜡包埋的组织中提取RNA
试剂、试剂盒 R N A 消化液 β-巯基乙醇 蛋白酶 K(20 mg ml) 水平衡苯酚 氯仿 糖原 TE
基础知识:福尔马林固定石蜡包埋组织DNA提取
本篇文章是关于一个我们很少被问问题的题目,因为太简单,方法很常规结果也很少出错。我想说的是:福尔马林固定石蜡包埋组织的DNA提取。什么是FFPE组织?FFPE指的是为维持细胞核蛋白结构,先用福尔马林固定然后固体石蜡包埋,以便使用超薄切片机切成5-10微米厚的薄片的组织样品(通常是疑似肿瘤组织)。福尔
丙烯酰胺包埋法固定化酶实验
实验方法原理丙烯酰胺的聚合已经应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),也应用于酶的包埋。长的聚合物链通过交联 N,N'-亚甲基二丙烯酰胺连接而成(图 1)。聚合反应是通过N,N,N',N'-四甲基乙二胺(TEMED)和过硫酸铵引发的。通过改变交联剂的数量,可以控制聚合物网孔尺寸
丙烯酰胺包埋法固定化酶实验
实验方法原理 丙烯酰胺的聚合已经应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),也应用于酶的包埋。长的聚合物链通过交联 N,N'-亚甲基二丙烯酰胺连接而成(图 1)。聚合反应是通过N,N,N',N'-四甲基乙二胺(TEMED)和过硫酸铵引发的。通过改变交联剂的数量,可以控制聚合
丙烯酰胺包埋法固定化酶实验
基本方案 实验方法原理 丙烯酰胺的聚合已经应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),也应用于酶的包埋。长的聚合物链通过交联 N,N'-亚甲基二丙烯酰胺
冰冻组织固定和蔗糖浸制实验
实验材料冰冻组织试剂、试剂盒PBSPFA蔗糖实验步骤1. 于4℃,在2%PFA固定液(做免疫组织化学时)或4%PFA固定液(做原位杂交时) 中,固定小的组织样品或分离的胚胎(如第7、第8天的小鼠胚胎)30 min。2. 在PBS中清洗组织样品2次。3. 在30%蔗糖中浸制样品,直至组织沉下(1~3
冰冻组织固定和蔗糖浸制实验
实验方法原理 实验材料 冰冻组织试剂、试剂盒 PBSPFA蔗糖实验步骤 1. 于4℃,在2%PFA固定液(做免疫组织化学时)或4%PFA固定液(做原位杂交时) 中,固定小的组织样品或分离的胚胎(如第7、第8天的小鼠胚胎)30 min。2. 在PBS中清洗组织样品2次。3. 在30%蔗糖中浸制样品,直
LSCM组织的冷冻包埋和切片
组织的冷冻包埋和切片 组织的冷冻方法可根据固定和保存条件不同而不同,尽可能加快冷冻速度以力求减少组织在冷冻 过 程 中 冰晶 的 形 成 。组织冷冻后 ,使用冷冻切片机,将组织切成 5 ~ 15 μm 的切片,粘贴于处理过的载玻片上,室温干燥 1h 后,可进行免疫荧光抗体标记。或放入载玻片盒,- 8
2.1.8-从福尔马林固定、石蜡包埋的组织中提取RNA
从病理科取来的经福尔马林固定、石蜡包埋的组织可用于RNA 表达分析.常规固定和石蜡包埋后,从活组织、手术、尸体组织中分离出来的 RNA 并不完全降解.并且即使在切除后未立即固定,富含 RNase 的器宫如胰腺内仍存在大约 100 个碱基或更长的 RNA碎片。下面介绍一种从 6〜8 um 组织切片中提
丙烯酰胺包埋法固定化酶实验2
实验方法原理丙烯酰胺的聚合已经应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),也应用于酶的包埋。长的聚合物链通过交联 N,N'-亚甲基二丙烯酰胺连接而成(图 1)。聚合反应是通过N,N,N',N'-四甲基乙二胺(TEMED)和过硫酸铵引发的。通过改变交联剂的数量,可以控制聚合物网孔尺寸
酶固定化技术固定化方法包埋法
包埋固定化法是把酶固定聚合物材料的格子结构或微囊结构等多空载体中,而底物仍能渗入格子或微囊内与酶相接触。这个方法比较简便,酶分子仅仅是被包埋起来,生物活性被破坏的程度低,但此法对大分子底物不适用。1) 网格型将酶或包埋在凝胶细微网格中,制成一定形状的固定化酶,称为网格型包埋法。也称为凝胶包埋法。2)
酶的包埋法固定化技术凝胶包埋法介绍
凝胶包埋法常用的载体有海藻酸钠凝胶、角叉菜胶、明胶、琼脂凝胶,卡拉胶等天然凝胶以及聚丙烯酰胺、聚乙烯醇和光交联树脂等合成凝胶或树脂。 天然凝胶采用溶胶状天然高分子物质在酶存在下凝胶化的方法,包埋时条件温和、操作简便,对酶括性的影响甚少,但强度较差。合成的高分子则采用合成高分子的单体或预聚物在酶
什么是组织包埋技术
太高深太转业了。需要现场观察。干冰(固态二氧化碳)温度为摄氏负78.5度。可能是冷冻时间过长温度过低,加上OCT包埋方法不合理所致。推荐:《冰冻切片OCT包埋方法的改进》
组织学——包埋技术
Tissue Preparation for Methy Methacrylate EmbeddingMethyl Methacrylate Embedding Protocols (Energy Beam Sciences, Inc.)General protocol for plastic em
什么是组织包埋技术
太高深太转业了。需要现场观察。干冰(固态二氧化碳)温度为摄氏负78.5度。可能是冷冻时间过长温度过低,加上OCT包埋方法不合理所致。推荐:《冰冻切片OCT包埋方法的改进》
什么叫包埋法固定化酶
固定化酶(immobilized enzyme)是用物理的或化学的方法使酶与水不溶性大分子载体结合或把酶包埋在水不溶性凝胶或半透膜的微囊体中制成的。酶固定化后一般稳定性增加,易从反应系统中分离,且易于控制,能反复多次使用。便于运输和贮存,有利于自动化生产。固定化酶是近十余年发展起来的酶应用技术,在工
组织和细胞的固定方法
组织和细胞的固定方法 固定 的目的是用人为的方法尽可能使组织细胞的形态结构和化学成分保持生活状态,防止组织细胞死后发生自溶和组织腐败。固定还能增加组织块硬度,使其更容易切片,使不同的结构更容易染色。 固定方法有物理固定和化学固定两类,物理固定可采用空气干燥(血涂片)、骤冷(在液氮中迅速冷冻)或微波
组织和细胞的固定方法
组织和细胞的固定方法 固定 的目的是用人为的方法尽可能使组织细胞的形态结构和化学成分保持生活状态,防止组织细胞死后发生自溶和组织腐败。固定还能增加组织块硬度,使其更容易切片,使不同的结构更容易染色。 固定方法有物理固定和化学固定两类,物理固定可采用空气干燥(血涂片)、骤冷(在液氮中迅速冷冻)或微波固
组织固定
一、固定的目的和意义活体组织一旦停止血液循环和物质代谢就会因物质代谢障碍产生一系列的生物化学和组织化学改变,并导致形态学上可见的细胞器变化和细胞组织的形态改变直至腐 败自溶。固定的目的就是要通过使用化学和物理的方法,尽可能地保存组织细胞离体时具有的生理和病理形态结构及生物化学和免疫化学成分。良好