离体主动脉条的标本制备实验

实验材料家兔大鼠试剂、试剂盒克氏液仪器、耗材玻璃棒麦氏浴管实验步骤取兔或大鼠一只,猛击其头致死,立即剖开胸腔,分离胸主动脉,尽可能于近心脏处把其切断,迅速置于盛有克氏液并通以95%氧气及5%二氧化碳的培养皿中,剔除血管外结缔组织及脂肪,洗去凝血块,轻轻套在较主动脉稍小的玻璃棒上。然后用眼科剪把主动脉作螺旋形剪开,制成宽约3mm、长1.5~2cm的主动脉条,两端分别用线结扎,置于盛有克氏液并通以95%氧气及5%二氧化碳的恒温37℃的麦氏浴管内,平稳90~120min后进行实验。也可把胸主动脉剪成多个宽2mm的动脉环代替血管条做实验。 注意事项(1)本标本勿用手拿,应以镊子夹取,且不可在空气中暴露过久,以免失去敏感性。 (2)克氏液必须用新鲜蒸馏水配制。 (3)余下的动脉条连同克氏液置于4℃冰箱中,1~2天内仍可用做实验;采用大白鼠主动脉条时,可制成宽2~2.5mm,长2~3cm。 展开......阅读全文

人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备1

一、 人外周血染色体制备实验原理 人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下,人外周血小淋巴细胞都处在G1期(或G0期),但在体外给予一定的条件,进行培养,经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种取材简易、用血量少的培养方法已被广泛采用。在培养液中加入植

人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备2

⑦ 再固定:加固定液8ml,混匀,固定10min。⑧ 离心:同上,吸去上清液。⑨ 制细胞悬液:根据细胞量多少,加入适量固定液,充分混匀,制成细胞悬液。⑩ 滴片:取出预先经冰水浸泡的载玻片,用吸管吸取混匀的细胞悬液在离冰片约30cm距离进行滴片,每片约滴2~3滴细胞悬液,使细胞较好分散。一般每一培养瓶

正常细胞常规核型的标本制备_人体染色体常规核型分析

实验材料染色体仪器、耗材显微镜玻片盖玻片滴管实验步骤一、人体染色体的观察1.  取制备较好的染色体玻片标本,先在低倍镜下观察。2.  在标本中选择一个染色体之间分散较好,互不重叠的中期分裂相,置于视野中央,然后换油镜仔细观察。3.  每个染色体都含有两条染色单体,两单体连接处为着丝粒。4.  计数时

细胞分裂素对离体子叶的保绿效应实验

实验方法原理 细胞分裂素可阻碍核酸水解酶和蛋白水解酶的产生,因此能延缓器官衰老,使离体叶片保绿,保绿作用的强弱可通过测定叶绿素含量的变化来衡量,也可由叶色变黄枯死的时间来衡量。实验材料 黄瓜子叶萝卜子叶试剂、试剂盒 16-BA溶液95﹪乙醇CaCO3粉末仪器、耗材 电子分析天平分光光度计恒温培养箱恒

细胞分裂素对离体子叶的保绿效应实验

实验方法原理细胞分裂素可阻碍核酸水解酶和蛋白水解酶的产生,因此能延缓器官衰老,使离体叶片保绿,保绿作用的强弱可通过测定叶绿素含量的变化来衡量,也可由叶色变黄枯死的时间来衡量。实验材料黄瓜子叶                                                      

细胞分裂素对离体子叶的保绿效应实验

使用恒温培养箱、恒温水浴锅、了解细胞分裂素对离体子叶的保绿作用及基本原理和方法。二、原理  细胞分裂素可阻碍核酸水解酶和蛋白水解酶的产生,因此能延缓器官衰老,使离体叶片保绿,保绿作用的强弱可通过测定叶绿素含量的变化来衡量,也可由叶色变黄枯死的时间来衡量。  三、材料、仪器设备及试剂  1. 材料:黄

细胞分裂素对离体子叶的保绿效应实验

实验方法原理细胞分裂素可阻碍核酸水解酶和蛋白水解酶的产生,因此能延缓器官衰老,使离体叶片保绿,保绿作用的强弱可通过测定叶绿素含量的变化来衡量,也可由叶色变黄枯死的时间来衡量。实验材料黄瓜子叶萝卜子叶试剂、试剂盒16-BA溶液95﹪乙醇CaCO3粉末仪器、耗材电子分析天平分光光度计恒温培养箱恒温水浴锅

