完整蛋白质从SDSPAGE胶中的电洗脱及其MALDITOFMS分析实验

试剂、试剂盒电泳缓冲液蛋白质染色液微量离心管仪器、耗材水平凝胶电泳仪器电洗脱试剂盒真空离心浓缩仪实验步骤3.1 蛋白质检测一 般而言,凝胶染色和脱色非常易于操作。在本实验方法中,我们使用 ElectroBlue 染料代替有固定作用的考马斯亮蓝染色液显色蛋白质(见注释 1) 。( 1 ) SDS-PAGE 电泳后,用 300 ml Milli-Q 水或去离子水漂洗凝胶(8 cm X 10 cm ) 3 次,每次 10 min。( 2 ) 用 ElectroBlue 染料给凝胶染色,用大约 20 ml 染色液浸泡凝胶(8 cm X 10 cm),缓慢摇动 2 h ( 见注释 3 )。( 3 ) 用 300 mL Milli-Q 水或去离子水漂洗凝胶脱色,直至达到所需的凝胶背景。每 30 min 换一次水。3.2 电洗脱( 1 ) 将电洗脱管垂直向上放置,加入 0.8 ml Milli-Q 水或去离子水,盖上盖。等待 10 min 并......阅读全文

完整蛋白质从SDSPAGE胶中的电洗脱及其MALDITOF-MS-分析实验

试剂、试剂盒电泳缓冲液蛋白质染色液微量离心管仪器、耗材水平凝胶电泳仪器电洗脱试剂盒真空离心浓缩仪实验步骤3.1 蛋白质检测一 般而言,凝胶染色和脱色非常易于操作。在本实验方法中,我们使用 ElectroBlue 染料代替有固定作用的考马斯亮蓝染色液显色蛋白质(见注释 1) 。( 1 ) SDS-PA

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试剂、试剂盒:电泳缓冲液                                                                  蛋白质染色液                                                                  

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试剂、试剂盒 电泳缓冲液蛋白质染色液微量离心管仪器、耗材 水平凝胶电泳仪器电洗脱试剂盒真空离心浓缩仪实验步骤 3.1 蛋白质检测一 般而言,凝胶染色和脱色非常易于操作。在本实验方法中,我们使用 ElectroBlue 染料代替有固定作用的考马斯亮蓝染色液显色蛋白质(见注释 1) 。( 1 ) SDS

MALDITOF/TOF-和LCMS/MS有什么区别

1、与LC/MS/MS相比,MALDI-TOF的识别结果不可靠,特别是当一个点中含有多个蛋白时。对于一个点的水解蛋白液来说,其中含有大量的多肽,并且经常含有修饰基团。一般来说,一个蛋白能水解出20~50种肽。用MALDI-TOF质谱测量多肽混合物时,待测组分不能完全离子化,对于一个蛋白得不到足够的肽

MALDITOF/TOF-和LCMS/MS有什么区别

1、与LC/MS/MS相比,MALDI-TOF的识别结果不可靠,特别是当一个点中含有多个蛋白时。对于一个点的水解蛋白液来说,其中含有大量的多肽,并且经常含有修饰基团。一般来说,一个蛋白能水解出20~50种肽。用MALDI-TOF质谱测量多肽混合物时,待测组分不能完全离子化,对于一个蛋白得不到足够的肽

MALDITOF/TOF和LCMS/MS有什么区别

1、与LC/MS/MS相比,MALDI-TOF的识别结果不可靠,特别是当一个点中含有多个蛋白时。对于一个点的水解蛋白液来说,其中含有大量的多肽,并且经常含有修饰基团。一般来说,一个蛋白能水解出20~50种肽。用MALDI-TOF质谱测量多肽混合物时,待测组分不能完全离子化,对于一个蛋白得不到足够的肽

膜蛋白的分离、鉴定及其功能分析—SDSPAGE-和MALDITOFMS-实验

试剂、试剂盒分离缓冲液增溶缓冲液洗脱缓冲液Laemmli 样品缓冲液胶段冲洗缓冲液酶解缓冲液肽抽提缓冲液实验步骤3.1 膜的分离因为在研磨材料时,要分离的膜组分以小囊泡形式与可溶的胞质蛋白质混合在一起,所以,最好在分离、鉴定膜蛋白前将这些胞质蛋白质去除掉。为了达到这个目的,我们需要用可穿透这些囊泡的

