基础知识:福尔马林固定石蜡包埋组织DNA提取

本篇文章是关于一个我们很少被问问题的题目,因为太简单,方法很常规结果也很少出错。我想说的是:福尔马林固定石蜡包埋组织的DNA提取。什么是FFPE组织?FFPE指的是为维持细胞核蛋白结构,先用福尔马林固定然后固体石蜡包埋,以便使用超薄切片机切成5-10微米厚的薄片的组织样品(通常是疑似肿瘤组织)。福尔马林与蛋白氨基发生了不可逆交联,保护细胞结构完整性,染色显示组织中肿瘤带来的畸形结构。但是,固定剂的交联作用对核酸来说是有害的。福尔马林石蜡和交联作用还妨碍了核酸的提取,抑制脱氧核糖核酸聚合酶、PCR扩增,都必须去除。从这些样品中获取DNA的前景看似很暗淡。幸运的是,我们已经客服了这两种主要障碍,从FFPE组织中获得高质量DNA不再困难。石蜡如何去除?传统去除石蜡的方法通常是使用二甲苯,一种高度易燃的有机溶剂。组织切片用二甲苯反复冲洗数次溶解石蜡,然后在DNA提取前再用乙醇反复冲洗去除残余二甲苯。如此反复多次的冲洗步骤,每次都会有少量......阅读全文

关于福尔马林的基本介绍

  福尔马林(formalin;福美林)是甲醛〈formaldehyde〉(HCHO)的水溶液,外观无色透明,具有腐蚀性,且因内含的甲醛挥发性很强,开瓶后一下子就会散发出强烈的刺鼻味道。  甲醛是碳、氢和氧的化合物,在平常的情况下是气体状态,带有强烈刺激眼膜和呼吸器官的特性。  福尔马林的甲醛含量为

关于福尔马林的毒性介绍

  福尔马林能与蛋白质中NH2基结合生成甲酰化蛋白,其反应速度受pH值和温度的显著影响。气态甲醛强烈刺激黏膜,甲醛水溶液可使蛋白质变性,被广泛用于杀菌剂。对动物实验中,大鼠经口LD50为800mg/kg,豚鼠为240mg/kg。对人体,在低浓度下最初刺激眼黏膜,浓度稍高时刺激上呼吸道,引起咳嗽、胸闷

关于福尔马林的药物分析介绍

  方法名称:福尔马林溶液—甲醛的测定—中和滴定法。  应用范围:本方法采用滴定法测定甲醛溶液中甲醛的含量。  本方法适用于甲醛溶液。  方法原理:供试品置锥形瓶中,加水、过氧化氢试液及溴代麝香草酚蓝指示液,滴加氢氧化钠滴定液至溶液显蓝色,再精密加氢氧化钠滴定液,瓶口置一玻璃小漏斗,置水浴上加热,不

关于福尔马林的医学用途介绍

  福尔马林的使用涵盖之层面其实相当广泛,其中因甲醛能与蛋白质的氨基结合,使蛋白质凝固,因此在医药上可做为检验时的组织固定剂、以及防腐剂等。在浓度与剂量足够时,此特性对大部分微生物都具破坏能力,所以也常做为一种消毒剂。而福尔马林在工业上的使用,性质也相当多,例如运用于制作黏着剂、染剂、涂料等,所衍生

关于福尔马林的医用信息介绍

  福尔马林本身是有刺激性气味的无色液体,主要成分是甲醛,一种易溶于水的高刺激性有毒气体,具有易燃性及腐蚀性,在空气里一般能测出微量。在甲醛制造方面通常利用氧化甲醇的化工方法制得。甲醇氧化之后可得甲醛,而甲醛继续氧化之后可得甲酸。三者皆为毒性物质,在剂量相同的情形下,以对人体的毒性而言,毒性比为甲醇

福尔马林:保存标本-帮助DNA和RNA的提取

  在历史上人们使用了各种固定液(各种浓度的乙醇和福尔马林,目前公认的固定液是10%的中性福尔马林溶液)。马尔福林基本的固定能力是通过蛋白质交联,从而使固定物质更加牢固。福尔马林还可以作为适合基因组研究的培养基,比如DNA和RNA的提取研究。  DNA和RNA的恢复,对于许多科学领域和医学专业都非常

从福尔马林固定、石蜡包埋的组织中提取RNA

试剂、试剂盒 R N A 消化液 β-巯基乙醇 蛋白酶 K(20 mg ml) 水平衡苯酚 氯仿 糖原 TE 缓冲液异丙醇无水乙醇乙醇 DEPC 水实验步骤 一 材料与设备1)RNA 消化液:每 100ml 包含 40ml 4mol/L 硫氰酸胍,3mllmol/L Tris-HC(PH7.6),2