染色体的标本制作及其组型实验3

4.2 染色体的组型实验4.2.1. 选择染色体清晰的照相底片,用放大机制作出放大10倍的清晰照片。4.2.2 将染色体逐一剪下,并对每个中期染色体逐一进行测量,包括每条染色体的长度和每个臂的长度。4.2.3. 根据测量数据,计算出每对染色体平均的相对长度、臂指数与着丝粒指数。4.2.4 把相对长度

染色体的标本制作及其组型实验2

3.3.5. 磷酸缓冲液:1/15 mol/L Na2HPO4•12H2O: 2.39g 溶于100ml双蒸水中。1/15 mol/L KH2PO4 0.907g 溶于100ml双蒸水中。取1/15 mol/L Na2HPO4•12H2O液80ml、1/15 mol/L KH2PO4液 20ml混合

基因扩增技术的标本制备

在将Taq DNA聚合酶引入PCR反应,并使之达到自动化之后,PCR反应已变得十分的简单了。但是PCR样品的采集及制备却并非同样简单,而且,许多PCR的失败都归因于标本的制备不当。用于PCR的标本必须经适当处理后才能使用,因为标本中的许多杂质能抑制Taq DNA聚合酶的活性。另外,处理标本可使待扩增

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验4

胚性愈伤的诱导和再生实验材料胚仪器、耗材诱导培养基再生培养基实验步骤1. 共培养 2~3 天后,将胚转移至诱导培养基以诱导胚性愈伤(表 5.1,诱导培养基 a 适用于面包小麦,诱导培养基 b 适用于硬粒小麦)。记录下转移的胚的个数以便计算转化效率,转移时确保胚的盾片仍朝上。22~23℃ 避光培养。2

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验1

根癌农杆菌菌液的准备实验材料农杆菌细胞试剂、试剂盒根癌农杆菌甘油原液抗生素仪器、耗材MG L 液体培养基实验步骤1. 从根癌农杆菌甘油原液中吸取 400 μl 加入含 10 ml MG/L 液体培养基并添加相应抗生素的 50 ml 无菌管中,28℃、250 r/min 摇床振荡培养过夜(17~20

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验6

转基因植株的鉴定及种子的收获实验材料再生苗仪器、耗材Magenta 盒实验步骤1. 经第二轮选择后,挑出根茎生长良好的再生苗(见注 16 ) 移栽于土壤中。首先,将各株再生苗移入 8 cm2 的盆钵里生长 1~2 周,使它们能够逐渐适应温室条件。当小苗足够大时,再取叶片提取 DNA 用于 PCR 和

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验——选择

实验材料愈伤组织仪器、耗材选择培养基Magenta 培养盒实验步骤1. 将培养物转移至第一轮选择培养基中(表 5.1,选择培养基 1 ) ( 见注 15)。一些愈伤组织在转移时会自然散开,尽管这无关紧要,但放置时应将散开的愈伤块彼此靠近,以标记它们是来自同一幼胚。2. 培养 3 或 4 周后,筛选出

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验2

根癌农杆菌接种外植体的准备(见注 6)实验材料面包小麦硬粒小麦试剂、试剂盒乙醇仪器、耗材层流罩超净台实验步骤1. 面包小麦和硬粒小麦开花后 12~16 天剪下幼穗,将种子幼体用 70% ( V/V)的乙醇浸泡 1 min,再换用 10% 乙醇(V/V)轻轻晃动 10 min 进行表面消毒,最后用足量

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验7

转化效率的计算仪器、耗材Southern 杂交分析实验步骤1. 转化效率通常用百分比表示。计算方法为:确定的独立转基因单株总数 x100 /侵染的总幼胚数。2. 如果一个胚得到一株以上的转基因植株,这视为一个独立转化事件,来自同一转化事件的其他所有单株视为姐妹株。这些姐妹株有可能来源于不同的细胞,属

正常细胞常规核型的标本制备实验_微量全血培养

正常细胞常规核型的标本制备可应用于:(1)进行核型分析;(2)与肿瘤核型进行对比研究。实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞,在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的

