SS琼脂配置实验——倾注平板
S-S琼脂(沙门,志贺菌属琼脂)为选择性培养基,对大肠杆菌的抑制作用很强,对肠道病原菌无抑制作用,因此,可以增加标本的接种量,提高对肠道病原菌的阳性分离率。实验方法原理1. 中性红为指示剂,在酸性时呈红色,在碱性时呈淡黄色,一般肠道致病菌不分解乳糖,但分解蛋白胨,产生碱性物质,故菌落呈淡黄色。大肠杆菌发酵乳糖,产酸使指示剂变红,故菌落呈红色,中性红可被光线破坏,应将培养基保存于暗处。2. 枸橼酸钠和煌绿能抑制大肠杆菌的生长,枸橼酸钠不抑制肠道致病菌。煌绿和中性红对细菌都有一定的毒性。硫代硫酸钠能中和中性红,煌绿的毒性,且能使大肠杆菌的红色菌落颜色鲜明。枸橼酸铁也能中和中性红,煌绿的毒性作用。胆盐与枸橼酸钠,硫代硫酸钠合用时,能加强对大肠杆菌的抑菌作用,而胆盐又能促进沙门菌的生长。试剂、试剂盒肉膏液琼脂;乳糖;枸橼酸钠;硫代硫酸钠;枸橼酸铁溶液;中性红水溶液;煌绿水溶液;胆盐实验步骤加热溶化已灭菌的肉膏液琼......阅读全文
怎么配置1%琼脂糖胶
1、制备1%琼脂糖凝胶(大胶用70ml,小胶用50ml):称取0.7 g(0.5 g)琼脂糖置于锥形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小烧杯.微波炉加热煮沸3次至琼脂糖全部融化,摇匀,即成1.0%琼脂糖凝胶液。2、胶板制备:取电泳槽内的有机玻璃内槽(制胶槽)洗干净,晾干,放入制胶玻
怎么配置1%琼脂糖胶
1、制备1%琼脂糖凝胶(大胶用70ml,小胶用50ml):称取0.7 g(0.5 g)琼脂糖置于锥形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小烧杯.微波炉加热煮沸3次至琼脂糖全部融化,摇匀,即成1.0%琼脂糖凝胶液。2、胶板制备:取电泳槽内的有机玻璃内槽(制胶槽)洗干净,晾干,放入制胶玻
食品中菌落总数检测的能力验证操作过程
一、能力实验的目的 开展能力验证试验是检验实验室检测能力和提高检测水平的重要手段。利用实验室间的比对,对实验室的校准或检验工作进行判定。 关键是,能力验证是考察实验室检验能力的外部质量活动,组织方提供试验样本,在菌落总数项目上,一般会考虑增加上述难度。 二、测定标准 食品国家标准:GB
Muellerhintot(MH)琼脂平板制备实验_脱水培养基制备法
实验方法原理Mueller-Hinton琼脂由哈佛大学的John Howard Mueller和Jane Hinton共同开发,作为淋球菌和脑膜炎球菌的培养物,于1941年发表该方法。它通常包含:牛肉提取物:2.0克;酪蛋白的酸水解产物:17.5克;淀粉:1.5克;琼脂:17.0克。实验材料牛肉提取
菌落总数测定中的一些要点及结果计算
检测过程注意事项: 菌落总数: 在GB 4789.2的培养条件下所得结果,只包括一群在平板计数琼脂上生长发育的嗜中温需氧菌或兼性厌氧菌的菌落总数。 根据食品卫生标准要求和对样品污染情况的估计,选择2~3个稀释度。加入样品时要注意外来的污染。 培养基倾注的温度与厚度是实验正确与否的关键。(
琼脂扩散实验——单向琼脂扩散
实验材料待检血清试剂、试剂盒生理盐水琼脂粉仪器、耗材微量进样器打孔器玻璃板湿盒实验步骤1. 将适当稀释(事先滴定)的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60℃水浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。2. 在免疫琼脂板上按一定距离(1.2~1.5厘米)打孔,见图1。图1 单向琼脂扩散试验抗原孔位置示
琼脂扩散实验——双向琼脂扩散
实验材料待测血清试剂、试剂盒生理盐水琼脂粉仪器、耗材载玻片打孔器微量进样器实验步骤1. 取一清洁载玻片,倾注3.5~4.0毫升加热熔化的1%食盐琼脂制成琼脂板。2. 凝固后,用直径3毫米打孔器,孔间距为5毫米。孔的排列方式如图2所示。图2 双向琼脂扩散原抗体孔位置示意图3. 用微量进样器于中央
概述菌落培养的操作要点
1、倾注用培养基应在46℃水浴内保温,温度过高会影响细菌生长,过低琼脂易于凝因而不能与菌液充分混匀。如无水浴,应以皮肤感受较热而不烫为宜。倾注培养基的量规定不一,从12~20ml不等,一般以15ml较为适宜,平板过厚可影响观察,太薄又易于干裂。倾注时,培基底部如有沉淀物,应将底部弃去,以免与菌落
平板在培养箱中培养后干裂缩水如何处理和预防?