国标解读丨动物毛发MALDITOF定性定量检测方法

GB/T 42699.2-2023《纺织品 某些动物毛纤维蛋白质组定性和定量分析 第2部分:还原蛋白质多肽分析基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法》,在2023-08-06正式发布,将在2024-03-01正式实施。该国家标准由 TC209(全国纺织品标准化技术委员会)归口

铜绿假单胞菌耐药表型分析及MALDITOF-MS在其同源性分析

目的:初步分析我院某科铜绿假单胞菌耐药表型及评价采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术(Matrix-Assisted Laser Desorption/ Ionization Time of Flight Mass Spectrometry ,MALDI-TOF MS)的VITEK MS质谱仪(

天瑞将借MALDITOF-MS布局医疗诊断

  分析测试百科网讯 天瑞仪器在最近一次的投资者关系活动中透露,其研发的基质辅助激光解析电离飞行时间质谱,即MALDI-TOF MS已经完成原理样机的研制,正进行工程化样机试制,并已经开始了医疗器械注册检验报批工作。  基质辅助激光解析电离(matrix assisted laser desorpt

MALDITOF-MS可以检测环境污染物

       熟悉MALDI-TOF MS的吃瓜群众都知道,MALDI虽然对分析生物大分子很有功力,但在分析小分子,尤其是1,000m/z以下的分子时,会有严重的基质干扰。在环境分析中,目前的分析目标主要集中于小分子,一般多用气相/气质分析,只有个别研究中才会使用液相/液质,更何谈擅长分析生物大分子

厦门质谱MALDITOF-MS中标昆山疾控

  分析测试百科网讯 近日,昆山市疾控中心对飞行质谱微生物鉴定仪的招标终于开标,开标结果显示,中标者为厦门质谱,中标型号为microTyper MS。  microTyper MS  这是分析测试百科网首次发现国产MALDI-TOF MS在涉食品安全的检验检测体系中中标。在此之前,MALDI-TOF

MALDITOF-MS用于诊断SARSCoV2感染

来自智利塔尔卡的研究者Nachtigall和他的同事开发了基于MALDI-TOF MS(基质辅助激光解析电离飞行时间质谱)诊断SARS-CoV-2感染的方法,并且初步验证了方法性能,结果显示该方法的准确度达到93.9%,假阳性率7%,假阴性率5%。没错,就是普通微生物实验室常用来鉴定菌种的MALDI

MALDITOF-MS技术在临床微生物实验室中的应用前景

质谱技术在临床微生物实验室中的应用前景引言自20世纪80年代起, 质谱技术就已经成为科学研究中用于蛋白分析的强大工具。随着技术的不断成熟和广泛使用, 其在微生物检验常规诊断中的作用越来越受到关注, 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术(matrix-assisted laser desorption

MALDITOF-MS在临床微生物检验中的应用进展

  1、前言  从目前的情况来看,大多数的微生物实验室采用的是一些传统的细菌鉴定手段,如革兰氏染色、氧化酶等生化反应,或者是采用梅里埃公司的API和Vitek鉴定系统。这些检测手段都很浪费时间,通常需要六到八个小时,对于一些难培养的细菌鉴定来说,将会耗费更多的时间。有时候我们也会采用一些分子生物学上

MALDITOF-MS技术培训交流会通知

  为进一步提高高校优质仪器设备资源的利用率,帮助中小企业开展科研人才队伍建设、提升科研人才的大型贵重仪器理论知识水平和实际操作技能,提高仪器企业的科技创新能力和核心竞争力,北京科学仪器装备协作服务中心委托首都科技条件平台北京大学研发实验服务基地,组织技术专家和学术专家,面向企业用户开展大型仪器设备

MALDITOF-MS用于中草药鉴定的可行性

      近日,香港理工大学姚钟平团队发表在”International Journal of Mass Spectrometry”的一篇文章,报道了其使用MALDI-TOF MS进行五味子鉴定的初步成果。      五味子为常用滋补强壮中药,一般为木兰科植物五味子[Sehisandra chin