从实体组织中制备粗微体实验_从大鼠肝脏制备微体

实验材料雄大鼠试剂、试剂盒蔗糖蔗糖HM仪器、耗材玻璃板实验步骤1. 用断颈法杀死约 150 g 重的雄大鼠,大鼠的数量取决于要制备的粗微体的数量。由于一个 150 g 重的大鼠肝(6 g)大约每克肝蛋白含有 10 mg 粗微体,所以大鼠的数量可以以回收率为 50% 来进行估计。2. 流干血液后,打开

离体微血管张力测定系统

DMT 620M离体微血管张力测定系统是610M系列的升级产品,是目前最受用户欢迎的产品。是一套精密度高且耐用的科研设备。用于各类大血管、小血管、气管及肠道管等组织研究。样本直径范围:60μm至10mm。(最大直径可达10mm)DMT 620M离体微血管张力测定系统特点:? 四通道系统可同时测量四个

植物离体叶片失水表型观察及其失水率测定实验

实验方法原理植物水分散失的主要器官是叶片,其中又主要是通过气孔来实现的。因此,离体叶片水分的散失情况在很大程度上反映了整体植株的水分状态。离体叶片暴露于空气中,由于水分的扩散而又得不到及时的补充,叶片会出现萎焉表型,随着时间的延长而加剧。同时,通过称重法可以定量地测定出叶片在不同时间段失水的程度(失

植物离体叶片失水表型观察及其失水率测定实验

实验方法原理植物水分散失的主要器官是叶片,其中又主要是通过气孔来实现的。因此,离体叶片水分的散失情况在很大程度上反映了整体植株的水分状态。离体叶片暴露于空气中,由于水分的扩散而又得不到及时的补充,叶片会出现萎焉表型,随着时间的延长而加剧。同时,通过称重法可以定量地测定出叶片在不同时间段失水的程度(失

植物离体叶片失水表型观察及其失水率测定实验

实验方法原理 植物水分散失的主要器官是叶片,其中又主要是通过气孔来实现的。因此,离体叶片水分的散失情况在很大程度上反映了整体植株的水分状态。离体叶片暴露于空气中,由于水分的扩散而又得不到及时的补充,叶片会出现萎焉表型,随着时间的延长而加剧。同时,通过称重法可以定量地测定出叶片在不同时间段失水的程度(

整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验

实验方法原理 高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份,而保留膜的脂类成分,其结果,细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除,增加了标本的透明度,同时内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体等生物膜系统被完整地保存下来。高锰酸钾固定剂在固定标本的过程中,能形成二氧化锰,可在细胞的各种膜结构的脂类亲水端形成微细的沉

整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验

实验方法原理高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份,而保留膜的脂类成分,其结果,细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除,增加了标本的透明度,同时内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体等生物膜系统被完整地保存下来。高锰酸钾固定剂在固定标本的过程中,能形成二氧化锰,可在细胞的各种膜结构的脂类亲水端形成微细的沉淀

电子显微镜生物标本的制备及观察实验

透射电子显微镜 扫描电子显微镜             实验方法原理 电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具,它以电子束为照明源,利用电子流具有波动的性质,在电磁场的作用下,

电子显微镜生物标本的制备及观察实验

透射电子显微镜 扫描电子显微镜             实验方法原理 电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具,它以电子束为照明源,利用电子流具有波动的性质,在电磁场的作用下,

整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验

基本方案             实验方法原理 高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份,而保留膜的脂类成分,其结果,细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除,增加了标本的透明度,同时内质

整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验

基本方案             实验方法原理 高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份,而保留膜的脂类成分,其结果,细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除,增加了标本的透明度,同时内质

临床基因扩增检验实验室标本制备区的污染防治

下述操作在该区进行:临床标本的保存,核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。要正确使用加样器。由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。可通过在本区内设立正压条件避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。为避免样本间的交叉污染,加入

从实体组织中制备粗微体实验_从狗的胰脏中制备粗微体

实验材料胰脏试剂、试剂盒HM 缓冲液蔗糖-缓冲液三乙基氨基乙酸缓冲液实验步骤1. 从动物身体切下胰脏,立即用大约 50 ml 冷 HM 缓冲液冲洗,放置于干净的纸巾上,去除结缔组织:匀浆介质(HM)0.25 mol/L 蔗糖-缓冲液A缓冲液A:50 mmol/L 三乙基氨基乙酸缓冲液(TEA),pH