平皿干裂缩水,与琼脂的保水性、倾注培养基的量、平皿的透气性、培养箱条件等因素均有关系。 a.琼脂:不同的琼脂在保水性方面略有差异,保水性差的琼脂可能会出现严重缩水或者干裂。 b.培养基的量:倾注的培养基越少,平板越薄越容易干裂。按照GB4789要求,倾注融化的培养基到平皿中,使之在平皿中形成
含琼脂平板培养基保存注意事项
含琼脂平板培养基的保存应注意保存温度、保存时间、冷凝水及其他细节。1、保存温度:购买的血平板或者其它一次性的各种细菌培养平板一般均应放置4℃冰箱保存,在使用前应提前1小时取出,平衡至室温,但曾有文献报道指出,一次性的营养琼脂室温保存比4℃保存更有利于细菌培养基。(文献名《一次性普通营养琼脂平板保存方
样品的处理和稀释倾注培养
1.操作方法:根据标准要求或对污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,分别在制10倍递增稀释的同时,以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做两个平皿。 将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml,并转动平皿,混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液(不含样品)
关于菌落总数的检验步骤—倾注培养的介绍
1.操作方法:根据标准要求或对污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,分别在制10倍递增稀释的同时,以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做两个平皿。 将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml,并转动平皿,混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液(不含样品)
盘基网柄菌培养物发育和储存实验_琼脂平板上同步发育
实验材料盘基网柄菌细胞试剂、试剂盒饥饿缓冲液仪器、耗材饥饿培养基实验步骤1. 准备饥饿培养基试剂。2. 收集 2X108 的盘基网柄菌细胞,100 g 离心 5 分钟。用 100 ml 饥饿缓冲液洗一遍,再重悬于 10 ml 该缓冲液中。3. 加 9 ml 细胞悬液到饥饿平板上,均匀涂布,使细胞吸附
自动微生物分析仪Synbiosis
英国Synbiosis自动微生物分析仪具有自动的菌落计数和抑菌区测量功能,适合研究单位、医院、检验检疫机构和工业领域进行微生物菌落计数和含量分析、抗生素的抗菌性测试以及细菌的抗生素敏感性分析等工作。 自动微生物分析仪 ProtoCOL 使用者界面,先进、清晰、简单 ·Win
血平板与巧克力平板
血平板(1)成分:普通营养琼脂(或哥伦比亚琼脂),脱纤维羊血(2)制法:取所需要量的普通营养琼脂(或哥伦比亚琼脂),加蒸馏水溶解后,高压灭菌。冷却至50℃,加入一定量(5%)的羊血,倾注平板。(3)用途:适于各类细菌的生长。巧克力平板(1)成份:普通营养琼脂(或哥伦比亚琼脂),氯化血红素,万古霉素,
琼脂扩散实验
实验材料 待检血清试剂、试剂盒 生理盐水琼脂粉仪器、耗材 微量进样器打孔器玻璃板湿盒实验步骤 1. 将适当稀释(事先滴定)的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60℃水浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。2. 在免疫琼脂板上按一定距离(1.2~1.5厘米)打孔,见图1。1~5孔加参考血清,6~7孔
菌落总数测定中的注意事项
检测过程中的注意事项 1、在GB 4789.2的培养条件下所得结果,只包括一群在平板计数琼脂上生长发育的嗜中温需氧菌或兼性厌氧菌的菌落总数。2、根据食品卫生标准要求和对样品污染情况的估计,选择2~3个稀释度。加入样品时要注意外来的污染。3、为防止细菌增殖及产生片状菌落,在加入样液后,应在15min内
菌落总数测定中的注意事项
检测过程中的注意事项 1、在GB 4789.2的培养条件下所得结果,只包括一群在平板计数琼脂上生长发育的嗜中温需氧菌或兼性厌氧菌的菌落总数。2、根据食品卫生标准要求和对样品污染情况的估计,选择2~3个稀释度。加入样品时要注意外来的污染。3、为防止细菌增殖及产生片状菌落,在加入样液后,应在15min内