从福尔马林固定、石蜡包埋的组织中提取RNA

            试剂、试剂盒 R N A 消化液 β-巯基乙醇 蛋白酶 K(20 mg ml) 水平衡苯酚 氯仿 糖原 TE

基础知识:福尔马林固定石蜡包埋组织DNA提取

本篇文章是关于一个我们很少被问问题的题目,因为太简单,方法很常规结果也很少出错。我想说的是:福尔马林固定石蜡包埋组织的DNA提取。什么是FFPE组织?FFPE指的是为维持细胞核蛋白结构,先用福尔马林固定然后固体石蜡包埋,以便使用超薄切片机切成5-10微米厚的薄片的组织样品(通常是疑似肿瘤组织)。福尔

海参造假花样翻新-增重加盐糖保鲜用福尔马林

  又是一年中秋节,海参迎来销售旺季。但记者近日采访发现,一些无良商贩对海参造假手法花样翻新,不仅破坏了海参的营养功效,还会对人体健康产生危害。业内人士透露,经过“特殊处理”的海参“还不如鸡蛋有营养”。  海参造假花样翻新  近年来,海参产量在不断增加。然而市场的无序竞争,带来了诸多乱

2.1.8-从福尔马林固定、石蜡包埋的组织中提取RNA

从病理科取来的经福尔马林固定、石蜡包埋的组织可用于RNA 表达分析.常规固定和石蜡包埋后,从活组织、手术、尸体组织中分离出来的 RNA 并不完全降解.并且即使在切除后未立即固定,富含 RNase 的器宫如胰腺内仍存在大约 100 个碱基或更长的 RNA碎片。下面介绍一种从 6〜8 um 组织切片中提

成都黑作坊牛血制“鸭血”-泡福尔马林装嫩

作坊内还待加工的血旺  部分血旺被检测出含有甲醛,新都当地相关部门已对该作坊进行查处   “有人用牛血旺冒充猪血和鸭血,还往里面添加福尔马林。”11月28日,华西都市报接到张欣(化名)发来的一条短信,她说自己曾在新都区一家加工血旺的手工作坊工作近1年,亲眼目睹了该作坊生产问题血旺的全过程。   

韩每日乳业牛奶检出福尔马林-多款奶粉中国有售

  韩国第三大奶制品生产商――每日乳业的牛奶中日前被检测出含有福尔马林,原因是其使用了受污染的进口饲料。记者了解到,每日乳业有多款乳制品在中国有售,其中国总代理方面昨天表示,进口到中国的奶粉其奶源地并非韩国。  据了解,每日乳业的牛奶中被检测出含有福尔马林,原因是其使用了受

AAF固定液(酒精醋酸福尔马林混合固定液)使用说明

AAF固定液说明关键词:固定液,缓冲液,生化溶液,乔羽生物试剂简介: 固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。固定剂对细胞核细胞外成分发生物理改变。未

蔬菜与甲醛“亲密接触”后会如何?

   有关菜篮子的新闻莫过于甲醛白菜、甲醛莲藕、甲醛山药了。为此,实验室将甲醛(福尔马林溶液)喷洒在蔬菜上,还原被甲醛污染过的蔬菜,并教您如何鉴别新鲜蔬菜,为您以后在选购蔬菜时提个醒。   甲醛小知识   在做实验之前,记者恶补化学知识并咨询化学教师,了解到甲醛是一种无色的刺激性气体,易溶于水、醇和

组织样品稳定剂在室温安全保存生物样品中RNA、DNA和蛋...

组织样品稳定剂在室温安全保存生物样品中RNA、DNA和蛋白质的应用还在使用福尔马林【主要成分是甲醛;浓度35%或37%以上的甲醛水溶液】?福尔马林作保存液,效果好、价格低,广泛地使用;可惜缺点是福尔马林不适宜在冰箱中冷藏,否则容易发生凝聚;保存易形成多聚甲醛使浸液变浊,影响观察;实验室每年要更换一次

混合型固定液的类型及功能特点

混合原则:a、优缺点互补;b、膨胀与收缩相互平衡;c、强氧化剂与还原剂应分别配置。1、酒精-福尔马林液70% 酒精 100 ml福尔马林 2 -10 ml固定植物一般组织,尤其用在柱头中的萌发花粉管的固定。固定后的材料,立即用作观察。通常固定24小时,可长久保存。特点:不易收缩,常用于固定花粉管。2

混合型固定液的种类介绍

混合原则:a、优缺点互补;b、膨胀与收缩相互平衡;c、强氧化剂与还原剂应分别配置。1、酒精-福尔马林液70% 酒精 100 ml福尔马林 2 -10 ml固定植物一般组织,尤其用在柱头中的萌发花粉管的固定。固定后的材料,立即用作观察。通常固定24小时,可长久保存。特点:不易收缩,常用于固定花粉管。2

小型两栖类动物的标本制作

实验概要本实验以蛙类为例,说明了标本制作过程。主要试剂1. 福尔马林液:用于固定和保存标本。2. 0.5~0.8%氢氧化钠溶液:用于腐蚀标本上的残存肌肉。3. 汽油:用于脱掉标本上的脂肪。4. 3%过氧化氢:用于漂白标本。主要设备1. 解剖盘、标本瓶、注射器:用于盛放标本和向标本注射固定液。2. 解