SDSPAGE实验方法

试剂:1. 5x样品缓冲液(10ml):0.6ml 1mol/l的Tris-HCl(pH6.8),5ml 50%甘油,2ml 10%的SDS,0.5ml巯基乙醇,1ml 1%溴酚蓝,0.9ml蒸馏水。可在4℃保存数周,或在-20℃保存数月。2. 凝胶贮液:在通风橱中,称取丙烯酰胺30g,甲叉双丙烯酰

ICPMS实验分析实用指南

  ICP-MS全称是电感耦合等离子体质谱仪,可以用于物质试样中一个或者多个元素的定性、半定量和定量分析;能测定周期表中90%的元素,特别是对金属元素分析擅长,他和ICP-OES、AAS是化学元素分析的常用的三种仪器,其中ICP-MS的检测限低,可以达到PPT(10的负12次方)级。

岛津在ASMS推出新MALDITOF-MS软件包-简化成像数据分析

   分析测试百科网讯 2018年6月4日,岛津科学仪器公司(SSI)宣布推出用于MALDI-8020台式系统的AuraSolution,SampleStation和QC Reporter软件包。这些MALDI-TOF质谱软件包便于自动分析。用于自动化的SampleStation和AuraSolut

MALDITOF-MS可快速、准确鉴定假丝酵母菌

MALDI-TOF MS可快速、准确鉴定假丝酵母菌,对复合体鉴定有优势  对假丝酵母菌种类鉴定可指导临床更好治疗外阴阴道假丝酵母菌病(vulvovaginalcandidiasis,VVC),但传统的假丝酵母菌的鉴定方法如芽管试验、显色培养和API鉴定等精准性不能令人满意,基因测序分析目前认为是鉴定

2017-CCLTA——大会报告:《MALDITOF-MS-引领分子诊断新时代》

  第三届全国临床检验装备技术与应用学术大会暨第六届SAC/TC136高峰论坛已于5月7日在橘子洲头——长沙国际会展中心完美落幕。可谓盛况空前!专家学者的报告精彩纷呈,让我们颇受启发。  5月7日下午,在质谱学组分论坛中,毅新专家——高级工程师、斯坦福大学访问学者马庆伟教授,作为医学装备协会检验医学

MALDITOF-MS在中段尿样本细菌直接检测中的应用

引言基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)是近些年发展起来的一种新型的细菌鉴定技术。它主要根据不同细菌具有不同的蛋白质指纹

MALDITOF-MS质谱仪-在临床微生物鉴定中的应用

19世纪末“正电荷粒子束在磁场中发生偏转”被发现后,1912年世界上第一台质谱仪在英国面世,从此一种通过测量离子电荷质量比,而进行样品成分和结构分析的方法在生物学及医学上大放异彩。质谱以其灵敏度高、特异性强、分析速度快、多指标同时检测等特点跻身高端定量检测分析仪器行列。分辨率、灵敏度、质量范围、质量

MALDITOF-MS质谱仪-在临床微生物鉴定中的应用

  19世纪末“正电荷粒子束在磁场中发生偏转”被发现后,1912年世界上第一台质谱仪在英国面世,从此一种通过测量离子电荷质量比,而进行样品成分和结构分析的方法在生物学及医学上大放异彩。质谱以其灵敏度高、特异性强、分析速度快、多指标同时检测等特点跻身高端定量检测分析仪器行列。  分辨率、灵敏度、质量范

岛津推出基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱30周年

  分析测试百科网讯 今年是岛津推出世界第一台基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)的30周年。由于MALDI-TOF MS的多功能性、易用性、低运营成本和独特功能,该技术在分析和临床实验室中无处不在。  通过岛津公司(日本京都)及其子公司Kratos Analytical(英

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定真菌的准确性

  导 读  临床上对真菌的检测主要有直接涂片法、真菌培养法以及病理学组织检查等传统方法,而针对真菌的早期诊断则多以检测速度和准确性更好的G实验、GM实验以及PCR等方法为主。  基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)是近年发展起来的一种简便、快速、准确、经济的病原微生物鉴定方

SDSPAGE常见问题分析

  1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响?   在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很