细菌的耐药性变异——-R因子传递实验
实验方法原理 应用具有链霉素R 因子的大肠杆菌作为供体菌,对链霉素敏感的痢疾杆菌作为受体菌。经共同孵育后,由于供体菌与受体菌间的接合,供体菌的链霉素R 因子转移给受体菌,而使痢疾杆菌获得耐链霉素的特性,因此能在含链霉素的S-S平板上生长。由于痢疾杆菌不分解乳糖而呈无色半透明菌落。大肠杆菌能分
巧克力平板制备实验
实验方法原理 巧克力平板应用羊血或免血制备。因其中含有Ⅹ和Ⅴ因子,嗜血杆菌、奈瑟氏菌等生长良好,凡疑有这些菌种存在的标本,均须接种巧克力平板。血液标本培养,增苗后有细苗生长,若移种巧克力平板上,有利于分离到更多的细菌。实验步骤 成分:牛肉浸出液: 1000 ml蛋白胨:
血平板制备实验
实验方法原理肉汤琼脂中加羊血或兔血均可。用血量为5-7%。在血平板上除了可以观察菌落的形态外,还可判断溶血情况,菌落周围的培养基内红细胞完全破坏为β-溶血。菌落周围成绿色为α-溶血。溶血情况可以显微镜下用低倍镜观察。实验步骤成分:牛肉浸出液: 1000 ml蛋白胨:
巧克力平板制备实验
实验方法原理主要是蛋白胨和牛肉粉用来提供细菌生长所需的碳源、氮源、氨基酸以及维生素。氯化钠维持培养基中的渗透压,琼脂用做凝固剂。脱纤维羊血提供氯化血红素和辅酶I,为嗜血杆菌属的生长提供特殊营养。巧克力平板培养基还能够培养其他细菌,主要的原因是血液中有V、X因子,这两种因子是位于红细胞中的,一般细菌不
血平板制备实验
实验方法原理 肉汤琼脂中加羊血或兔血均可。用血量为5-7%。在血平板上除了可以观察菌落的形态外,还可判断溶血情况,菌落周围的培养基内红细胞完全破坏为β-溶血。菌落周围成绿色为α-溶血。溶血情况可以显微镜下用低倍镜观察。实验步骤 成分:牛肉浸出液: 1000 ml蛋白胨:
抗臭氧型真菌平板计数琼脂培养基配方
中文名抗臭氧型真菌平板计数琼脂培养基(抗臭氧型虎红琼脂培养基)配方 英文名Anti-Ozone Rose Bengal Agar用途抗臭氧型真菌平板计数琼脂培养基用于带有臭氧的食品、饮料及饮用水等真菌总数的抗干扰测定用。标准配方(g/L)配方(每升) 含量 蛋白胨
抗臭氧型细菌平板计数琼脂培养基配方
中文名抗臭氧型细菌平板计数琼脂培养基配方 英文名Anti-Ozone Nutrient Agar用途用于带有臭氧的食品、饮料及饮用水等细菌总数的抗干扰测定用标准配方(g/L)配方(每升) 含量 蛋白胨 10.0g 牛肉膏粉 3
关于菌落总数测定的方法介绍
(一)平板表面涂布法 将营养琼脂制成平板,经50℃,l-2小时或35℃,18-20小时干燥后,于其上滴加检样稀释液0.2mL,用L捧涂布于整个平板的表面,放置片刻(约10分钟),将平板翻转,移至36±1℃温箱内培养24±2小时(水产品用30℃培养48±2小时),取出,按前述方式进行菌落计数,然
菌落总数测定的2种特殊方法
(一)平板表面涂布法 将营养琼脂培养基制成平板,经50℃,l-2小时或35℃,18-20小时干燥后,于其上滴加检样稀释液0.2mL,用L捧涂布于整个平板的表面,放置片刻(约10分钟),将平板翻转,移至36±1℃温箱内培养24±2小时(水产品用30℃培养48±2小时),取出,按前述方式进行菌落
平板的制备和储存方法
倾注融化的培养基到平皿中,使之在平皿中形成厚度至少为3 mm(直径90 mm的平皿,通常要加入18 mL~20 mL琼脂培养基)。将平皿盖好皿盖后放到水平平面使琼脂冷却凝固。如果平板需储存,或者培养时间超过48 h或培养温度高于40 ℃,则需要倾注更多的培养基。凝固后的培养基应立即使用或存放于
细菌的耐药性变异——-R-因子传递实验——划线法
有些细菌携带接合性R 质粒,并能通过接合将耐药性传递给原来敏感的细菌,使其迅速转为耐药菌。耐药性质粒除了在同种细菌中作水平传递外,还可以在异种细菌之间传递,因而使对抗生素的耐药菌株不断增多,造成防治上很大的困难。实验方法原理应用具有链霉素R 因子的大肠杆菌作为供体菌,对链霉素敏感的痢疾杆菌作为受体菌
脱水合成培养基配制与使用
1. 一般要求正确制备培养基是微生物检验的最基础步骤之一,使用脱水培养基和其他成分,尤其是含有有毒物质(如胆盐或其他选择剂)的成分时,应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。培养基的不正确制备会导致培养基出现质量问题,如含琼脂培养基不凝固、ph不在要求范围、灭菌后颜色变深等。使用商品化脱水合成