寄生虫标本的固定与保存

蠕虫成虫的固定与保存1、线虫生理盐水洗净虫体粘附的污物,然后用加热至70~80℃的70%酒精或巴氏液(甲醛3份、生理盐水97份)固定,冷却后移至新的70%酒精或巴氏液中保存。小型线虫(旋毛虫、蛲虫、钩虫等)宜用甘油酒精(70%酒精95ml、甘油5ml)加热固定,保存于80%酒精中。也可用冰醋酸固定约

Bouin氏固定液的配制方法

Bouin氏固定液   苦味酸饱和水溶液 75ml  福尔马林(40%甲醛) 25ml  冰醋酸 5ml  1g苦味酸可制成75ml饱和水溶液。  先将苦味酸溶解成水溶液,然后再加入福尔马林和冰醋酸摇匀即成。  

免疫细胞化学技术观察细胞成分实验

            实验方法原理 免疫细胞化学是在细胞化学技术的基础上,吸收免疫学的理论和技术发展起来的一项技术,其基本原理是用荧光素或酶等标记物或显色物标记特异性抗体,通过免疫学中的抗原抗体反应与细胞内的相应抗原结合,形成带有荧光素或显色物的抗原抗体复合物,因

免疫细胞化学技术观察细胞成分实验

实验方法原理免疫细胞化学是在细胞化学技术的基础上,吸收免疫学的理论和技术发展起来的一项技术,其基本原理是用荧光素或酶等标记物或显色物标记特异性抗体,通过免疫学中的抗原抗体反应与细胞内的相应抗原结合,形成带有荧光素或显色物的抗原抗体复合物,因此可用荧光显微镜或普通光学显微镜观察到复合物的存在,达到检测

荚膜染色液的配制方法

荚膜染色液   1.黑色素水溶液  黑色素 5g  蒸馏水 100ml  福尔马林(40%甲醛) 0.5ml  将黑色素在蒸馏水中煮沸5分钟,然后加入福尔马林作防腐剂。  2.番红染液  与革兰氏染液中番红复染液相同。

摊贩互相揭短工业火碱中泡制出有毒海参

        海参是一种名贵海产品,体内含有50多种营养成分,但是,如果海参中掺杂了火碱、福尔马林等对人体有毒的物质,又会是怎样呢?   记者近日对沈阳海参市场进行了暗访。   业内人士指出,按理来说,选购海参应选择体大肉厚无泥沙、肉质又有弹性的,但如发现海参过分膨胀、肉质失去韧性、参刺脱

线粒体及高尔基体永久标本的制作

(一)显示线粒体—Regand染色法1.取材固定:固定材料必须新鲜,所以要求杀死动物后立即取材,切成1—2mm3大小的块,投入固定液中。固定液:3%重铬酸钾20ml福尔马林(中性)5ml固定4天(可在冰箱中),每天换固定液一次。4天后转入3%重铬酸钾中7天,每2天换一次液体。2.流水冲洗24小时后,

光学显微技术中使用的固定剂的配方介绍

凝固型固定剂1、酒精(ethyl,alcohol)常用95%酒精及纯酒精。酒精穿透力强,固定时间常在1小时以内。高浓度酒精有使材料收缩的作用。70%的酒精可作保存液。配制低度酒精必须要用普通酒精即95%的酒精,绝不可用纯酒精。酒精为还原剂,不能与铬酸、锇酸、重铬酸钾等氧化剂配合。酒精可使核酸,蛋白质

冷库除霉有哪些常用方法?

   霉菌最爱在阴湿的地方生长,由于它能适应较低的温度,所以在冷冻厂的高温库中为害最为严重。霉菌在冷库内生长后,孢子到处飞扬,对于肉类、蛋品的质量影响很大,所以霉菌是冷库内主要危害者。霉菌和致病菌不同,它本身是无害的,也不产生毒素,但是生了霉菌严重地损害了商品的外观,并且促进了肉类、蛋品的霉烂变质。

常规切片制备的注意事项(一)

1 . 取材 取材的好坏,直接影响切片的质量。医生在取材时,首先要有一把锋利的取材刀,在切割组织时要避免取材刀来回拖拉,切取的组织块厚薄要均匀,一般厚度以0.2 ~0.3cm为适,较容易发脆的组织如甲状腺、肝脏、血块、淋巴结、大块癌组织等可适当厚一点,而脂肪组织、肺组织、纤维性肿瘤、平滑肌瘤等

常见的疼痛研究模型及方法(三)

福尔马林致痛模型 本模型的目的是模拟急性组织损伤所致的持续性疼痛。一般以大鼠为实验对象。在动物一肢足背皮下注射稀释的福尔马林(formalin)溶液,导致动物的行为改变如安静时的屈腿、运动时的跛行以及舔足等。这些行为的程度(如舔足时间)与福尔马林浓度成正比,一般认为它是疼痛的象征。此外,其它行为如理